Search
Citas y referencias (10)
Invitrogen™
Kit de ensayo de citometría de flujo Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 488
El kit de ensayo de citometría de flujo Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 488 proporciona un ensayo simplificado y más sólidoMás información
Have Questions?
Cambiar vista
| Número de catálogo | Cantidad |
|---|---|
| C10420 | 100 ensayos |
| C10425 | 50 ensayos |
Número de catálogo C10420
Precio (CLP)
1.363.089
Each
Cantidad:
100 ensayos
Precio (CLP)
1.363.089
Each
El kit de ensayo de citometría de flujo Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 488 proporciona un ensayo simplificado y más sólido para analizar la replicación de ADN en las células proliferantes en comparación con los métodos de BrdU tradicionales. El ADN recién sintetizado se analiza mediante el láser de 488 nm del citómetro de flujo.
• Exacto--Resultados superiores comparado con los ensayos BrdU
• Rápido--Resultados en tan solo 90 minutos
• Económico--Más ensayos por kit
Ver la guía de selección para todos los ensayos Click-iT™ EdU y Click-iT™ Plus EdU para citometría de flujo.
Un método avanzado que le da resultados superiores a BrdU
el método más preciso de análisis de proliferación es la medición directa de la síntesis de ADN. Originalmente, este procedimiento se realizaba mediante la incorporación de nucleósidos radiactivos, es decir, 3H-timidina. Este método fue reemplazado por la detección basada en anticuerpos del análogo nucleósido bromodesoxiuridina (BrdU). Los kits de ensayo de citrometría de flujo Click-iT™ EdU son una novedosa alternativa al ensayo de BrdU. EdU (5-etinil-2´-desoxiuridina) es un análogo de la timidina que se incorpora al ADN durante la síntesis de ADN activa. La detección se basa en la química de clic: una reacción covalente catalizada con cobre entre una azida y un alqueno. En esta aplicación, el alqueno se encuentra en la fracción de etinil de EdU, mientras que la azida se acopla a los tintes Alexa Fluor™ 488, Alexa Fluor™ 647 o Pacific BlueTM. Se utilizan métodos de citometría de flujo estándar para determinar el porcentaje de células de fase S en la población (Fig. 1).
Unas condiciones moderadas permiten el uso con tintes de ciclo celular y anticuerpos.
Las ventajas del etiquetado Click-iT™ EdU resultan fácilmente evidentes durante la realización del ensayo (Fig. 2). El pequeño tamaño de la azida del tinte permite la detección eficaz de los EdU incorporados utilizando condiciones moderadas, mientras que la fijación basada en aldehído estándar y la permeabilización de detergente son suficientes para que el reactivo de detección Click-iT™ obtenga acceso al ADN. Esto ocurre de manera diferente en los ensayos de BrdU donde se requiere la desnaturalización del ADN (mediante HCl, calor o digestión con ADNasa) para exponer la BrdU de forma que pueda detectarla un anticuerpo anti-BrdU. El procesamiento de las muestras para el ensayo de BrdU puede provocar una alteración de la señal de la distribución del ciclo celular, además de la destrucción de los sitios de reconocimiento de los antígenos cuando se utilice el método HCl. Por el contrario, el kit de proliferación de células EdU listo para su uso es compatible con tintes de ciclo celular. Este kit de ensayo EdU también se puede multiplexar con anticuerpos contra marcadores de superficie e intracelulares.
Protocolo rápido y sencillo
El protocolo Click-iT™ EdU se basa en los pasos de fijación mediante aldehído y permeabilización de detergente para el etiquetado de anticuerpos inmunohistoquímicos, pero EdU es compatible con
otros agentes de fijación/permeabilización, incluyendo la saponina y el metanol. En tan solo cinco pasos podrá empezar a analizar sus datos de proliferación celular:
• Tratar las células con EdUM
• Reparar y permeabilizar las células
•Detectar las células en fase S con el cóctel de detección Click-iT™ durante 30 minutos
• Lavar una vez
• Analizar
Consiga resultados exactos de manera económica
Al aumentar el número de ensayos por kit, el kit de ensayo de citometría de flujo Click-IT™ EdU Alexa Fluor™ 488 es más barato que los ensayos BrdU tradicionales, por lo que es la opción ideal para experimentos grandes.
Solo para uso en investigación. No diseñado para uso diagnóstico o terapéutico en humanos ni en animales.
• Exacto--Resultados superiores comparado con los ensayos BrdU
• Rápido--Resultados en tan solo 90 minutos
• Económico--Más ensayos por kit
Ver la guía de selección para todos los ensayos Click-iT™ EdU y Click-iT™ Plus EdU para citometría de flujo.
Un método avanzado que le da resultados superiores a BrdU
el método más preciso de análisis de proliferación es la medición directa de la síntesis de ADN. Originalmente, este procedimiento se realizaba mediante la incorporación de nucleósidos radiactivos, es decir, 3H-timidina. Este método fue reemplazado por la detección basada en anticuerpos del análogo nucleósido bromodesoxiuridina (BrdU). Los kits de ensayo de citrometría de flujo Click-iT™ EdU son una novedosa alternativa al ensayo de BrdU. EdU (5-etinil-2´-desoxiuridina) es un análogo de la timidina que se incorpora al ADN durante la síntesis de ADN activa. La detección se basa en la química de clic: una reacción covalente catalizada con cobre entre una azida y un alqueno. En esta aplicación, el alqueno se encuentra en la fracción de etinil de EdU, mientras que la azida se acopla a los tintes Alexa Fluor™ 488, Alexa Fluor™ 647 o Pacific BlueTM. Se utilizan métodos de citometría de flujo estándar para determinar el porcentaje de células de fase S en la población (Fig. 1).
Unas condiciones moderadas permiten el uso con tintes de ciclo celular y anticuerpos.
Las ventajas del etiquetado Click-iT™ EdU resultan fácilmente evidentes durante la realización del ensayo (Fig. 2). El pequeño tamaño de la azida del tinte permite la detección eficaz de los EdU incorporados utilizando condiciones moderadas, mientras que la fijación basada en aldehído estándar y la permeabilización de detergente son suficientes para que el reactivo de detección Click-iT™ obtenga acceso al ADN. Esto ocurre de manera diferente en los ensayos de BrdU donde se requiere la desnaturalización del ADN (mediante HCl, calor o digestión con ADNasa) para exponer la BrdU de forma que pueda detectarla un anticuerpo anti-BrdU. El procesamiento de las muestras para el ensayo de BrdU puede provocar una alteración de la señal de la distribución del ciclo celular, además de la destrucción de los sitios de reconocimiento de los antígenos cuando se utilice el método HCl. Por el contrario, el kit de proliferación de células EdU listo para su uso es compatible con tintes de ciclo celular. Este kit de ensayo EdU también se puede multiplexar con anticuerpos contra marcadores de superficie e intracelulares.
Protocolo rápido y sencillo
El protocolo Click-iT™ EdU se basa en los pasos de fijación mediante aldehído y permeabilización de detergente para el etiquetado de anticuerpos inmunohistoquímicos, pero EdU es compatible con
otros agentes de fijación/permeabilización, incluyendo la saponina y el metanol. En tan solo cinco pasos podrá empezar a analizar sus datos de proliferación celular:
• Tratar las células con EdUM
• Reparar y permeabilizar las células
•Detectar las células en fase S con el cóctel de detección Click-iT™ durante 30 minutos
• Lavar una vez
• Analizar
Consiga resultados exactos de manera económica
Al aumentar el número de ensayos por kit, el kit de ensayo de citometría de flujo Click-IT™ EdU Alexa Fluor™ 488 es más barato que los ensayos BrdU tradicionales, por lo que es la opción ideal para experimentos grandes.
Solo para uso en investigación. No diseñado para uso diagnóstico o terapéutico en humanos ni en animales.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteAlexa Fluor™ 488
FormatoTubo(s)
Características ecológicasMenos peligroso
Cantidad100 ensayos
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Emission488
Para utilizar con (equipo)Citómetro de flujo
Línea de productosAlexa Fluor, Click-iT
Tipo de productoKit de ensayo de citómetros de flujo
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Contiene EdU (5-etinil-2'-desoxiuridina), azida Alexa Fluor™ 488, dimetilsulfóxido anhidro (DMSO), fijador Click-iT™, tampón de permeabilidad y lavado Click-iT™ a base de saponina, sulfato de cobre (II) y aditivo tampón Click-iT™ EdU.Almacenar entre 2 °C y 8 °C Desecar y proteger de la luz.
Preguntas frecuentes
I will be performing a cell proliferation assay using Click-iT EdU kit. At what point can I stop overnight, or do I have to perform all the steps continuously?
Can I combine Click-iT or Click-iT Plus reactions with phalloidin conjugates used for actin staining?
Are the Alexa Fluor azides from Click-iT EdU kits available separately?
I am observing no signal or very low specific signal for my click-labeled samples. What can I do to improve the signal?
I am observing high non-specific background when I image my Click-iT EdU TUNEL-labeled samples. What is causing this and what can I do to reduce the background?
Citations & References (10)
Citations & References
Abstract
Inositol pyrophosphate synthesis by inositol hexakisphosphate kinase 1 is required for homologous recombination repair.
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:23255604
'Inositol pyrophosphates, such as diphosphoinositol pentakisphosphate (IP(7)), are water-soluble inositol phosphates that contain high energy diphosphate moieties on the inositol ring. Inositol hexakisphosphate kinase 1 (IP6K1) participates in inositol pyrophosphate synthesis, converting inositol hexakisphosphate (IP(6)) to IP(7). In the present study, we show that mouse embryonic fibroblasts (MEFs) lacking IP6K1
IDO1 metabolites activate ß-catenin signaling to promote cancer cell proliferation and colon tumorigenesis in mice.
Journal:
PubMed ID:23669411
Indoleamine 2,3 dioxygenase-1 (IDO1) catabolizes tryptophan along the kynurenine pathway. Although IDO1 is expressed in inflamed and neoplastic epithelial cells of the colon, its role in colon tumorigenesis is not well understood. We used genetic and pharmacologic approaches to manipulate IDO1 activity in mice with colitis-associated cancer and human colon
Lung myofibroblasts are characterized by down-regulated cyclooxygenase-2 and its main metabolite, prostaglandin E2.
Journal:
PubMed ID:23755232
Prostaglandin E2 (PGE2), the main metabolite of cyclooxygenase (COX), is a well-known anti-fibrotic agent. Moreover, myofibroblasts expressing a-smooth muscle actin (a-SMA), fibroblast expansion and epithelial-mesenchymal transition (EMT) are critical to the pathogenesis of idiopathic pulmonary fibrosis (IPF). Our aim was to investigate the expression of COX-2 and PGE2 in human
An organotypic coculture model supporting proliferation and differentiation of medullary thymic epithelial cells and promiscuous gene expression.
Journal:J Immunol
PubMed ID:23269248
Understanding intrathymic T cell differentiation has been greatly aided by the development of various reductionist in vitro models that mimic certain steps/microenvironments of this complex process. Most models focused on the faithful in vitro restoration of T cell differentiation and selection. In contrast, suitable in vitro models emulating the developmental
PARG dysfunction enhances DNA double strand break formation in S-phase after alkylation DNA damage and augments different cell death pathways.
Journal:
PubMed ID:23744356
Poly(ADP-ribose) glycohydrolase (PARG) is the primary enzyme responsible for the degradation of poly(ADP-ribose). PARG dysfunction sensitizes cells to alkylating agents and induces cell death; however, the details of this effect have not been fully elucidated. Here, we investigated the mechanism by which PARG deficiency leads to cell death in different