Fluo-5N, AM, cell permeant - Special Packaging
Fluo-5N, AM, cell permeant - Special Packaging
Citas y referencias (15)
Invitrogen™

Fluo-5N, AM, cell permeant - Special Packaging

Los indicadores de calcio marcados son moléculas que presentan un aumento de la fluorescencia al unirse a Ca2+. Fluo-5F, fluo-5NMás información
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Número de catálogoCantidad
F1420410 x 50 μg
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Precio (CLP)
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Los indicadores de calcio marcados son moléculas que presentan un aumento de la fluorescencia al unirse a Ca2+. Fluo-5F, fluo-5N y fluo-4ff son análogos de fluo-4 con menor afinidad de unión de Ca2+, lo que los hace adecuados para detectar niveles intracelulares de calcio en el intervalo de 1 µM a 1 mM que saturarían la respuesta de fluo-3 y fluo-4. Las células se pueden cargar como éster AM de estos indicadores calcio mediante la adición del indicador disuelto directamente a las placas que contienen las células cultivadas. Estos indicadores son compatibles con la excitación a 488 nm mediante fuentes láser de iones de argón, lo que los hace útiles para aplicaciones de detección de microplacas, microscopía confocal y citometría de flujo.

Obtenga más información sobre los indicadores de iones, incluidos los indicadores de calcio, potasio, pH y potencial de membrana ›

Especificaciones del indicador de calcio (éster AM):
• Etiqueta (Ex/Em de forma unida a Ca2+): Fluo-5N (494/516 nm)
• Aumento de la intensidad de fluorescencia al unirse con Ca2+: >100 veces
• Kd para Ca2+ en tampón: ∼90 µM
• Presentan un aumento de la fluorescencia al unirse a Ca2+ con poco cambio en la longitud de onda

Uso de TPEN para controlar cationes de metales pesados
Además, los indicadores basados en BAPTA, como estos, se unen a varios cationes de metales pesados (por ejemplo, Mn2+, Zn2+, Pb2+) con mucha mayor afinidad que a Ca2+. Las perturbaciones en las mediciones de calcio causadas por la presencia de estos iones pueden controlarse usando el quelante seleccionador de metales pesados TPEN.

Más opciones para indicadores de calcio fluorescentes
Ofrecemos una amplia selección de indicadores de calcio Molecular Probes™ para su uso en diversos escenarios experimentales. Para obtener más información, consulte Fluorescent Ca2+ Indicators Excited with Visible Light—Section 19.3 (Indicadores de Ca2+ fluorescentes excitados mediante luz visible, sección 19.3) en el manual de Molecular Probes™.

Para obtener información sobre indicadores de Ca2+ excitables mediante UV, indicadores de Ca2+ basados en proteínas, conjugados de indicadores de Ca2+ e indicadores basados en fluorescencia de otros iones metálicos (es decir, Mg2+, Zn2+) consulte Indicators for Ca2+, Mg2+, Zn2+ and Other Metal Ions—Chapter 19 (Indicadores para Ca2+, Mg2+, Zn2+ y otros iones metálicos, capítulo 19) en el manual de Molecular Probes™.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso diagnóstico o terapéutico en humanos ni en animales.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteA base de colorantes fluorescentes
Cantidad10 x 50 μg
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Para utilizar con (aplicación)Viabilidad y proliferación celulares
Para utilizar con (equipo)Microscopio confocal, Microscopio de fluorescencia, Instrumentos de alto contenido, Lector HTS, Lector de microplacas, Generador de imágenes de fluorescencia
Tipo de productoIndicador de calcio
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar en el congelador de -5 °C a -30 °C y proteger de la luz.

Preguntas frecuentes

I am doing calcium flux imaging with your Fura-2 calibration kit, but am seeing a large variability in ratio in different places around the slide. I am correcting for uniform illumination, using the product as directed, and sealing the coverslip with nail polish.

The nail polish may be the problem. The Kd value (calcium sensitivity) changes depending upon the dye's environment. Nail polish has solvents that can leech under the coverslip and cause variability. We recommend either going without a sealing or sealing with melted paraffin painted on the coverslip edges with a cotton-tipped applicator (paraffin is hydrophobic and has no solvents).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

I need to label cells with Fluo-4, AM, for a calcium flux assay. How long after labeling will the dye be retained?

After loading dye into the cells, intracellular esterases remove the 'AM' moiety from the dye. When the 'AM' group is removed, the dye is able to bind calcium and fluoresce. Since the dye is not covalently bound to any cellular components, it may be actively effluxed from the cell. The rate of efflux is dependent upon the inherent properties of the cell, culture conditions and other factors. The dye may be retained for hours, days or even weeks or lost in a matter of minutes. The use of Probenecid (Cat. No. P36400) limits loss by active efflux.

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Citations & References (15)

Citations & References
Abstract
The use of the indicator fluo-5N to measure sarcoplasmic reticulum calcium in single muscle fibres of the cane toad.
Authors:Kabbara AA, Allen DG
Journal:J Physiol
PubMed ID:11432994
'1. Single fibres from the lumbrical muscles of the cane toad (Bufo marinus) were incubated in fluo-5N AM for 2 h at 35 degrees C in order to load the indicator into the sarcoplasmic reticulum. Fluo-5N is a low-affinity calcium indicator (K(Ca) 90 microM). Successful sarcoplasmic reticulum (SR) loading was ... More
Cardiac alternans do not rely on diastolic sarcoplasmic reticulum calcium content fluctuations.
Authors:Picht E, DeSantiago J, Blatter LA, Bers DM,
Journal:Circ Res
PubMed ID:16946134
'Cardiac alternans are thought to be a precursor to life-threatening arrhythmias. Previous studies suggested that alterations in sarcoplasmic reticulum (SR) Ca2+ content are either causative or not associated with myocyte Ca2+ alternans. However, those studies used indirect measures of SR Ca2+. Here we used direct continuous measurement of intra-SR free ... More
Kinesin dependent, rapid, bi-directional transport of ER sub-compartment in dendrites of hippocampal neurons.
Authors:Bannai H, Inoue T, Nakayama T, Hattori M, Mikoshiba K
Journal:J Cell Sci
PubMed ID:14676272
'Although spatially restricted Ca2+ release from the endoplasmic reticulum (ER) through intracellular Ca2+ channels plays important roles in various neuronal activities, the accurate distribution and dynamics of ER in the dendrite of living neurons still remain unknown. To elucidate these, we expressed fluorescent protein-tagged ER proteins in cultured mouse hippocampal ... More
Ca2+ blinks: rapid nanoscopic store calcium signaling.
Authors:Brochet DX, Yang D, Di Maio A, Lederer WJ, Franzini-Armstrong C, Cheng H
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:15710901
'Luminal Ca(2+) in the endoplasmic and sarcoplasmic reticulum (ER/SR) plays an important role in regulating vital biological processes, including store-operated capacitative Ca(2+) entry, Ca(2+)-induced Ca(2+) release, and ER/SR stress-mediated cell death. We report rapid and substantial decreases in luminal [Ca(2+)], called "Ca(2+) blinks," within nanometer-sized stores (the junctional cisternae of ... More
Sulfhydryl oxidation overrides Mg(2+) inhibition of calcium-induced calcium release in skeletal muscle triads.
Authors:Donoso P, Aracena P, Hidalgo C
Journal:Biophys J
PubMed ID:10866954
'We studied the effect of oxidation of sulfhydryl (SH) residues on the inhibition by Mg(2+) of calcium-induced calcium release (CICR) in triad-enriched sarcoplasmic reticulum vesicles isolated from rabbit skeletal muscle. Vesicles were either passively or actively loaded with calcium before eliciting CICR by dilution at pCa 4.6-4.4 in the presence ... More
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