GLOBINclear™-Human Kit, for globin mRNA depletion
GLOBINclear™-Human Kit, for globin mRNA depletion
Invitrogen™

GLOBINclear™-Human Kit, for globin mRNA depletion

El kit GLOBINclear-Human Kit es un tratamiento rápido y completo para ARN derivado de sangre completa humana que utiliza unaMás información
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Número de catálogoCantidad
AM198020 preparaciones
Número de catálogo AM1980
Precio (CLP)
765.162
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Cantidad:
20 preparaciones
Precio (CLP)
765.162
Each
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El kit GLOBINclear-Human Kit es un tratamiento rápido y completo para ARN derivado de sangre completa humana que utiliza una novedosa tecnología no enzimática para reducir rápidamente > 95 % del ARNm de globina alfa y beta de las preparaciones de ARN total.

Entre las ventajas del kit GLOBINclear-Human se incluyen:
• Mejora la calidad y la precisión de los perfiles de expresión génica mediante la eliminación de > 95 % del ARNm de globina no deseado del ARN total de sangre completa para revelar datos biológicamente relevantes
• Evita los tratamientos de ARNasa H duros que pueden degradar el ARNm y alterar los perfiles de expresión
• Produce una plantilla superior para secuenciación de próxima generación, reacciones de amplificación de ARN, síntesis de ADNc, análisis de micromatrices y RT-PCR cuantitativa de rutina mediante el uso de una tecnología no enzimática

La eliminación del ARNm de globina es un paso preparatorio fundamental
La elaboración de perfiles de expresión del transcriptoma de muestras de sangre completa se utiliza ampliamente para estudiar las respuestas fisiológicas, patogénicas y terapéuticas del transcriptoma. Sin embargo, hasta el 70 % del ARNm (en masa) de las muestras de ARN total de sangre completa está compuesto por transcripciones de globina no deseadas que afectan a la calidad y la precisión de los perfiles de expresión génica en las tecnologías de secuenciación y micromatrices de ADN. Por tanto, la eliminación del ARNm de globina es un paso preparatorio fundamental para obtener datos precisos y biológicamente relevantes durante el análisis del transcriptoma.

La ventaja de GLOBINclear
El kit GLOBINclear utiliza una novedosa tecnología de hibridación que aprovecha la fuerza de unión de la biotina/estreptavidina, la especificidad de la hibridación del ácido nucleico y la comodidad de las separaciones magnéticas. En primer lugar, el ARNm de globina se elimina del ARN de sangre completa mediante una novedosa tecnología de captura de hibridación; a continuación, el ARN restante se purifica con un rápido procedimiento de limpieza basado en gránulos magnéticos.

Como resultado, el ARN procesado de GLOBINclear proporciona resultados de perfiles de expresión más sensibles que el ARN de sangre completa sin procesar, ya que el procedimiento de eliminación remedia los problemas asociados con el abundante ARNm de globina que se encuentra en las muestras de ARN de sangre completa.

Además, otras tecnologías de eliminación del ARNm de globina basados en tratamientos enzimáticos duros con RNasa H pueden comprometer el perfil de expresión al degradar otros ARNm a parte del ARNm de globina. Dado que el kit GLOBINclear utiliza una tecnología no enzimática, el ARN resultante es una plantilla superior para secuenciación de próxima generación, reacciones de amplificación de ARN, síntesis de ADNc, análisis de micromatrices y RT-PCR cuantitativa de rutina.

Producto accesorio
El kit requiere el uso de un soporte magnético. Se recomienda el soporte magnético DynaMag-2 (N.º de cat. 12321D).
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Tipo de producto finalARN total (ARNm de globina agotado)
Para utilizar con (aplicación)Análisis de micromatrices, PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR), PCR de transcriptasa inversa (RT-PCR), Northern Blot, construcción de bibliotecas de ADNc
Compatibilidad de alto rendimientoCompatible con alto rendimiento
Línea de productosAmbion, GLOBINclear
Tipo de productoKit de eliminación de ARNm
Cantidad20 preparaciones
Tipo de muestraARN total (sangre completa)
FormatoMicrotubo
EspecieHumano
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
• 20 µl de mezcla de captura de oligo (-20 °C)
• 600 µl de gránulos magnéticos de estreptavidina(4 °C: no congelar)
• 1,5 ml tampón de hibridación 2X (temperatura ambiente)
• 1,5 ml de tampón de gránulos de estreptavidina (temperatura ambiente)
• 1,75 agua sin nucleasas (-20 °C, 4 °C o temperatura ambiente)
• 200 µl de gránulos de unión de ARN (4 °C: no congelar)
• 5 ml de concentrado de solución de lavado de ARN (4 °C o temperatura ambiente)
• 1 ml de tampón de elución (4 °C o temperatura ambiente)
• 80 µl de tampón de gránulos de ARN (temperatura ambiente)
• 4 ml de tampón de unión de ARN concentrado (temperatura ambiente)
• 100 tubos antiadherente de 1,5 ml (temperatura ambiente)

Todos los componentes se envían con hielo húmedo, excepto la mezcla de captura de oligo (hielo seco).

Preguntas frecuentes

I used the GLOBINclear Kit to deplete globin mRNA from my total RNA sample, but the depletion was not very efficient. What should I do?

To maximize removal of globin mRNA, follow the procedure exactly. Also pay attention to the most crucial parts of the procedure listed below:

-The GLOBINclear Kit procedure is optimized for depletion of globin mRNA from 10 µg or less total RNA from human, mouse, or rat whole blood. Using more than 10 µg RNA in the procedure will compromise removal of globin mRNA.
-Be sure to follow the temperature and time recommendations for the hybridizations in steps II.D.4 on page 9 and II.E.2 on page 10 of the manual (https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/fm_1980.pdf) for optimal depletion of globin mRNA.

Does the GLOBINclear Kit deplete ribosomal RNA (rRNA) in addition to globin mRNA?

The GLOBINclear Kit does not contain capture probes for ribosomal RNA (rRNA) sequences; however, after globin mRNA depletion with the kit, the percentage of ribosomal reads for the kit is only 1% of total reads (https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33308163/). This low percentage is irrelevant for most downstream applications.