Thermo Scientific Klenow Fragment, exo-, es el fragmento grande de la ADN polimerasa I. Presenta actividad de la polimerasa 5'→3', pero carece de las actividades exonucleasas 3'→5' y 5'→3' de la ADN polimerasa I. La actividad exonucleasa 3'→5' de la enzima se elimina por mutaciones en el sitio activo de la exonucleasa 3'→5'.

Características destacadas

• Carece de actividad exonucleasa 3'→5'
• Incorpora nucleótidos modificados (por ejemplo, Cy3, Cy5 y nucleótidos marcados con flurosceína, rodamina, aminoalilo y biotina)
• Activa en enzimas de restricción, PCR y tampones RT

Aplicaciones
• Etiquetado de ADN mediante cebado aleatorio
• Etiquetado por relleno de extremos 5' de dsADN
• Amplificación por desplazamiento de cadenas (SDA)
• Secuenciación de ADN por el método Sanger

Nota

Klenow Fragment, exo-, no se recomienda para reacciones de blunting para producir extremos romos de ADN antes de la ligación de ADN, puesto que, con frecuencia, añade uno o varios nucleótidos adicionales al extremo 3' de los sustratos de ADN de extremos romos independientemente de la plantilla.