CSM Media for Mav203 Yeast Cells
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Invitrogen™

CSM Media for Mav203 Yeast Cells

El medio CSM para células de levadura Mav203 es un medio diseñado específicamente para fabricar placas de agar que permitenMás información
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Número de catálogoCantidad
A132922 L
Número de catálogo A13292
Precio (CLP)
450.163
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Cantidad:
2 L
Precio (CLP)
450.163
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El medio CSM para células de levadura Mav203 es un medio diseñado específicamente para fabricar placas de agar que permiten el crecimiento de células Saccharomyces cerevisae Mav203. Este producto viene con suficientes reactivos para preparar 2 litros de medio sólido con los siguientes componentes por litro:

• CSM (sin triptófano): 0,74 g
• Base de nitrógeno de levadura: 6,66 g
• Sulfato de amonio: 5 g
• Glucosa: 20 g
• Agar: 20 g

Compatible con todas las aplicaciones MaV203
El medio CSM está optimizado para el sistema de ensamble genético GeneArt™ High Order, lo que incluye la recuperación para transformaciones de vectores una vez que han sido adaptados a la levadura usando el casete de conversión de vectores GeneArt™ High Order. Los medios también se pueden usar para cultivar células de levadura competentes MaV203, tanto de biblioteca como de subclonación (n.º cat. 11281-011 y 11445-012).

Protocolo de preparación de placas
Para cada litro, utilice una bolsa de medio de levadura Agar CSM -Trp sin glucosa y 1 botella de glucosa al 20 %. Disuelva el contenido de la bolsa en 900 ml de agua destilada y esterilice en autoclave durante 20 minutos en ciclo líquido. Deje que la solución se enfríe a 55 °C y luego añada una botella de glucosa al 20 % (100 ml). Mezcle bien y vierta en las placas.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Tipo de producto finalPlacas de agar
Para utilizar con (aplicación)Optimizado para su uso con el sistema de ensamble genético GENEART™ High-Order, A13285
Tipo de mediosMedios CSM
Método de preparaciónAutoclave
Línea de productosGeneArt
Cantidad2 L
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Designaciones de cepasMaV203
FormularioLíquido, polvo
Tipo de productoMedios CSM
EsterilidadNo estéril
Clase de organismo dianaS. cerevisiae
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
El medio CSM para las células de levadura MaV203 tiene suficientes reactivos para preparar 2 litros de medio de agar. El producto contiene dos bolsas de polvo premezclado y dos botellas de 100 ml de glucosa al 20 % esterilizadas por filtro.

Almacenar todos los componentes a temperatura ambiente.

Se garantiza la estabilidad de todos los componentes durante seis meses si se almacenan correctamente.

Preguntas frecuentes

Can I purchase the CSM Media from the GeneArt High-Order Genetic Assembly System separately?

The CSM Media is available as a standalone item (Cat. No. A13292).

With the GeneArt High-Order Genetic Assembly System, I'm getting no positive colonies detected by yeast colony PCR. Can you please offer some troubleshooting tips?

We would recommend trying to re-streak the colony on a fresh plate and repeat colony PCR. Do not break open the yeast cells with the beads supplied with the kit; the beads are for transformation into E. coli. Additionally, use less than 0.5 µL of diluted yeast lysate in a 50 µL PCR reaction.

With the GeneArt High-Order Genetic Assembly System, I see small or no yeast colonies after transformation. Can you please offer some suggestions?

Ensure that yeast transformations are incubated at 30 degrees C for 3 days for proper colony formation.

With the GeneArt High-Order Genetic Assembly System, I did not get any yeast colonies after transformation and the transformation control did not work. Can you please offer some suggestions?

Please review the following suggestions:
– Perform transformation exactly as described in protocol.
– Do not freeze-thaw or vortex MaV203 yeast competent cells.
– Use CSM-Trp agar plates for the transformation.
– For best results, use fresh DMSO from an unopened bottle. You may use DMSO stored at -20 degrees C.

I want to use my own E. coli vector for my assembly. Can I do this? How?

Yes, you should be able to adapt your E. coli vector into a yeast-compatible cloning vector using the GeneArt High-Order Vector Conversion Cassette (Cat. No. A13291) for use with the GeneArt High-Order Genetic Assembly System with the following provisions:
– Start by using the DNA Oligo Designer web tool, and verify that your vector and the GeneArt High-Order Vector Conversion Cassette do not share internal homology to prevent potential re-arrangements when using your adapted vector with the GeneArt High-Order Genetic Assembly System.
– Use a vector with a single- or low-copy-number origin for a final construct of >15 kb, if the final plasmid construct will be transferred into E. coli. Usually, low-copy-number E. coli vectors have significantly higher capacity than high-copy number vectors.
– Avoid chloramphenicol selection markers on the custom vector since this is the marker on the cassette.
– After ligation (1:10 vector: insert ratio recommended), transform competent E. coli cells with the ligation mixture and plate on double selection LB plates (chloramphenicol plus the antibiotic marker on your custom vector backbone).To linearize your yeast-adapted cloning vector for multi-fragment assembly, a double-digestion is required to avoid background caused by residual palindromic end sequences resulting from a single enzyme digestion.

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