Kit de PCR de alta fidelidad Phusion
Kit de PCR de alta fidelidad Phusion
Thermo Scientific™

Kit de PCR de alta fidelidad Phusion

Las ADN polimerasas de alta fidelidad Thermo Scientific Phusion establecen un nuevo referente para PCR de alto rendimiento. Con unaMás información
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F553L200 reacciones
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Las ADN polimerasas de alta fidelidad Thermo Scientific Phusion establecen un nuevo referente para PCR de alto rendimiento. Con una tasa de errores 50 veces menor que la de Taq y 6 veces inferior a la de Pfu, las polimerasas de ADN de alta fidelidad Phusion son una opción excelente para la clonación y otras aplicaciones que requieren alta fidelidad. Las ADN polimerasas Phusion ofrecen un rendimiento sólido con tiempos de protocolo cortos, incluso en presencia de inhibidores de PCR. Generan una mayor producción con menos cantidad de enzimas que otras ADN polimerasas.

Aspectos destacados

• Alta fidelidad (52X Taq)
• PCR rápida gracias a los breves tiempos de extensión (15-30 s/kb)
• Sólido rendimiento, mínima optimización necesaria
• Alto rendimiento de productos de PCR con una mínima optimización
• Disponible en formato de tampón verde para la carga directa de productos de PCR en geles (F-534S o F-534L)

Aplicaciones

• PCR de alta fidelidad
• Clonación
• Generación de moldes para secuenciación
• Amplificación de moldes complejos (con gran contenido de GC)
• PCR de largo alcance (hasta 20 kb)
• Mutagénesis
• PCR de alto procesamiento
• Micromatriz
El kit de PCR de alta fidelidad Thermo Scientific Phusion contiene todos los reactivos necesarios para PCR, incluidos el molde de control de ADN lambda y los cebadores para amplicones de 1,3 kb y 10 kb. La cantidad de la molde de ADN es suficiente para realizar 20 reacciones de control en un volumen de 50 µl o 50 reacciones de control en un volumen de 20 µl.

Uso de ADN polimerasas Phusion
Las reglas de recocido para ADN polimerasas Phusion son diferentes a las de muchas ADN polimerasas comunes (como las ADN polimerasas Taq). Para obtener resultados óptimos, utilice nuestra calculadora Tm en www.thermofisher.com/tmcalculator.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Fidelidad (frente a Taq)52 X
Inicio en calienteNo
N.º de reacciones200 reacciones
SobranteRomo
PolimerasaADN polimerasa de alta fidelidad Phusion
Tipo de productoKit de PCR de alta fidelidad
Cantidad200 reactions
Formato de reacciónComponentes separados
Condiciones de envíoDry Ice
Tamaño (producto final)20 kb o menos
Para utilizar con (aplicación)Standard PCR, High-fidelity PCR
GC-Rich PCR PerformanceAlto
Velocidad de reacciónFast
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Incluye:
• ADN polimerasa Phusion (2 U/μL)
• 5X tampón GC Phusion
• 5X tampón HF Phusion
• Mezcla de dNTP (10 mM cada uno)
• Solución de MgCl2 (50 mM)
• Plantilla de control (λ ADN)
• Primers de 1,3 kb (4 μM cada uno)
• Primers de 10 kb (4 μM cada uno)
• Patrón de tamaño de ADN
• DMSO

Almacenar a -20 °C.

Preguntas frecuentes

Do Phusion DNA Polymerases add the non-template dependent 3'-A overhang?

Phusion DNA Polymerases generate blunt end products; therefore, blunt end cloning is recommended. If TA cloning is required, it can be performed by adding A overhangs to the blunt PCR product with e.g. Taq DNA Polymerase (Cat. No. EP0401). However, before adding the overhangs it is very important to remove all the Phusion DNA Polymerase by purifying the PCR product carefully, as the proofreading activity in Phusion DNA Polymerase is very strong. Any remaining Phusion DNA Polymerase will degrade the A overhangs, thus creating blunt ends again.

Can Phusion DNA Polymerases extend at 1 second/kb?

Yes it is possible, especially when amplifying smaller amplicons. Processivity of Phusion DNA Polymerases is 10 times that of Pfu. We recommend extension times of 15 s/kb for Phusion Flash PCR Master Mix. 15 s/kb is a conservative value that we can promise to work with almost any amplicon. In many cases, significantly shorter extension times (0-5 s/kb) can be used without compromising the yield. What separates Phusion Flash DNA Polymerase from other fast polymerases is that all steps in the PCR protocol can be shortened, including annealing and denaturation. This results in extremely fast protocols as compared with any other polymerase.

Can protocols optimized for Phusion DNA Polymerase be directly applied to Phusion Hot Start II DNA Polymerase?

Yes, protocols optimized for Phusion DNA Polymerase can be applied to Phusion Hot Start II DNA Polymerase reactions.