ARNip de control negativo n.° 1 Silencer
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ARNip de control negativo n.° 1 Silencer

El ARN de interferencia pequeño (ARNip) de control negativo n.º 1 Ambion™ Silencer™ no tiene ninguna similitud de secuencia significativaMás información
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Número de catálogoCantidad
AM463540 nmol
AM46115 nmol
AM46365 x 40 nmol
Número de catálogo AM4635
Precio (CLP)
584.159
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Cantidad:
40 nmol
Precio (CLP)
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El ARN de interferencia pequeño (ARNip) de control negativo n.º 1 Ambion™ Silencer™ no tiene ninguna similitud de secuencia significativa con secuencias genéticas de ratón, de rata o humanas. El control también se ha probado en cribajes basados en células y ha demostrado que no tiene ningún efecto significativo sobre la proliferación, viabilidad o morfología celulares. Se suministra en 5 tubos que contienen cada uno 40 nmol.

• No dirigido con similitud de secuencia limitada con genes conocidos
• Validado para su uso en células humanas, de ratón y de rata
• Funcionalmente demostrado que tiene efectos mínimos en la proliferación y viabilidad celulares
• Purificado por HPLC, bicatenario y listo para su uso

Los ARNip de control negativo son esenciales para determinar la eficacia de la transfección y para controlar los efectos del suministro de ARNip. En aplicaciones de cribaje de ARNip, los ARNip de control negativo son también esenciales para establecer el umbral de “éxito” que determina si se considera que un ARNip tiene un efecto positivo, negativo o neutro en un ensayo concreto.

Producto acompañante: Panel de control de detección de ARNip Silencer™ (SKU n.° AM4640)
El panel de control de detección de ARNip Silencer™ incluye siete ARNip de control negativo y está pensado para aquellos investigadores que realizan detecciones de ARNip con cientos o miles de ARNip por experimento. Se debe elegir con cuidado el ARNip de control negativo, ya que puede tener efectos no deseados en un ensayo concreto. El panel de control de cribaje de ARNip Silencer™ simplifica este proceso. Como beneficio añadido, se incluye en el panel un ARNip de control positivo para KIF11 (Eg5) de humano, ratón y rata. La reducción de KIF11, que codifica una proteína motora de la familia de las quinesinas, produce la inmovilización mitótica. Los ARNip de control Silencer™ son de 21-mer sin modificar; se han diseñado para su uso con los ARNip Silencer™, los ARNip BLOCK-iT™ y otros ARNip de 21-mer sin modificar. Si utiliza otros productos de ARNip, como ARNip Ambion™ Silencer™ Select o ARNip STEALTH RNAi™, le recomendamos que utilice ARNip de control diseñados para su uso con esos ARNip para obtener unos resultados de experimentos más fiables.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Para utilizar con (aplicación)Transfección, ARNi
Etiqueta o tinteno conjugado
Línea de productosSilencer, Ambion
Tipo de productoARNip
PurezaHPLC
Cantidad40 nmol
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Tipo de controlControl negativo
RNAi TypeARNip
EspecieHumano, ratón, rata
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
El ARNip se suministra en seco en un solo tubo, junto con agua sin nucleasas para resuspensión, y debe almacenarse a -20°C.

Preguntas frecuentes

What are the benefits of using a vector to deliver RNAi?

Vector technologies allow you to:

Achieve transient or stable target knockdown
Perform RNAi in any cell type, even hard-to-transfect, primary, and non-dividing cells
Regulate gene inhibition with inducible siRNA expression
Select for a pure population of cells stably expressing an siRNA sequence
Control gene expression in vivo with tissue-specific promoters

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Why are my cells dying after transfection?

We would suggest running a transfection reagent control only to determine if your cells are sensitive to the transfection reagent. Additionally, you can try using different cell densities and siRNA concentrations to diminish any toxic effects from the transfection itself.

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I transfected my siRNA and the mRNA levels are down, but the protein is not. Why is that?

In some cases, knockdown of a protein can be affected by other variables such as protein turnover rate, even though the RNA is knocked down. Additionally, a longer time course may be needed to see an effect on protein compared to mRNA.

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I am not getting my target knockdown. What could be the cause of this?

Please see the following possibilities and suggestions:

- How many siRNA did you test? Is there any knockdown? If there is no knockdown (<10%) in any of the siRNA, then the assay is likely the problem. Try using a different qRT-PCR assay to assess knockdown.
- What was the positioning of the qRT-PCR assay target site relative to the cut site for the siRNA? If greater than 3,000 bases away, the problem could be alternative splice transcripts.
- What are the Cts for the experiment? They should be below 35 in a 40-cycle qRT-PCR experiment.
- Did you confirm the siRNA got into the cell? We recommend using a validated positive control siRNA to check the transfection efficiency.

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I am not getting any knockdown with my siRNA. What do you suggest I try?

Please see the following possibilities and suggestions:

- Were the mRNA levels checked? The most reliable method is real-time PCR. In some cases, knockdown of a protein can be affected by other variables, such as protein turnover rate, even though the RNA is knocked down.
- How is the RNA being isolated? Has the quality of the isolated RNA been checked? Ensure that the RNA has not been degraded.
- Was a positive control used? This can help to determine whether the reagents are working and whether the siRNA was delivered correctly to the cell. Run your experiment in parallel with the positive control siRNA.
- Was a transfection control used? What is the percentage of transfected cells?
- Was a time course used? Generally, gene silencing can be assessed as early as 24 hours posttransfection. However, the duration and level of knockdown are dependent on cell type and concentration of siRNA.
- Was optimization of transfection conditions performed? You can try using different cell densities and siRNA concentrations.
- Which concentration of siRNA did you use? We recommend testing multiple concentrations between 5 nM and 100 nM.

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