DAF-FM Diacetate (4-Amino-5-Methylamino-2',7'-Difluorofluorescein Diacetate)

DAF-FM es un reactivo que se utiliza para detectar y cuantificar bajas concentraciones de óxido nítrico (NO). Es esencialmente no fluorescente hasta que reacciona con el NO, tras lo cual forma un benzotriazol fluorescente. La fluorescencia de DAF-FM se puede ser detectar mediante cualquier instrumento capaz de detectar fluoresceína, como citómetros de flujo, microscopios, lectores de microplacas de fluorescencia y fluorímetros.

Especificaciones de DAF-FM:
• Ex/Em de DAF-FM: ∼495/515 nm
• El producto liofilizado debe disolverse con DMSO y añadirse a un tampón acuoso para crear una solución de trabajo
• El diacetato de DAF-FM penetra en las células y se expande pasivamente en las membranas celulares; una vez dentro de la célula, se convierte en un producto impermeabilizante celular
• Los tampones que contienen seroalbúmina bovina (BSA) y rojo de fenol pueden afectar a la fluorescencia y deben utilizarse con precaución
• El valor cuántico de fluorescencia de DAF-FM es de ∼0,005, pero aumenta unas 160 veces, hasta ∼0,81, tras reaccionar con NO

Aplicaciones de DAF-FM:
• Evaluación mediante citometría de flujo de la producción de NO en linfoblastos deficientes en transaldolasa
• Detección de la acumulación de NO en neuronas corticales embrionarias tras la estimulación de las neurotrofinas
• Adquisición de imágenes in vivo de NO en peces cebra
• Detección microscópica intravital de generación de NO asociada con la angiogénesis en ratones
• Cuantificación de la liberación de NO inducida por ATP en las plaquetas de conejos

Ventajas importantes de DAF-FM sobre DAF-2
Los espectros del aducto de NO de DAF-FM son independientes del pH por encima de un pH 5,5. Asimismo, el aducto de NO de DAF-FM es considerablemente más fotoestable que el de DAF-2, lo que se traduce en mayor tiempo para la captura de imágenes. Por último, DAF-FM es un reactivo más sensible a NO que DAF-2 (el límite de detección de NO con DAF-FM se sitúa en ∼3 nM, mientras que con DAF-2 es de ∼5 nM).

Sondas para la investigación del óxido nítrico
Ofrecemos varios productos para la detección de especies reactivas de oxígeno (ROS) y óxido nítrico (NO). Consulte estos productos en el apartado Sondas para la investigación del óxido nítrico, sección 18.3 del manual de Molecular Probes™.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso diagnóstico o terapéutico en humanos ni en animales.