Fast DNA End Repair Kit

El kit de reparación final de ADN rápido Thermo Scientific se utiliza para la conversión en extremos romos y la fosforilación de extremos de ADN en tan solo cinco minutos para su uso posterior en la ligadura de extremos romos.

Todos los componentes del kit contienen reactivos premezclados para reducir los pasos de pipeteo y proporcionar comodidad. La mezcla de enzimas de reparación final contiene una mezcla optimizada de ADN polimerasa T4 y fragmento Klenow para lograr una conversión en extremos romos muy eficaz de ADN fragmentado, y polinucleótido cinasa T4 (PNK) para una fosforilación eficiente de los extremos de ADN. La mezcla de reacción de reparación final 10X contiene un tampón de reacción optimizado, ATP y dNTP.

Muestras como la de ADN genómico fragmentado (enzima de restricción digerida, nebulizada o sonicada), ADN plasmídico digerido por enzima de restricción, ADNc bicatenario y productos de PCR que contienen salientes de dA son compatibles con el kit.

Características

Durante la reacción de reparación final del ADN, el ADN fragmentado se convierte en ADN de extremo romo que contiene un grupo 5'-fosfato y 3'-hidroxilo. La actividad de la polimerasa 5'→3' de la mezcla de enzimas de reparación final llena los extremos 5’ de ADN sobresaliente mientras que la actividad de la exonucleasa 3'→5' elimina los salientes 3'. T4 PNK añade 5'-fosfatos a los extremos de fragmentos de ADN no fosforilados, como productos de PCR. (consulte la tabla 1 y la figura 1 a continuación).

Aspectos destacados

• Eficaz: conversión en extremos romos y fosforilación de 0,5 a 5 µg de ADN
• Rápido: la reacción se completa en cinco minutos
• Práctico: los componentes de reacción se premezclan para reducir los pasos de pipeteo

Aplicaciones

• La conversión en extremos romos y la fosforilación de ADN bicatenario (ADN nebulizado, ADN sonizado, ADN digerido por enzimas de restricción, ADNc, productos de PCR)

Incluye

• Mezcla de enzimas de reparación final
• Mezcla de reacción de reparación final 10X

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