Mezcla de enzimas RNAse Cocktail™

Ambion™ RNase Cocktail™ es una mezcla de dos ribonucleasas altamente purificadas, ARNasa A (500 U⁄ml) y ARNasa T1 (20.000 U⁄ml), y no contiene actividades de ADNasa ni de nicking. Utilice el RNase Cocktail para todas las situaciones en las que sea deseable degradar el ARN, es decir, en minipreparaciones de plásmidos y en ensayos de protección de ribonucleasa. El RNase Cocktail se suministra en glicerol al 50 % para mayor comodidad. La digestión de ARN con solamente ARNasa A deja fragmentos de ARN que son lo suficientemente grandes para ser visibles en geles de agarosa y precipitarse en etanol. La ARNasa A se corta después de los residuos C y U, mientras que la ARNasa T1 se corta tras los residuos G. Por consiguiente, la mezcla de ambas enzimas se traduce en una reducción del tamaño de los fragmentos de ARN en comparación con la utilización de solamente una de ellas.

Control de calidad
La mezcla de enzimas RNase Cocktail se ha sometido a rigurosas pruebas de contaminación por actividad de endonucleasa inespecífica, exonucleasa y proteasa. La funcionalidad se determina en un ensayo de protección de ribonucleasa.

Definiciones de unidad:
ARNasa A: Una unidad de ARNasa A es la cantidad necesaria para producir un aumento en la absorción a 286 nm de 0,0146 unidades de absorbancia por minuto en un volumen de 1 ml. Condiciones del ensayo de la unidad: 100 mM de tris-acetato (pH 6,5), 1 mM de EDTA y 1 mM de 2', 3'-CMP cíclico.

ARNasa T1: 100 unidades de ARNasa T1 es la cantidad de enzimas que produce un aumento de la absorción a 260 nm de 0,01428 unidades de absorbancia por minuto a temperatura ambiente con 60 µg⁄ml de ARN total de levadura como sustrato.

Ahora también ofrecemos ribonucleasas A, V1 y T1 Ambion™ para ARN para usar en estudios de estructura⁄función del ARN. Si desea más información, consulte: ARNasa A AM2274 (1 µg⁄ml), ARNasa V1 AM2275 (0,1 U⁄µl), ARNasa T1 AM2283 (1 U⁄µl).