La mezcla maestra de amplificación de la biblioteca Invitrogen Collibri es una solución lista para usar diseñada para la amplificación de bibliotecas de secuenciación de última generación (NGS). La mezcla maestra incluye ADN polimerasa Platinum SuperFi en combinación con un tampón de reacción patentado que contiene todos los componentes necesarios para una amplificación de la biblioteca eficaz con un sesgo mínimo y una precisión máxima.

Entre las características se incluyen:
• Alta fidelidad: tasas de error mínimas, similares a los métodos sin PCR
• Alta eficacia: producciones altas a partir de cantidades de entrada diminutas
• Sesgo mínimo: amplificación uniforme independientemente del contenido de GC

Esta mezcla maestra de amplificación de biblioteca Collibri se suministra con una mezcla de primer 10X que se dirige a las regiones P5 y P7 de los adaptadores de Illumina. La mezcla maestra se complementa con un colorante azul inerte, mientras que la mezcla de cebador contiene un colorante amarillo. La mezcla de ambos componentes en una reacción de PCR hace que la solución final de PCR se vuelva verde. Esto proporciona una ayuda visual al pipetear y ayuda a disminuir riesgo de errores de pipeteo durante la configuración de la reacción.

La ADN polimerasa Platinum SuperFi tiene actividades de 5’ a 3’ polimerasa y de 3’ a 5’ exonucleasas (corrección), pero carece de actividad de 5’ a 3’ exonucleasas. La actividad de corrección excepcionalmente fuerte garantiza la amplificación de las bibliotecas de NGS con una precisión de secuencia suprema, produciendo índices de error de NGS similares a los métodos sin PCR.

El tampón de reacción patentado contiene todos los componentes y aditivos de PCR necesarios para permitir una amplificación de biblioteca eficaz y uniforme independientemente del contenido de GC, lo que ayuda a mejorar la cobertura en secuencias ricas en GC y AT y en otras regiones complejas. La alta eficacia de amplificación permite el uso de menos ciclos para lograr la producción deseada.

La tecnología de inicio en caliente de Platinum inhibe la actividad de la ADN polimerasa a temperatura ambiente, lo que permite la configuración de la reacción a temperatura ambiente y el almacenamiento de reacciones de PCR preensambladas hasta 24 horas antes de la PCR.