Solución DNasa I (2500 U/ml)

La ADNasa I Thermo Scientific elimina el ADN no deseado de los lisados celulares para mejorar la eficacia de la extracción de proteínas.

Características de la ADNasa I Thermo Scientific:

• Degrada y elimina el ADN no deseado de las muestras.
• Escinde tanto el ADN monocatenario como el bicatenario.
• Compatible con los reactivos para lisis celular Thermo Scientific Pierce.
• Reduce la viscosidad de los lisados bacterianos (extractos de proteínas) para facilitar el pipeteo.

La desoxirribonucleasa I (ADNasa I) es un polipéptido único y glicosilado que degrada el ADN monocatenario y bicatenario no deseado. Las enzimas trabajan para dividir el ADN en fragmentos de fosfodinucleótido de 5' y fragmentos pequeños de oligonucleótido. La ADNasa I se añade con frecuencia a los reactivos de lisis celulares para eliminar la viscosidad que genera el contenido del ADN en los lisados de células bacterianas o para eliminar las plantillas de ADN de los ARN producidos por la transcripción in vitro. Este grado de ADNasa es suficiente para el trabajo de proteínas. Utilice la ADNasa sin ARNasa para cualquier aplicación que requiera la digestión de ADN en la que sea fundamental evitar daños al ARN.

Información general sobre el uso de la ADNasa I:

• Se necesitan iones de calcio para la actividad de la ADNasa I. Puede haber trazas de Ca++ en concentraciones lo bastante altas como para activar la ADNasa I; no obstante, el uso de tampones sin EGTA o calcio puede reducir la actividad de la ADNasa I a niveles indetectables.
• Los niveles altos (es decir, 100 mM) de iones monovalentes como Na+ y K+ reducen la actividad de la ADNasa I.
• La ADNasa I se desactiva calentándola a 65 °C durante 10 minutos.
• Unidad Kunitz: 1 unidad Kunitz es la cantidad de enzima necesaria para conseguir un incremento de 0,001 A260 nm/min/ml a 25 °C en 0,1 M de NaOAc, pH 5,0 debido a la degradación de ADN altamente polimerizado.
• Unidades de ensayo de degradación: 1 unidad se define como la cantidad de enzimas necesaria para degradar completamente 1 µg de ADN plasmídico en 10 minutos a 37 °C en 10 mM de Tris·HCl, pH 7,5, 50 mM de MgCl₂, 13 mM de CaCl₂.

Especificaciones:

• Cantidad: 0,5 ml
• Concentración: ≥ 2500 unidades/ml
• Definición de unidad: 1 unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para producir un aumento en la absorbencia sobre 260 nm de 0,001/min/ml a 25 °C de ADN altamente polimerizado
• Apariencia: Líquido transparente e incoloro, sin material insoluble
• Formulación: ADNasa I en 10 mM de Tris-HCl a pH 7,5, 10 mM de CaCl₂, 10 mM de MgCl₂

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