La señal morfogénica que proporciona el Shh en el SNC en desarrollo induce la proliferación de células precursoras neuronales en el cerebelo en desarrollo y otros tejidos. La señalización proliferativa por el Shh está implicada en el desarrollo de cáncer, incluyendo cánceres específicos del cerebro y la piel, como los carcinomas basocelulares. La señalización se realiza mediante un Receptor Smoothened (SMO)⁄Patched (PTC-1) complejo. La activación del Patched por el Shh libera la inhibición del Patched en el Smoothened que conduce a la activación de la vía Sonic Hedgehog del factor de transcripción Gli para inducir la expresión génica descendente. La línea celular CellSensor® Gli-bla 22Rv1 contiene un gen indicador de betalactamasa bajo control del elemento de respuesta Gli integrado de forma estable en las células 22Rv1. Esta línea celular es una población clónica aislada por citometría de flujo. El clon fue seleccionado en base a la inhibición de la vía con KAAD-ciclopamina. Esta línea celular también se ha probado para el rendimiento del ensayo en condiciones variables, incluyendo la concentración de DMSO, el número de células, el tiempo de incubación del compuesto y el tiempo de carga del sustrato; y se ha validado para Z’ bajo la inhibición máxima de la actividad de la β-lactamasa con ácido clavulánico.