Cartuchos de cromatografía de Ni-NTA HisPur™, 1 ml
Cartuchos de cromatografía de Ni-NTA HisPur™, 1 ml
Thermo Scientific™

Cartuchos de cromatografía de Ni-NTA HisPur™, 1 ml

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Número de catálogoCantidad
900985 cartuchos
900992 x 5 mL
Número de catálogo 90098
Precio (CLP)
168.317
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Cantidad:
5 cartuchos
Pedido a granel o personalizado
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Los cartuchos de cromatografía Thermo Scientific HisPur Ni-NTA contienen una resina IMAC de níquel de alto rendimiento y alta capacidad para las rutinas de purificación por afinidad de proteínas de fusión marcadas con His.

Características de la resina Ni-NTA HisPur:

Alta capacidad: unión de hasta 60 mg de proteínas marcadas con 6xHis por ml de resina
Versátil: purificación de proteínas en condiciones naturales o de desnaturalización
Compatible: se utiliza con reactivos de lisis celular Thermo Scientific y una gran variedad de aditivos de tampón
Rentable: vuelva a utilizar el mismo lote de resina al menos cinco veces
Fácil de usar: tampones preformulados disponibles para formatos de kit
Flexible: disponible en varios formatos incluida resina a granel, columnas de centrifugación, cartuchos de cromatografía y placas de filtro de 96 pocillos

El soporte de níquel-NTA especialmente preparado consta de agarosa granulada derivatizada con la mitad de quelantes del ácido nitrilotriacético (NTA) y cargada con iones de níquel divalentes (Ni2+). La resina de cromatografía de afinidad de metal inmovilizado (IMAC) proporciona una capacidad de unión y un rendimiento excepcionales para la purificación de proteínas recombinantes marcadas con His.

La expresión y purificación de proteínas recombinantes es un factor central para estudiar la regulación, estructura y funciones de las proteínas. La mayoría de proteínas recombinantes se expresan como fusiones con marcajes de afinidad cortos, siendo la polihistidina (6xHis) el marcaje más popular. El método utilizado para purificar las proteínas recombinantes marcadas con His es la cromatografía de afinidad de metal inmovilizado (IMAC), compuesta por resinas quelantes marcadas con iones de níquel o cobalto que se coordinan con las cadenas laterales de la histidina.

La resina de Ni-NTA HisPur purifica altos niveles de proteínas de fusión marcadas con His sobreexpresadas a partir de lisados bacterianos, por ejemplo, los obtenidos con los reactivos de extracción de proteínas bacterianas Thermo Scientific B-PER. La resina rinde bien en los procedimientos de unión por lotes y de columnas de centrifugación a diversas escalas. El rendimiento es igual o superior al que se obtiene con las resinas Ni-NTA populares de otros proveedores. La resina de Ni-NTA HisPur es un soporte de afinidad estable, de alta calidad y resistente. Las pruebas confirman la ausencia de reducciones en el rendimiento después de cinco ciclos de uso repetidos. Estos datos indican que la resina es altamente resistente a la degradación estructural o a los escapes de iones de níquel durante el uso normal.

La resina de Ni-NTA HisPur y la resina de cobalto HisPur son formatos alternativos de IMAC, en los que el primero utiliza níquel y el segundo cobalto, como el ion de quelato de metal responsable de la unión de proteínas marcadas con His. Las resinas de Ni-NTA son la elección de resina IMAC más frecuente para purificaciones de proteínas marcadas con 6xHis debido a sus cuatro sitios de unión con metales del quelato, que permite una unión de proteínas alta y un escape de iones metálicos bajo. El cobalto se une con menos fuerza y, por lo tanto, más discriminadamente, permitiendo un grado de pureza más alto pero, por lo general, con un rendimiento menor en cuanto a la purificación de proteínas con marcaje His.

Formatos disponibles:
Mezclas de resina: agarosa granulada al 6 % entrecruzada; frascos de 10 ml, 100 ml y 500 ml
Columnas de centrifugación: 0,2 ml (microcentrífuga), columnas de 1 ml y 3 ml
Kits de purificación: kits completos en los tres tamaños de columna
Cartuchos de cromatografía: aprenda más y vea los datos de los cartuchos de cromatografía HisPur
Placas de centrifugación de 96 pocillos

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Resina Ni-NTA HisPur™
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Tipo de columnaAfinidad, resina de agarosa
Cantidad5 cartuchos
Fase estacionariaNíquel divalente, quelato metálico
ObjetivoProteína marcada con His
Capacidad (métrico)1 ml
FormularioSuspensión líquida
Línea de productosHisPur
TipoCartucho de cromatografía
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar el producto a una temperatura entre 4 °C y 8 °C. No la congele.

Preguntas frecuentes

Are there other sequences that can bind to nickel more tightly than 6xHis-tagged proteins and how can they be eluted.

Yes, 7xHis-tagged proteins, proteins naturally high in histidine, and other combinations of His and other amino acids will bind. To elute them, you have to increase the concentration of imidazole. Generally these peptides will not contaminate your fraction since they remain on the column. However after multiple uses of the same column, these peptides may reduce the binding capacity of the column.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

Can ProBond or Ni-NTA beads be used for large-scale preparations?

ProBond and Ni-NTA beads can be used in FPLC columns. However, the beads can only withstand low pressure (~43.5 psi max).

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What should the typical protein recovery be when using the Probond Purification System or Ni-NTA Purification system?

Both systems are qualified by purifying 2 mg of myoglobin protein on a column and performing a Bradford assay. Protein recovery must be 75% or higher.

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What is the difference between HisPur Nickel Resin and HisPur Cobalt Resin?

Nickel has a higher affinity for histidines than does cobalt. It binds multiple histidines more tightly than cobalt, and requires more stringent conditions than is necessary for cobalt. The lower affinity of cobalt for multiple histidines typically results in less nonspecific binding of histidine-rich proteins that lack a his-tag compared to nickel resins.

HisPur Ni-NTA resin has a high capacity of up to 60 mg of 6xHis-tagged protein per milliliter. It is a versatile resin that can work under both native and denaturing conditions, and can also be used with a variety of lysis reagents and buffer additives.

HisPur Cobalt resin utilizes proprietary tetradentate chelating resin charged with cobalt. This system recovers highly purified protein with lower imidazole concentrations and has low metal leeching properties.

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Can the rapid equilibrium dialysis (RED) device be used with cells or virus included in the "plasma" side?

We have not tested the units with cells or viral particles. Customers would have to design and optimize their experiments to use the RED device with this type of sample.