TA Cloning™ Kit, Dual Promoter, with pCR™II Vector and One Shot™ INVαF' Chemically Competent E. coli
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Invitrogen™

TA Cloning™ Kit, Dual Promoter, with pCR™II Vector and One Shot™ INVαF' Chemically Competent E. coli

El promotor doble del kit TA Cloning™ con vector pCR™II proporciona una estrategia de clonación rápida y de un pasoMás información
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Número de catálogoN.º de reacciones
K20500120 reacciones
K205040
también denominado K2050-40
40 reacciones
Número de catálogo K205001
Precio (CLP)
788.071
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N.º de reacciones:
20 reacciones
Precio (CLP)
788.071
Each
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El promotor doble del kit TA Cloning™ con vector pCR™II proporciona una estrategia de clonación rápida y de un paso para insertar directamente un producto de PCR amplificada con Taq en un vector plasmídico. Los promotores T7 y SP6 del vector pCR™II permiten la transcripción in vitro del inserto para producir productos de sentido o antisentido. El promotor doble del kit TA Cloning usa el vector de clonación pCR™II y ligasa de ADN T4 ExpressLink™ para generar un producto de ligadura en un proceso de ligadura de quince minutos a temperatura ambiente. Las reacciones normalmente producen > 80 % de recombinantes que contienen insertos.

Características del Kit de clonación™ de TA Dual Promoter:
Rápido y cómodo: ligación a temperatura ambiente en 15 minutos
Eficiente: cribaje azul/blanco y > 80 % de los clones con inserto adecuado
Flexible: elección de resistencia a kanamicina o ampicilina para la selección flexible de antibióticos
Sin complicaciones: elimina cualquier modificación enzimática del producto de PCR
Optimizado: no requiere el uso de primers de PCR que contengan sitios de restricción

El vector de pCR™ II proporciona:
• Salientes 3'-T para ligadura directa de productos de PCR amplificada con Taq
• Promotores T7 y SP6 para transcripción y secuenciación de ARN in vitro
• Poliligador versátil con sitios EcoR I flanqueados para fácil escisión de insertos
• Sitios de primer directo e inverso M13 para secuenciación

Cómo funciona TA Cloning™
La polimerasa Taq tiene un actividad no dependiente de la plantilla que añade una sola deoxiadenosina (A) a los extremos 3' de los productos de PCR. El vector linealizado suministrado en este kit tiene residuos de una sola desoxiadenosina 3' (T). Esto permite a los insertos de PCR ligar de forma eficaz con el vector.

Configuraciones del kit
El kit TA Cloning™ se ofrece en una variedad de configuraciones: con E. coli químicamente competente One Shot™ INVF’ (K2050-01 y K2050-40), E. coli químicamente competente One Shot™ TOP10F’ (K2060-01 y K2060-40) y sin células competentes (K2750-20 y K2750-40) en tamaños de kit de 20 y 40 reacciones.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones
Cepa bacteriana o de levaduraINVαF ́
Tipo de célulaE. coli químicamente competente
Método de clonaciónTA Cloning
Para utilizar con (aplicación)Clonación PCR
IncluyeVector pCRII linealizado, ligasa de ADN T4 ExpressLink, tampón de ligación de ADN T4 5X ExpressLink, dNTPs, tampón de PCR 10X, agua esterilizada, controles, E. coli químicamente competente INVαF’ One Shot, medio SOC y un plásmido de control superenrollado.
N.º de reacciones20 reacciones
Línea de productosOne Shot
Tipo de productoKit de clonación
PromotorT7, SP6
Cantidad20 reactions
VectorpCRII
FormatoKit
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Este kit contiene el vector pCR™II linealizado, la ligasa de ADN T4 ExpressLink™, el tampón de ligación de ADN T4 5X ExpressLink™, dNTPs, el tampón de PCR 10X, agua estéril y controles. Los kits de células competentes contienen E. coli químicamente competente One Shot™, medio SOC y un plásmido de control superhelicoidal.

Almacene el E. coli de One Shot™ a - 80 °C. Almacene todos los demás componentes a - 20 °C. Se garantiza la estabilidad de todos los reactivos durante 6 meses si se almacenan correctamente.

Preguntas frecuentes

Have you compared in vitro transcription levels between SP6 and T7 promoters in your pCRII vectors?

No, we have not done in-house comparisons of transcription levels. It is widely known though that T7 polymerase produces more RNA than SP6 (on the order of 10-fold higher).

Citations & References (36)

Citations & References
Abstract
The catalytic mechanism of Cdc25A phosphatase.
Authors: McCain Daniel F; Catrina Irina E; Hengge Alvan C; Zhang Zhong-Yin;
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:11805096
'Cdc25 phosphatases are dual specificity phosphatases that dephosphorylate and activate cyclin-dependent kinases (CDKs), thereby effecting the progression from one phase of the cell cycle to the next. Despite its central role in the cell cycle, relatively little is known about the catalytic mechanism of Cdc25. In order to provide insights ... More
Cloning and functional characterization of a rat renal organic cation transporter isoform (rOCT1A).
Authors:Zhang L, Dresser MJ, Chun JK, Babbitt PC, Giacomini KM
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:9195965
'Polyspecific organic cation transporters in the renal proximal tubule mediate the secretion of many clinically used drugs as well as endogenous metabolites. Recently, two organic cation transporters (rOCT1 and rOCT2) were cloned from rat kidney. In this study, we report the cloning and functional expression of an rOCT1 isoform, rOCT1A, ... More
Differential gene expression between developing queens and workers in the honey bee, Apis mellifera [see comments]
Authors:Evans JD, Wheeler DE
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:10318926
'Many insects show polyphenisms, or alternative morphologies, which are based on differential gene expression rather than genetic polymorphism. Queens and workers are alternative forms of the adult female honey bee and represent one of the best known examples of insect polyphenism. Hormonal regulation of caste determination in honey bees has ... More
Semaphorin III can function as a selective chemorepellent to pattern sensory projections in the spinal cord.
Authors:Messersmith EK, Leonardo ED, Shatz CJ, Tessier-Lavigne M, Goodman CS, Kolodkin AL
Journal:Neuron
PubMed ID:7748562
'Distinct classes of primary sensory neurons in dorsal root ganglia subserve different sensory modalities, terminate in different dorsoventral locations in the spinal cord, and display different neurotrophin response profiles. Large diameter muscle afferents that terminate in the ventral spinal cord are NT-3 responsive, whereas small diameter afferents subserving pain and ... More
Nopp140 is a mediator of the protein kinase A signaling pathway that activates the acute phase response alpha1-acid glycoprotein gene.
Authors: Chiu Chi-Ming; Tsay Yeou-Guang; Chang Ching-Jin; Lee Sheng-Chung;
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:12167624
'The acute phase response (APR) in liver during inflammation is one of the well known examples for elucidating the signaling pathways that lead to the combinatorial regulation of gene expression. The APR is exemplified by alpha(1)-acid glycoprotein gene (agp) expression. A number of transcription factors, including CCAAT/enhancer-binding protein beta (C/EBPbeta), ... More