La ADNasa TURBO™ escinde ADN bicatenario de forma no específica para dejar 5' oligodesoxinucleótidos fosforilados. Tiene mayor afinidad para la unión de ADN y permanece activa en presencia de sal..

Nota: Este producto es solo la enzima. Si además de la enzima desea los reactivos para desactivarla y eliminar los cationes divalentes tras la digestión, consulte el kit TURBO ADN-free™.

Las características de la ADNasa TURBO™ incluyen:

• Hasta 50 veces más actividad y una eficacia catalítica superior en un 350 %
• Degrada eficientemente el ADN en soluciones que contienen hasta 0,25 M de sal
• Digiere eficazmente ADN en oligonucleótidos
• Ampliamente superior al aclarar plantillas de ADN en reacciones de transcripción in vitro
• Libre de ARNasa y recombinante en origen

Uso de la ADNasa TURBO™
La ADNasa I se emplea habitualmente para limpiar la contaminación por ADN de muestras de ARN antes de la RT-PCR. La ADNasa I tiene una baja afinidad con el ADN y escinde el ADN de baja concentración de manera muy ineficiente. Además, la ADNasa I es muy sensible a la sal; tan solo 20 mM de NaCl pueden reducir la actividad de la enzima en un 30 %. Por último, la ADNasa I se purifica a partir de páncreas bovino, una de las fuentes naturales más ricas en ARNasa A. El riesgo de contaminación de la actividad de ARNasa en preparaciones de ADNasa I requiere que la enzima se purifique de forma exhaustiva. A pesar de estas limitaciones, la ADNasa I que los investigadores usan actualmente es la misma enzima que caracterizó Kunitz por primera vez hace más de medio siglo..

Una ADNasa diferente con propiedades superiores a la ADNasa I natural
La ADNasa TURBO™ se desarrolló con una estrategia de diseño de proteínas que introdujo cambios de aminoácidos en la cavidad de unión de ADN de la ADNasa I natural. Estos cambios aumentan notablemente la afinidad de la proteína por el ADN. El resultado es una enzima versátil que tiene 6 veces menos K_m para el ADN, y la capacidad para mantener al menos el 50 % de la actividad máxima en soluciones con aproximadamente 200 mM de sal monovalente, incluso cuando la concentración de ADN se encuentra en el rango nanomolar (nM). Cuando las reacciones de transcripción in vitro se tratan con ADNasa I o ADNasa TURBO™, la ADNasa TURBO™ elimina la plantilla de ADN plasmídico de entrada 63 veces más que la enzima natural. La capacidad de la ADNasa TURBO™ de unirse a concentraciones muy bajas de ADN hace que la enzima resulte especialmente efectiva para eliminar trazas de contaminación por ADN. Esto es importante para eliminar por completo el ADN de una muestra, ya que el sustrato de ADN divisible se reduce a medida que se produce la reacción de la ADNasa. Por tanto, la ADNasa TURBO™ presenta una ventaja funcional sobre la ADNasa natural gracias a su superior afinidad para ADN. Esto resulta especialmente útil en aplicaciones de RT-PCR, donde incluso unas pocas copias de ADN pueden generar un falso positivo en los resultados de la PCR.