Amplex™ Acetylcholine/Acetlycholinesterase Assay Kit
Amplex™ Acetylcholine/Acetlycholinesterase Assay Kit
Invitrogen™

Amplex™ Acetylcholine/Acetlycholinesterase Assay Kit

El kit de ensayo de acetilcolina/acetilcolinesterasa Amplex™ Red proporciona un método ultrasensible para detectar la actividad de la acetilcolinesterasa (AChE)Más información
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Número de catálogoCantidad
A12217500 ensayos
Número de catálogo A12217
Precio (CLP)
524.617
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Cantidad:
500 ensayos
Precio (CLP)
524.617
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El kit de ensayo de acetilcolina/acetilcolinesterasa Amplex™ Red proporciona un método ultrasensible para detectar la actividad de la acetilcolinesterasa (AChE) en un lector de microplacas de fluorescencia o un fluorímetro.

Consulte nuestra línea completa de ensayos de microplacas de fluorescencia.

• Detecta niveles de actividad de AChE de tan solo 0,002 U/ml en una hora
• Detecta niveles de acetilcolina de tan solo 0,3 µM usando un exceso de AChE
• Alcanza intervalos de detección de acetilcolina de 0,3 µM a 100 µM
• Su formato permite realizar varias mediciones en un punto de tiempo
• Diseñado para una mínima interferencia de autofluorescencia

La actividad de la AChE se supervisa indirectamente usando 10-acetil-3,7-dihidroxifenoxacina (reactivo Amplex™ Red), una sonda fluorogénica sensible para el peróxido de hidrógeno. La AChE convierte el sustrato de acetilcolina en colina, que luego se oxida mediante la colina oxidasa a betaína y peróxido de hidrógeno. En presencia de la peroxidasa de rábano, el peróxido de hidrógeno reacciona con el reactivo Amplex™ Red en una proporción estequiométrica 1:1 para crear un producto altamente fluorescente, la resorufina.

Como la resorufina tiene unos valores máximos de absorción y emisión de fluorescencia de aproximadamente 571 nm y 585 nm respectivamente, hay poca interferencia de autofluorescencia en la mayoría de las muestras biológicas. Los experimentos con AChE purificada de anguila eléctrica indican que el kit de ensayo de acetilcolina/acetilcolinesterasa Amplex™ Red puede detectar niveles de AChE de tan solo 0,002 U/ml con un tiempo de reacción de una hora. Al proporcionar un exceso de AChE en el ensayo, el kit también se puede utilizar para detectar niveles de acetilcolina de tan solo 0,3 µM, con un intervalo de detección de acetilcolina de 0,3 µM a 100 µM.

Utilice ensayos Amplex™ Red para una amplia gama de investigaciones
Hay disponible una amplia variedad de ensayos Invitrogen Amplex™ Red para el estudio de la señalización de células y lípidos, la neurobiología, el funcionamiento de procesos inflamatorios e inmunitarios, y el metabolismo. También ofrecemos el reactivo Amplex™ UltraRed (n.º de cat. A36006), un reactivo de segunda generación que proporciona una mayor sensibilidad y fluorescencia más brillante, y el reactivo de parada Amplex™ Red/UltraRed (n.º cat. A33855). El reactivo de parada Amplex™ Red/UltraRed ofrece comodidad y control, ya que permite terminar la reacción de generación de la señal de fluorescencia en un momento determinado por el usuario. Después de añadir el reactivo de parada, la señal de fluorescencia permanece estable durante al menos tres horas. También hay disponibles diseños de ensayos y envases personalizados.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Método de detecciónIntensidad de la fluorescencia
Cantidad500 ensayos
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Propiedades de sustratoSustrato molecular
Tipo de sustratoSustrato de HRP (peroxidasa de rábano picante), sustrato de acetilcolinesterasa
Enzima dianaAcetilcolinesterasa
Para utilizar con (aplicación)Ensayo de acetilcolina/acetlicolinesterasa
Para utilizar con (equipo)Lector de microplacas de fluorescencia
Línea de productosAmplex
Tipo de productoEnsayo de acetilcolina⁄acetlicolinesterasa
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar en el congelador de -5 °C a -30 °C y proteger de la luz.

Preguntas frecuentes

I'm using an Amplex Red kit, the reagent changes color to pink almost immediately in my own Krebs-Ringer buffer but not in HBSS. Why is this?

The components of Krebs-Ringer buffer (salts) should not cause oxidation of the Amplex reagent (which, in the presence of peroxidase and H2O2 oxidizes to resorufin, which is pink in color and fluorescent). Try water alone (the water used to make the Krebs-Ringer buffer). Since Hank's Buffered Saline Solution is typically purchased rather than made in the lab, it likely would not have the same contaminant. Another option is to degas the buffer prior to use to removed dissolved oxygen radicals.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can Amplex Red Assays be performed using cell lysates?

This is not recommended. The presence of endogenous proteases can complicate the assay by degrading the horseradish peroxidase (HRP). Endogenous peroxidases and antioxidants can modify the H2O2 required for the reaction, competing with HRP (and catalase) for the substrate.

The Amplex Red Assays are best performed with either purified enzymes or extracted H2O2 in a defined buffer system, extracellular solutions or body fluids (media, serum, etc.) that do not exhibit high levels of endogenous protease or oxidase activity and do not contain antioxidants.

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Citations & References (8)

Citations & References
Abstract
G-CSF rescues the memory impairment of animal models of Alzheimer's disease.
Authors:Tsai KJ, Tsai YC, Shen CK,
Journal:J Exp Med
PubMed ID:17517969
'Most of the current clinical treatments for Alzheimer''s disease (AD) are largely symptomatic and can have serious side effects. We have tested the feasibility of using the granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF), which is known to mobilize hematopoietic stem cells (HSCs) from the bone marrow into the peripheral blood, as a ... More
The effects of anticholinergic insecticides on human mesenchymal stem cells.
Authors:Hoogduijn MJ, Rakonczay Z, Genever PG
Journal:Toxicol Sci
PubMed ID:16960032
'Mesenchymal stem cells (MSCs) are located primarily in the bone marrow and are characterized by their capacity to differentiate into mesenchymal lineages such as bone, fat, and cartilage in response to appropriate signals. Several signaling mechanisms act to control MSC survival, proliferation, and differentiation, and failure or disruption of these ... More
Enhanced purinergic contractile responses and P2X1 receptor expression in detrusor muscle during cycles of hypoxia-glucopenia and reoxygenation.
Authors:Elliott RA, Tonnu A, Ghaffar N, Taylor AH, Tincello DG, Norman RI,
Journal:
PubMed ID:23975903
'Bladders from patients with detrusor overactivity have an increased atropine-resistant contractile response to nerve stimulation. The bladder has also been shown to be very susceptible to hypoxia-glucopenia and reperfusion injury, leading to the hypothesis that episodes of hypoxia-glucopenia and reoxygenation result in increased atropine-resistant responses to nerve stimulation in the ... More
Role of pancreatic cancer-derived exosomes in salivary biomarker development.
Authors:Lau C, Kim Y, Chia D, Spielmann N, Eibl G, Elashoff D, Wei F, Lin YL, Moro A, Grogan T, Chiang S, Feinstein E, Schafer C, Farrell J, Wong DT,
Journal:
PubMed ID:23880764
'Recent studies have demonstrated that discriminatory salivary biomarkers can be readily detected upon the development of systemic diseases such as pancreatic cancer, breast cancer, lung cancer, and ovarian cancer. However, the utility of salivary biomarkers for the detection of systemic diseases has been undermined due to the absence of the ... More
Butyrate enemas enhance both cholinergic and nitrergic phenotype of myenteric neurons and neuromuscular transmission in newborn rat colon.
Authors:Suply E, de Vries P, Soret R, Cossais F, Neunlist M,
Journal:Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol
PubMed ID:22492692
'Postnatal changes in the enteric nervous system (ENS) are involved in the establishment of colonic motility. In adult rats, butyrate induced neuroplastic changes in the ENS, leading to enhanced colonic motility. Whether butyrate can induce similar changes during the postnatal period remains unknown. Enemas (Na-butyrate) were performed daily in rat ... More