NativePAGE™ Bis-Tris Mini Protein Gels, 4 to 16%, 1.0 mm
NativePAGE™ Bis-Tris Mini Protein Gels, 4 to 16%, 1.0 mm
Invitrogen™

NativePAGE™ Bis-Tris Mini Protein Gels, 4 to 16%, 1.0 mm

El sistema de gel Invitrogen NativePAGE Bis-Tris es un sistema de minigel de poliacrilamida prefundida que proporciona un análisis sensible y de alta resolución de proteínas nativas y complejos proteicos para estimaciones de masa molecular y una evaluación de la pureza.
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El sistema de gel Invitrogen NativePAGE Bis-Tris es un sistema de minigel de poliacrilamida prefundida que proporciona un análisis sensible y de alta resolución de proteínas nativas y complejos proteicos para estimaciones de masa molecular y una evaluación de la pureza. Se basa en la técnica de electroforesis en gel de poliacrilamida nativa azul (BN PAGE) desarrollada por Schägger y von Jagow, que supera las limitaciones de la electroforesis nativa tradicional al proporcionar un pH de funcionamiento casi neutro y compatibilidad con detergentes.

Las características del sistema de gel NativePAGE Bis-Tris incluyen:
• Amplio peso molecular rango de resolución a partir de 15-10 000 kDa
• Separación de pH neutro, lo que preserva mejor el estado nativo de los complejos proteicos
• Resolución de todas las proteínas en el gel independientemente de su punto isoeléctrico (pI)
• Capacidad para analizar complejos membrana-proteína en sus conformaciones nativas
• Capacidad para obtener una mejor resolución que con la electroforesis tradicional nativa de Tris-glicina

Cómo funcionan los geles NativePAGE Bis-Tris
En SDS-PAGE, SDS funciona como una molécula de cambio de carga que desnaturaliza las proteínas al conferirles una carga neta negativa y permite a las proteínas migrar hacia el ánodo. BN PAGE utiliza Coomassie G-250 como molécula de cambio de carga, que se une a las proteínas y les confiere una carga neta negativa, al mismo tiempo que mantiene las proteínas en su estado nativo no desnaturalizado. El pH casi neutro del sistema de gel NativePAGE Bis-Tris proporciona la máxima estabilidad de las proteínas y de la matriz de gel, lo que permite obtener un método altamente sensible para el análisis de complejos de proteínas de membrana nativas y ofrecer una resolución de banda superior a los sistemas tradicionales de gel de Tris-glicina.

Para la transferencia de proteínas a una membrana, le recomendamos utilizar los tampones de transferencia NuPAGE para la transferencia húmeda tradicional y de membranas de PVDF. El tampón de transferencia NuPAGE mantiene el entorno de pH neutro establecido durante la electroforesis. Las membranas de nitrocelulosa no son compatibles para la transferencia ya que la membrana unirá el colorante Coomassie G-250 muy firmemente. También se puede realizar una transferencia semiseca rápida con Invitrogen Power Blotter (PB0013) o una transferencia rápida en seco con el dispositivo de transferencia de gel iBlot 2 (IB21001) utilizando las membranas de PVDF.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Especificaciones
Gel Thickness1,0 mm
Longitud (métrico)8 cm
Modo de separaciónPeso molecular
Línea de productosNativePAGE
Cantidad10 geles/caja
Aplicaciones recomendadasNativo
Volumen de carga de muestrasHasta 25 µl
Duración de almacenamiento8 meses
Condiciones de envíoHielo húmedo
Requisitos de almacenamientoAlmacenar entre 2 °C y 8 °C. No la congele.
Anchura (métrico)8 cm
Para utilizar con (equipo)Depósito de minigel, Minicelda XCell SureLock
Porcentaje del gelDel 4 al 16%
Tamaño de gelMini
Tipo de gelBis-Tris
Intervalo de separaciónDe 30 a 10.000 kDa
Tipo de separaciónNativo
Pocillos10 pocillo
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Una caja contiene 10 geles. Almacenar entre 2 °C y 8 °C. No congelar.

Preguntas frecuentes

What gels can I use to separate native proteins?

The NativePAGE Invitrogen Bis-Tris Gel System is a pre-cast polyacrylamide mini gel system that provides a sensitive and high-resolution method for analyzing native membrane protein complexes, native soluble proteins, molecular mass estimations, and assessing purity of native proteins. It is based on the blue native polyacrylamide gel electrophoresis technique (BN PAGE) developed by Schagger and von Jagow.

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What does it mean when bands appear to be getting narrower (or "funneling") as they progress down a protein gel?

There may be too much beta-mercaptoethanol (BME), sample buffer salts, or dithiothreitol (DTT) in your samples. If the proteins are over-reduced, they can be negatively charged and actually repel each other across the lanes causing the bands to get narrower as they progress down the gel.

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Are NativePAGE gels and buffers compatible with Mini Gel tank?

Yes, NativePAGE gels are compatible with our Mini Gel tank, however there is a small variation from the original protocol.

The following protocol are for using NativePage gels with the Mini Gel Tank depending on if you are also performing a western transfer or not:
If you are NOT performing a western transfer:
1. Prepare 250 mL of each buffer (Anode and Dark Blue Cathode) per gel
2. After inserting a loaded NativePAGE gel into the Mini Gel Tank and pulling the clamp forward, fill the front cathode buffer chamber to the Fill Line with Dark Blue Cathode Buffer (~200 mL per gel)
3. Add 220 mL of Anode Buffer to the back anode buffer chamber for that gel. Start the gel run

If you are performing a western transfer:
1. Prepare 250 mL of Dark Blue Cathode Buffer, 250 mL of Light Blue Cathode Buffer, and 500 mL of Anode Buffer per gel
2. After inserting a loaded NativePAGE gel into the Mini Gel Tank and pulling the clamp forward, fill the front cathode buffer chamber to the Fill Line with Dark Blue Cathode Buffer (~200 mL per gel
3. Add 220 mL of Anode Buffer to the back anode buffer chamber for that gel
4. Start the gel run; pause the run after the dark blue dye has run ~1/3 of the way through gel
a. Pour out the buffers from the Mini Gel Tank
b. Refill the back anode buffer chamber with 220 mL of Anode Buffer per gel
c. Fill the front cathode buffer chamber to the Fill Line with Light Blue Cathode Buffer (~200 mL per gel)
5. Resume the gel run

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I would like to run a NativePAGE gel. Which of your protein standards should I use?

We recommend using the NativeMark Unstained Protein Standard, Cat. No. LC0725 for native gel electrophoresis with Tris-Glycine, NuPAGE Tris-Acetate or NativePAGE gels.

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My NativePAGE gel stops running halfway through the electrophoresis process. Can you please help me?

During NativePAGE runs, it is common for the current to drop below 1 mA. Most power supplies register this as a “No Load” error and automatically shut off, resulting in the stopping of the gel run. This can be bypassed in some power supplies by disabling or turning off the “Load Check” feature.

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