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Citas y referencias (22)
Invitrogen™
Maleimida C5 Alexa Fluor™ 594
Alexa Fluor™ 594 es un colorante fluorescente rojo brillante que se puede excitar con líneas de láser de 561 nmMás información
| Número de catálogo | Cantidad |
|---|---|
| A10256 | 1 mg |
Número de catálogo A10256
Precio (CLP)
543.958
Each
Cantidad:
1 mg
Precio (CLP)
543.958
Each
Alexa Fluor™ 594 es un colorante fluorescente rojo brillante que se puede excitar con líneas de láser de 561 nm o 594 nm. El tinte Alexa Fluor™ 594, empleado para la generación estable de señales para la obtención de imágenes en citometría de flujo, es soluble en agua e insensible al pH entre pH 4 y pH 10. Además de las formulaciones de colorante reactivo, ofrecemos el colorante Alexa Fluor™ 594 conjugado con una serie de anticuerpos, péptidos, proteínas, marcadores y sustratos de amplificación optimizados para el etiquetado y la detección celular (más información).
El derivado de la maleimida de Alexa Fluor™ 594 es la herramienta más popular para conjugar el colorante con un grupo tiol en una proteína, oligonucleótido tiofosfato o ligando de bajo peso molecular. Los conjugados Alexa Fluor™ 594 resultantes presentan una fluorescencia más brillante y una mayor fotoestabilidad que los conjugados de otros fluoróforos espectralmente similares.
Información detallada sobre esta maleimida AlexaFluor™
Etiqueta de fluoróforo: Colorante Alexa Fluor™ 594
Grupo reactivo: maleimida
Reactividad: grupos tiol en proteínas y ligandos, oligonucleótidos tiofosforados
Excitación/emisiones del conjugado: 588/612 nm
Coeficiente de extinción: 96.000 cm-1 m-1
Colorantes similares espectrales: Texas Red
Peso molecular: 908,97
Reacción de conjugación habitual
La proteína debe disolverse en una concentración de entre 50 y 100 µM en un tampón adecuado (de 10 a 100 mM de fosfato, Tris o HEPES) con un pH de 7,0 a 7,5. En este intervalo de pH, los grupos tiol de la proteína son lo suficientemente nucleófilos para reaccionar casi exclusivamente con el reactivo en presencia de los más numerosos grupos amino de la proteína, que están protonados y son relativamente no reactivos. Se recomienda reducir los enlaces de disulfuro en este punto mediante un agente de reductor 10 veces en exceso molar, como DTT o TCEP. El exceso de DTT debe eliminarse por diálisis y la posterior modificación de tiol debe efectuarse sin presencia de oxígeno para evitar que los enlaces de disulfuro se vuelvan a formar; estas precauciones no son necesarias si se utiliza TCEP antes de la conjugación de maleimida.
La maleimida Alexa Fluor™ suele disolverse en dimetilsulfóxido (DMSO) anhidro en una concentración de 1 a 10 mm inmediatamente antes de su uso. Las soluciones madre deben protegerse de la luz en la medida de lo posible. Generalmente, esta solución madre se agrega a la solución de proteína gota a gota mientras se agita para producir aproximadamente de 10 a 20 moles de reactivo por mol de proteína, y la reacción puede proseguir a temperatura ambiente durante 2 horas o a 4 °C durante la noche, protegida de la luz. Cualquier reactivo al tiol que no haya reaccionado puede consumirse si se añade un exceso de glutatión, mercaptoetanol tiol de peso molecular bajo soluble.
Purificación del conjugado
Los anticuerpos etiquetados se separan normalmente del colorante Alexa Fluor™ mediante una columna de filtración en gel, como Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 o equivalentes. Para cantidades mucho mayores o menores de proteínas, seleccione un medio de filtración en gel con un corte de peso molecular adecuado o purifique por diálisis. Ofrecemos varios kits de purificación optimizados para diferentes cantidades de conjugado de anticuerpos:
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 0,5-1 mg (A33086)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 20-50 µg (A33087)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 50-100 µg (A33088)
Más información sobre el etiquetado de proteínas y anticuerpos
Ofrecemos una amplia selección de kits de etiquetado de anticuerpos y proteínas Molecular Probes™ que se ajustan a su material de partida y a su configuración experimental. Consulte nuestros kits de etiquetado de anticuerpos o utilice nuestra herramienta de selección química de etiquetado para otras opciones. Para obtener más información acerca de nuestros kits de marcado, lea la sección 1.2 sobrekits para marcado de proteínas y ácidos nucleicos del manual de Molecular Probes™.
Creamos conjugados personalizados
Si no encuentra lo que busca en nuestro catálogo en línea, le prepararemos el conjugado de anticuerpos o proteínas que desee. Nuestro servicio de conjugación personalizada es eficiente y confidencial, y garantizamos la calidad de nuestro trabajo. Contamos con la certificación ISO 9001:2000.
El derivado de la maleimida de Alexa Fluor™ 594 es la herramienta más popular para conjugar el colorante con un grupo tiol en una proteína, oligonucleótido tiofosfato o ligando de bajo peso molecular. Los conjugados Alexa Fluor™ 594 resultantes presentan una fluorescencia más brillante y una mayor fotoestabilidad que los conjugados de otros fluoróforos espectralmente similares.
Información detallada sobre esta maleimida AlexaFluor™
Etiqueta de fluoróforo: Colorante Alexa Fluor™ 594
Grupo reactivo: maleimida
Reactividad: grupos tiol en proteínas y ligandos, oligonucleótidos tiofosforados
Excitación/emisiones del conjugado: 588/612 nm
Coeficiente de extinción: 96.000 cm-1 m-1
Colorantes similares espectrales: Texas Red
Peso molecular: 908,97
Reacción de conjugación habitual
La proteína debe disolverse en una concentración de entre 50 y 100 µM en un tampón adecuado (de 10 a 100 mM de fosfato, Tris o HEPES) con un pH de 7,0 a 7,5. En este intervalo de pH, los grupos tiol de la proteína son lo suficientemente nucleófilos para reaccionar casi exclusivamente con el reactivo en presencia de los más numerosos grupos amino de la proteína, que están protonados y son relativamente no reactivos. Se recomienda reducir los enlaces de disulfuro en este punto mediante un agente de reductor 10 veces en exceso molar, como DTT o TCEP. El exceso de DTT debe eliminarse por diálisis y la posterior modificación de tiol debe efectuarse sin presencia de oxígeno para evitar que los enlaces de disulfuro se vuelvan a formar; estas precauciones no son necesarias si se utiliza TCEP antes de la conjugación de maleimida.
La maleimida Alexa Fluor™ suele disolverse en dimetilsulfóxido (DMSO) anhidro en una concentración de 1 a 10 mm inmediatamente antes de su uso. Las soluciones madre deben protegerse de la luz en la medida de lo posible. Generalmente, esta solución madre se agrega a la solución de proteína gota a gota mientras se agita para producir aproximadamente de 10 a 20 moles de reactivo por mol de proteína, y la reacción puede proseguir a temperatura ambiente durante 2 horas o a 4 °C durante la noche, protegida de la luz. Cualquier reactivo al tiol que no haya reaccionado puede consumirse si se añade un exceso de glutatión, mercaptoetanol tiol de peso molecular bajo soluble.
Purificación del conjugado
Los anticuerpos etiquetados se separan normalmente del colorante Alexa Fluor™ mediante una columna de filtración en gel, como Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 o equivalentes. Para cantidades mucho mayores o menores de proteínas, seleccione un medio de filtración en gel con un corte de peso molecular adecuado o purifique por diálisis. Ofrecemos varios kits de purificación optimizados para diferentes cantidades de conjugado de anticuerpos:
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 0,5-1 mg (A33086)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 20-50 µg (A33087)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 50-100 µg (A33088)
Más información sobre el etiquetado de proteínas y anticuerpos
Ofrecemos una amplia selección de kits de etiquetado de anticuerpos y proteínas Molecular Probes™ que se ajustan a su material de partida y a su configuración experimental. Consulte nuestros kits de etiquetado de anticuerpos o utilice nuestra herramienta de selección química de etiquetado para otras opciones. Para obtener más información acerca de nuestros kits de marcado, lea la sección 1.2 sobrekits para marcado de proteínas y ácidos nucleicos del manual de Molecular Probes™.
Creamos conjugados personalizados
Si no encuentra lo que busca en nuestro catálogo en línea, le prepararemos el conjugado de anticuerpos o proteínas que desee. Nuestro servicio de conjugación personalizada es eficiente y confidencial, y garantizamos la calidad de nuestro trabajo. Contamos con la certificación ISO 9001:2000.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Reactividad químicaTiol
Emisión612 nm
Excitación588 nm
Etiqueta o tinteAlexa Fluor™ 594
Tipo de productoTinte
Cantidad1 mg
Fracción reactivaMaleimida
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Tipo de etiquetaColorantes Alexa Fluor
Línea de productosAlexa Fluor
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar en el congelador (de – 5 a – 30 °C) y proteger de la luz.
Citations & References (22)
Citations & References
Abstract
Exocytotic insertion of calcium channels constrains compensatory endocytosis to sites of exocytosis.
Journal:J Cell Biol
PubMed ID:10684256
'Proteins inserted into the cell surface by exocytosis are thought to be retrieved by compensatory endocytosis, suggesting that retrieval requires granule proteins. In sea urchin eggs, calcium influx through P-type calcium channels is required for retrieval, and the large size of sea urchin secretory granules permits the direct observation of
Coil-globule transition in the denatured state of a small protein.
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:16857738
'Upon transfer from strongly denaturing to native conditions, proteins undergo a collapse that either precedes folding or occurs simultaneously with it. This collapse is similar to the well known coil-globule transition of polymers. Here we employ single-molecule fluorescence methods to fully characterize the equilibrium coil-globule transition in the denatured state
Spatial dynamics of receptor-mediated endocytic trafficking in budding yeast revealed by using fluorescent alpha-factor derivatives.
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:16574772
'Much progress defining the order and timing of endocytic internalization events has come as a result of real-time, live-cell fluorescence microscopy. Although the availability of numerous endocytic mutants makes yeast an especially valuable organism for functional analysis of endocytic dynamics, a serious limitation has been the lack of a fluorescent
Light-induced conformational changes of rhodopsin probed by fluorescent alexa594 immobilized on the cytoplasmic surface.
Journal:Biochemistry
PubMed ID:11106502
'A novel fluorescence method has been developed for detecting the light-induced conformational changes of rhodopsin and for monitoring the interaction between photolyzed rhodopsin and G-protein or arrestin. Rhodopsin in native membranes was selectively modified with fluorescent Alexa594-maleimide at the Cys(316) position, with a large excess of the reagent Cys(140) that
Self-assembling light-harvesting systems from synthetically modified tobacco mosaic virus coat proteins.
Journal:J Am Chem Soc
PubMed ID:17319656
'A new protein-based approach has been developed for the construction of light-harvesting systems through self-assembly. The building blocks were prepared by attaching fluorescent chromophores to cysteine residues introduced on tobacco mosaic virus coat protein monomers. When placed under the appropriate buffer conditions, these conjugates could be assembled into stacks of