Search
Citas y referencias (4)
Invitrogen™
Alexa Fluor™ 700 NHS Ester (Succinimidyl Ester)
Alexa Fluor™ 700 es un tinte cercano a IR brillante y fotoestable que puede excitarse con una lámpara de arcoMás información
Have Questions?
Cambiar vista
| Número de catálogo | Cantidad |
|---|---|
| A20010 | 1 mg |
| A20110 también denominado A-20110 | 5 mg |
Número de catálogo A20010
Precio (CLP)Solicite un presupuesto
-
Cantidad:
1 mg
Alexa Fluor™ 700 es un tinte cercano a IR brillante y fotoestable que puede excitarse con una lámpara de arco de xenón, láseres de diodo rojo lejano o láseres de bombeo de tinte que funcionan en el intervalo de 675–700 nm. El tinte Alexa Fluor™ 700, empleado para la generación estable de señales para la obtención de imágenes en citometría de flujo, es soluble en agua e insensible al pH entre pH 4 y pH 10. La fluorescencia de este tinte Alexa Fluor™ de larga longitud de onda no es visible al ojo humano, pero se detecta fácilmente con la mayoría de los sistemas de adquisición de imágenes. Además de las formulaciones reactivas del tinte, ofrecemos el tinte Alexa Fluor™ 700 conjugado a una variedad de anticuerpos, péptidos, proteínas, trazadores y sustratos de amplificación optimizados para el etiquetado y la detección celular. El éster NHS (o éster succinimidilo) de Alexa Fluor™ 700 es la herramienta más popular para conjugar este tinte a una proteína o anticuerpo. Los ésteres NHS se pueden usar para etiquetar aminas primarias (R-NH2) de proteínas, oligonucleótidos modificados por aminas y otras moléculas que contengan aminas. El conjugado Alexa Fluor™ obtenido mostrará una fluorescencia más brillante y mayor fotoestabilidad que los conjugados de otros fluoróforos espectralmente similares.
Información detallada sobre este éster de NHS AlexaFluor™:
Etiqueta de fluoróforo: Tinte Alexa Fluor™ 700
Grupo reactivo: Éster NHS
Reactividad: Aminas primarias en proteínas y ligandos, oligonucleótidos modificados con aminas
Ex/Em del conjugado: 702/723 nm
Coeficiente de extinción: 205 000 cm-1M-1
Peso molecular: ∼1400
Reacción de conjugación típica
Puede conjugar reactivos de aminas con prácticamente cualquier proteína o péptido (el protocolo proporcionado está optimizado para anticuerpos IgG). Puede ampliar la reacción para cualquier cantidad de proteína, pero la concentración de la proteína debe ser al menos de 2 mg/ml para obtener unos resultados óptimos. Recomendamos probar tres grados de etiquetado distintos y emplear tres proporciones molares diferentes del reactivo en la proteína.
El éster NHS Alexa Fluor™ suele disolverse en dimetilformamida (DMF) anhidra o dimetilsulfóxido (DMSO) (D12345) de gran calidad, y la reacción se lleva a cabo en un tampón de bicarbonato sódico de 0,1–0,2 M, pH 8,3, a temperatura ambiente durante una hora. Dado que la pKa de la amina terminal es inferior a la del grupo amino épsilon de lisina, puede realizar un etiquetado más selectivo de la terminal amina mediante un tampón más cercano al pH neutro.
Purificación del conjugado
Los anticuerpos etiquetados se separan normalmente del tinte Alexa Fluor™ mediante una columna de filtración en gel, como Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 o equivalentes. Para cantidades mucho mayores o menores de proteínas, seleccione un medio de filtración en gel con un corte de peso molecular adecuado o purifique por diálisis. Ofrecemos varios kits de purificación optimizados para diferentes cantidades de conjugado de anticuerpos:
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 0,5-1 mg (A33086)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 20-50 μg (A33087)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 50-100 μg (A33088)
Más información sobre el etiquetado de proteínas y anticuerpos
Ofrecemos una amplia selección de kits de etiquetado de anticuerpos y proteínas Molecular Probes™ que se ajustan a su material de partida y a su configuración experimental. Consulte nuestros kits de etiquetado de anticuerpos o utilice nuestra herramienta de selección química de etiquetado para otras opciones. Para obtener más información acerca de nuestros kits de marcado, lea la sección 1.2 sobrekits para marcado de proteínas y ácidos nucleicos del manual de Molecular Probes™.
Creamos conjugados personalizados
Si no encuentra lo que busca en nuestro catálogo en línea, le prepararemos el conjugado de anticuerpos o proteínas que desee. Nuestro servicio de conjugación personalizada es eficiente y confidencial, y garantizamos la calidad de nuestro trabajo. Contamos con la certificación ISO 9001:2000.
Información detallada sobre este éster de NHS AlexaFluor™:
Etiqueta de fluoróforo: Tinte Alexa Fluor™ 700
Grupo reactivo: Éster NHS
Reactividad: Aminas primarias en proteínas y ligandos, oligonucleótidos modificados con aminas
Ex/Em del conjugado: 702/723 nm
Coeficiente de extinción: 205 000 cm-1M-1
Peso molecular: ∼1400
Reacción de conjugación típica
Puede conjugar reactivos de aminas con prácticamente cualquier proteína o péptido (el protocolo proporcionado está optimizado para anticuerpos IgG). Puede ampliar la reacción para cualquier cantidad de proteína, pero la concentración de la proteína debe ser al menos de 2 mg/ml para obtener unos resultados óptimos. Recomendamos probar tres grados de etiquetado distintos y emplear tres proporciones molares diferentes del reactivo en la proteína.
El éster NHS Alexa Fluor™ suele disolverse en dimetilformamida (DMF) anhidra o dimetilsulfóxido (DMSO) (D12345) de gran calidad, y la reacción se lleva a cabo en un tampón de bicarbonato sódico de 0,1–0,2 M, pH 8,3, a temperatura ambiente durante una hora. Dado que la pKa de la amina terminal es inferior a la del grupo amino épsilon de lisina, puede realizar un etiquetado más selectivo de la terminal amina mediante un tampón más cercano al pH neutro.
Purificación del conjugado
Los anticuerpos etiquetados se separan normalmente del tinte Alexa Fluor™ mediante una columna de filtración en gel, como Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 o equivalentes. Para cantidades mucho mayores o menores de proteínas, seleccione un medio de filtración en gel con un corte de peso molecular adecuado o purifique por diálisis. Ofrecemos varios kits de purificación optimizados para diferentes cantidades de conjugado de anticuerpos:
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 0,5-1 mg (A33086)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 20-50 μg (A33087)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 50-100 μg (A33088)
Más información sobre el etiquetado de proteínas y anticuerpos
Ofrecemos una amplia selección de kits de etiquetado de anticuerpos y proteínas Molecular Probes™ que se ajustan a su material de partida y a su configuración experimental. Consulte nuestros kits de etiquetado de anticuerpos o utilice nuestra herramienta de selección química de etiquetado para otras opciones. Para obtener más información acerca de nuestros kits de marcado, lea la sección 1.2 sobrekits para marcado de proteínas y ácidos nucleicos del manual de Molecular Probes™.
Creamos conjugados personalizados
Si no encuentra lo que busca en nuestro catálogo en línea, le prepararemos el conjugado de anticuerpos o proteínas que desee. Nuestro servicio de conjugación personalizada es eficiente y confidencial, y garantizamos la calidad de nuestro trabajo. Contamos con la certificación ISO 9001:2000.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Reactividad químicaAmina
Emisión723 nm
Excitación702 nm
Etiqueta o tinteAlexa Fluor™ 700
Tipo de productoTinte
Cantidad1 mg
Fracción reactivaEster activo, succinimidilo éster
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Tipo de etiquetaColorantes Alexa Fluor
Línea de productosAlexa Fluor
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar en el congelador (de – 5 a – 30 °C) y proteger de la luz.
Preguntas frecuentes
I am labeling a protein with Alexa Fluor 488 SDP ester. The manual recommends using a sodium bicarbonate buffer at pH 8.3. Can I use a different buffer instead?
I am not going to use all of my Alexa Fluor succinimidyl ester reactive dye. Can I just make it up in DMSO and store aliquots at -20 degrees C?
Citations & References (4)
Citations & References
Abstract
Tyramide signal amplification for analysis of kinase activity by intracellular flow cytometry.
Journal:Cytometry A
PubMed ID:20824632
'Intracellular flow cytometry permits quantitation of diverse molecular targets at the single-cell level. However, limitations in detection sensitivity inherently restrict the method, sometimes resulting in the inability to measure proteins of very low abundance or to differentiate cells expressing subtly different protein concentrations. To improve these measurements, an enzymatic amplification
Quantitative comparison of long-wavelength Alexa Fluor dyes to Cy dyes: fluorescence of the dyes and their bioconjugates.
Journal:J Histochem Cytochem
PubMed ID:14623938
'Amine-reactive N-hydroxysuccinimidyl esters of Alexa Fluor fluorescent dyes with principal absorption maxima at about 555 nm, 633 nm, 647 nm, 660 nm, 680 nm, 700 nm, and 750 nm were conjugated to antibodies and other selected proteins. These conjugates were compared with spectrally similar protein conjugates of the Cy3, Cy5,
Fluorescent cell barcoding in flow cytometry allows high-throughput drug screening and signaling profiling.
Journal:Nat Methods
PubMed ID:16628206
'Flow cytometry allows high-content, multiparameter analysis of single cells, making it a promising tool for drug discovery and profiling of intracellular signaling. To add high-throughput capacity to flow cytometry, we developed a cell-based multiplexing technique called fluorescent cell barcoding (FCB). In FCB, each sample is labeled with a different signature,
Programmable in situ amplification for multiplexed imaging of mRNA expression.
Journal:Nat Biotechnol
PubMed ID:21037591
In situ hybridization methods enable the mapping of mRNA expression within intact biological samples. With current approaches, it is challenging to simultaneously map multiple target mRNAs within whole-mount vertebrate embryos, representing a significant limitation in attempting to study interacting regulatory elements in systems most relevant to human development and disease.