Competent Cell Sampler
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Invitrogen™

Competent Cell Sampler

El kit de muestreador de células competentes contiene un par de cuatro cepas diferentes de células de E. coli químicamenteMás información
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Número de catálogoCantidad
A104698 × 50 μl
Número de catálogo A10469
Precio (CLP)
-
Cantidad:
8 × 50 μl
El kit de muestreador de células competentes contiene un par de cuatro cepas diferentes de células de E. coli químicamente competentes en cómodos formatos One Shot. Cada vial de células de un solo uso está listo para usarse, sin pasos de pipeteo adicionales ni ciclos de congelación y descongelación que reduzcan la eficacia de la transformación. Utilice este kit para evaluar qué cepas se adaptan mejor a los diferentes tipos de ADN utilizados en su laboratorio.

Las células E. coli químicamente competentes, resistentes a los fagos T1 One Shot Mach1, tienen un tiempo de duplicación más rápido que las células E. coli tradicionales. Como resultado, las colonias de Mach1 son claramente visibles durante ocho horas desde siembra en placas de ampicilina de la transformación. Puede realizar minipreparaciones después de solo cuatro horas de cultivo a partir de una colonia nocturna.

Las células competentes E. coli Mach1 vienen en formato One Shot (n.º de cat. C862003) y en nuestros formatos MultiShot Stripwell y Flexplate para aplicaciones de producción media y alta (C869601 y C8681201).

Las células E. coli químicamente competentes y resistentes a fagos T1 One Shot OmniMAX2 son perfectas para su uso en todas las aplicaciones de clonación, incluida la tecnología Gateway. Ofrecen la máxima eficacia de transformación en formato One Shot químicamente competente con 5 x 109 transformantes con 1 µg de ADN de control. El acoplamiento de la alta eficacia de transformación con la eliminación de los sistemas de restricción mcrA, mrr, mcrBC y hsdRMS permite la construcción de bibliotecas genómicas más representativas en un formato cómodo y químicamente competente.

Las células OmniMAX 2 se ofrecen en nuestro formato One Shot (C854003) y en nuestro formato MultiShot Flexplate para aplicaciones de rendimiento medio / alto (C8581201).

Las células químicamente competentes OneShot Stbl3 reducen la frecuencia de recombinación homóloga no deseada y son perfectas para clonar ADN inestable como ADN lentival que contiene repeticiones terminales largas (LTRs). La producción de ADN de las células Stbl3 suele ser > 10 veces superior a las cepas de clonado estándar.

Las células Stbl3 químicamente competentes están disponibles en formato One Shot (C737303) y en formatos MultiShot Stripwell y Flexplate (C739601 y C7381201) para aplicaciones de rendimiento medio a alto.

Las células One Shot TOP10 son perfectas para una amplia gama de técnicas de clonación. A menudo se incluyen con muchos de nuestros kits de clonación y expresión como los kits de clonación TOPO y Gateway y complementan nuestras cadenas GeneArt High-Q y fragmentos y bibliotecas de ADN. Las células E. coli competentes One Shot TOP10 vienen con una eficacia de transformación de 1 x 109 ufc/µg de ADN superhelicoidal y resultan ideales para la clonación y la propagación plasmídica de alta eficacia. Permiten la replicación estable de plásmidos de alto número de copias.

Las células TOP10 químicamente competentes están disponibles en formato One Shot (C404003) y en formatos MultiShot Stripwell y Flexplate (C409601 y C4081201) para aplicaciones de rendimiento medio a alto.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Cepa bacteriana o de levaduraMach1, OmniMAX2, TOP10, Stbl3
Concentración1 x 10^9 células/ml
Eficacia> 1 x 10^9
Línea de productosOne Shot
Tipo de productoKit de muestreador de células competentes
Cantidad8 × 50 μl
Condiciones de envíoHielo seco
FormatoTubo
EspecieE. coli
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
El muestreador de células competentes contiene dos transformaciones cada una con cuatro cepas de células químicamente competentes en formato One Shot™. Almacenar a - 80 °C.

Preguntas frecuentes

How do you recommend that I prepare my DNA for successful electroporation of E. coli?

For best results, DNA used in electroporation must have a very low ionic strength and a high resistance. A high-salt DNA sample may be purified by either ethanol precipitation or dialysis.

The following suggested protocols are for ligation reactions of 20ul. The volumes may be adjusted to suit the amount being prepared.

Purifying DNA by Precipitation: Add 5 to 10 ug of tRNA to a 20ul ligation reaction. Adjust the solution to 2.5 M in ammonium acetate using a 7.5 M ammonium acetate stock solution. Mix well. Add two volumes of 100 % ethanol. Centrifuge at 12,000 x g for 15 min at 4C. Remove the supernatant with a micropipet. Wash the pellet with 60ul of 70% ethanol. Centrifuge at 12,000 x g for 15 min at room temperature. Remove the supernatant with a micropipet. Air dry the pellet. Resuspend the DNA in 0.5X TE buffer [5 mM Tris-HCl, 0.5 mM EDTA (pH 7.5)] to a concentration of 10 ng/ul of DNA. Use 1 ul per transformation of 20 ul of cell suspension.

Purifying DNA by Microdialysis: Float a Millipore filter, type VS 0.025 um, on a pool of 0.5X TE buffer (or 10% glycerol) in a small plastic container. Place 20ul of the DNA solution as a drop on top of the filter. Incubate at room temperature for several hours. Withdraw the DNA drop from the filter and place it in a polypropylene microcentrifuge tube. Use 1ul of this DNA for each electrotransformation reaction.

When should DMSO, formamide, glycerol and other cosolvents be used in PCR?

Cosolvents may be used when there is a failure of amplification, either because the template contains stable hairpin-loops or the region of amplification is GC-rich. Keep in mind that all of these cosolvents have the effect of lowering enzyme activity, which will decrease amplification yield. For more information see P Landre et al (1995). The use of co-solvents to enhance amplification by the polymerase chain reaction. In: PCR Strategies, edited by MA Innis, DH Gelfand, JJ Sninsky. Academic Press, San Diego, CA, pp. 3-16.

Additionally, when amplifying very long PCR fragments (greater than 5 kb) the use of cosolvents is often recommended to help compensate for the increased melting temperature of these fragments.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our PCR and cDNA Synthesis Support Center.