Phusion U Hot Start PCR Master Mix
Phusion U Hot Start PCR Master Mix
Thermo Scientific™

Phusion U Hot Start PCR Master Mix

La ADN polimerasa Thermo Scientific Phusion U es una enzima innovadora de alta fidelidad desarrollada con tecnología de fusión. DebidoMás información
Have Questions?
Cambiar vistabuttonViewtableView
Número de catálogoN.º de reacciones
F533S100 reacciones
F533L500 reacciones
Número de catálogo F533S
Precio (CLP)
366.545
Each
Añadir al carro de la compra
N.º de reacciones:
100 reacciones
Pedido a granel o personalizado
Precio (CLP)
366.545
Each
Añadir al carro de la compra
La ADN polimerasa Thermo Scientific Phusion U es una enzima innovadora de alta fidelidad desarrollada con tecnología de fusión. Debido a una mutación patentada en el llamado bolsillo de unión dUTP de Phusion, Phusion U supera una importante limitación de las enzimas de corrección: es capaz de incorporar dUTP y leer a través del uracilo presente en las plantillas de ADN.

Además de la posibilidad de uso del uracilo, Phusion U presenta todas las propiedades superiores de otras ADN polimerasas Phusion: gran precisión, velocidad, capacidad para amplicones largos de hasta 20 kb y una alta especificidad con el inicio en caliente basado en Affibody. Estas características hacen de la ADN polimerasa Phusion U Hot Start una opción excelente para aplicaciones tan importantes como la amplificación de ADN convertido de bisulfito o dañado, así como el uso de control de contaminación cruzada.

La mezcla maestra para PCR Phusion U Hot Start es una práctica mezcla de 2X que contiene ADN polimerasa Phusion U Hot Start, nucleótidos y tampón de reacción optimizado incluyendo MgCl2. El usuario solo debe agregar moldes y cebadores.

Aspectos destacados

Precisión: ADN polimerasa de alta fidelidad (25x Taq)
Tolerancia al uracilo: diseñada para incorporar dUTP y amplificar moldes de uracilo
Especificidad: inicio en caliente para una amplificación no específica reducida y degradación de cebadores
Velocidad : tiempos de extensión breves (15-30 s/kb)

Aplicaciones

• Amplificación de ADN convertido en bisulfito
• Amplificación de ADN dañado o envejecido
• Control de contaminación cruzada
• Métodos de clonación basados en escisión de uracilo (USER)

Uso de ADN polimerasas Phusion
Las reglas de recocido para ADN polimerasas Phusion son diferentes a las de muchas ADN polimerasas comunes (como las ADN polimerasas Taq). Para obtener resultados óptimos, utilice nuestra calculadora de Tm en www.thermofisher.com/tmcalculator.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones
Fidelidad (frente a Taq)25 X
Inicio en calienteInicio en caliente integrado
N.º de reacciones100 reacciones
SobranteRomo
PolimerasaADN polimerasa Phusion U Hot Start
Tipo de productoMezcla maestra para PCR Hot Start
Cantidad100 reacción de 50 μl
Formato de reacciónMezcla maestra o SuperMix
Condiciones de envíoDry Ice
Tamaño (producto final)20 kb o menos
Concentración2X
Para utilizar con (aplicación)Hot-start PCR
GC-Rich PCR PerformanceMedio
Velocidad de reacciónFast
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
La mezcla maestra de PCR Phusion U Hot Start incluye:
• ADN polimerasa Phusion U Hot Start
• Tampón de reacción 2X
• 3 mm de MgCl2
• 400 μm de cada componente de dATP, dTTP, dCTP y dGTP
La mezcla maestra se suministra con agua libre de nucleasas.
Almacénese a -20 °C.

Preguntas frecuentes

Do Phusion DNA Polymerases add the non-template dependent 3'-A overhang?

Phusion DNA Polymerases generate blunt end products; therefore, blunt end cloning is recommended. If TA cloning is required, it can be performed by adding A overhangs to the blunt PCR product with e.g. Taq DNA Polymerase (Cat. No. EP0401). However, before adding the overhangs it is very important to remove all the Phusion DNA Polymerase by purifying the PCR product carefully, as the proofreading activity in Phusion DNA Polymerase is very strong. Any remaining Phusion DNA Polymerase will degrade the A overhangs, thus creating blunt ends again.

Can Phusion DNA Polymerases extend at 1 second/kb?

Yes it is possible, especially when amplifying smaller amplicons. Processivity of Phusion DNA Polymerases is 10 times that of Pfu. We recommend extension times of 15 s/kb for Phusion Flash PCR Master Mix. 15 s/kb is a conservative value that we can promise to work with almost any amplicon. In many cases, significantly shorter extension times (0-5 s/kb) can be used without compromising the yield. What separates Phusion Flash DNA Polymerase from other fast polymerases is that all steps in the PCR protocol can be shortened, including annealing and denaturation. This results in extremely fast protocols as compared with any other polymerase.