Reactivo de extracción y estabilización de GPCR Pierce™

El reactivo de extracción y estabilización de GPCR Thermo Scientific permite una extracción y estabilización eficaces de receptores de proteínas G acopladas (GPCR) y de otras proteínas asociadas a las membranas de células o tejidos de mamíferos cultivados, a la vez que conserva la integridad del receptor a largo plazo.

Las características del reactivo de extracción y estabilización de GPCR incluyen:
• Fácil de utilizar: formulación todo en uno para extraer y estabilizar GPCR en una hora
• Conservación de GPCR: estabiliza el receptor en una micela de detergente para garantizar la función del receptor
• Optimizado: la formulación y el procedimiento proporcionan una extracción suave pero eficiente de GPCR de la membrana plasmática
• Compatible: el lisado es directamente compatible con aplicaciones posteriores, incluyendo la inmunotransferencia (Western blotting), la inmunoprecipitación y ensayos de unión de ligando receptores

El reactivo de extracción y estabilización de GPCR es fácil de usar. Primero, la muestra se recoge, se lava y se sedimenta. A continuación, se extrae el receptor utilizando el reactivo, seguido del proceso de centrifugación. El lisado celular completo resultante contiene receptores solubilizados y estabilizados. El reactivo se ha probado para su uso con GPCR endógenos y sobreexpresados, y la función del receptor se ha verificado mediante ensayos de unión del ligando del receptor.

Los GPCR son una gran familia de receptores con siete dominios transmembrana que desempeñan un papel clave en la transmisión de señales a través de la membrana celular. Son dianas de fármacos eficaces contra trastornos genéticos y del sistema inmunitario y sirven como posibles biomarcadores y dianas terapéuticas para el tratamiento del cáncer. Uno de los principales desafíos en la investigación de GPCR es la capacidad de extraer eficazmente el receptor de la membrana sin comprometer la integridad estructural y funcional de la proteína. El reactivo de extracción y estabilización GPCR encapsula el receptor en una micela de detergente optimizada para garantizar el funcionamiento del receptor hasta durante una semana cuando se almacena a 4 °C y hasta un mes cuando se almacena a - 20 °C después de la extracción, lo que proporciona más flexibilidad para el análisis del receptor.

Referencias
1. Nieto Gutiérrez A, McDonald PH. GPCR: Nuevas dianas de fármacos contra el cáncer. Cell Signal 2018 Jan;41:65-74.
2. Zhang S, Togo S, Minakata K, Gu T, Ohashi R, Tajima K, Murakami A, Iwakami S, Zhang J, Xie C, Takahashi K. Distintas funciones de los receptores colinérgicos en carcinomas pulmonares microcíticos. Anticancer Res. 2010 Jan;30(1):97-106.