PureLink™ 96 HQ Plasmid DNA Purification Kit

El kit de purificación de ADN plasmídico PureLink HQ 96 se ha diseñado para el aislamiento de alto rendimiento deMás información

Número de catálogo	Cantidad
K210096	4 x 96 preparaciones

Número de catálogo K210096

Precio (CLP)

2.267.996

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Cantidad:

4 x 96 preparaciones

Precio (CLP)

2.267.996

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El kit de purificación de ADN plasmídico PureLink HQ 96 se ha diseñado para el aislamiento de alto rendimiento de ADN plasmídico de alta calidad a partir de células bacterianas. Se puede utilizar con un colector de vacío o una centrífuga y es compatible con estaciones de trabajo de manipulación automatizada de líquidos.

El kit de purificación de ADN plasmídico PureLink HQ 96 ofrece las siguientes ventajas:
• Capacidad para aislar hasta 10 µg de ADN plasmídico por pocillo
• Diseñado para aislar ADN plasmídico de alta calidad en 30-45 minutos
• Contaminación mínima del ADN genómico en el ADN plasmídico purificado
• Compatible con estaciones de trabajo de manipulación automatizada de líquidos
• Rendimiento fiable del ADN plasmídico purificado en aplicaciones posteriores como la transfección de células de mamíferos

Descripción general del proceso
Las células bacterianas se cosechan y se resuspenden en el tampón de resuspensión con RNasa. Las células se lisan mediante un procedimiento de lisis alcalina/SDScell. El lisado se neutraliza y las condiciones se ajustan para su posterior unión. Después de la aclaración del lisado usando la placa de aclaración PureLink HQ 96, el lisado se procesa mediante de la placa de unión PureLink HQ 96. El ADN se une a la membrana a base de sílice de la placa y las impurezas se eliminan lavando con el tampón de lavado. El ADN se eluye en tampón de elución de baja sal o agua.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones

Tipo de producto finalADN plasmídico

Para utilizar con (aplicación)PCR, transfección, secuenciación, transformación, clonación

Para utilizar con (equipo)Estación de trabajo de manipulación de líquidos automatizada

Compatibilidad de alto rendimientoCompatible con alto rendimiento

N.º de reacciones4 x 96 preparaciones

Escala preparativa<100 µ g de ADN plasmídico (pequeña escala)

Línea de productosPureLink

Tipo de productoKit de purificación de ADN plasmídico

Cantidad4 x 96 preparaciones

Tipo de muestraCultivo bacteriano

Condiciones de envíoTemperatura ambiente

ObjetivoADN plasmídico

Tiempo de pruebaDe 30 min a 40 min

FormatoPlaca de 96 pocillos

Isolation TechnologyPlaca de sílice

Unit SizeEach

Contenido y almacenamiento

En el kit se suministran suficientes reactivos para realizar 384 (4 × 96) aislamientos.

Los reactivos incluyen:
• Tampón de resuspensión (R1)
• Tampón de lisis (L1)
• Tampón de neutralización/unión (B1)
• Tampón de lavado (W1)
• Tampón de elución; 10 mm de Tris-HCl, pH 8,5 (E1)
• RNasa A
• Placa de aclaración PureLink HQ 96
• Placa de unión PureLink HQ 96
• Placa receptora
• Lámina adhesiva para placas

Preguntas frecuentes

I'm getting low/no plasmid DNA after purification using a PureLink HiPure kit, even though there was measurable absorbance. Do you have any suggestions for what I can do?

A common problem encountered with absorbance measurements is turbidity of samples. (This could be caused by residual resin from the column.) If there is insoluble material in the cuvette (not often detected by the naked eye), much of the UV light is not absorbed but scattered, leading to an artificially high UV absorbance reading (at 260 or 280 nm, for example.) If your A260 is high, we recommend that you check the A320 to determine if there is resin in the sample. You can also try to centrifuge or filter (0.2 µm filter) your sample to remove any resin and then recheck the concentration.

I've run out of buffer when using the PureLink HiPure Plasmid Purification Kit (Cat. No. K210018). Can I purchase the buffers separately?

Yes, we would recommend purchasing the PureLink HiPure BAC Buffer Kit (Cat. No. K210018). This kit includes Resuspension Buffer (R3) (250 ml), Lysis Buffer (L7) (250 ml), Precipitation Buffer (N3) (250 ml), and RNase A (20 µg/ml) (5 ml).
You will need to add less RNase A than stated on the bottle label of the R3 buffer in this kit. It says to add 5.6 mL of RNase A. This is the correct amount for the BAC protocol; however, if you are performing standard plasmid isolation, 1.4 mL RNase A should be added.

Plasmid DNA isolated using a PureLink column-based purification kit from an endA+ strain is degraded after a restriction digest. Do you have a suggestion for this?

The HiPure kits should remove all protein from the DNA including endonucleases. For the silica-based PureLink Quick Plasmid Miniprep Kit, we recommend an extra wash with the optional Wash Buffer W10 to remove endonucleases. This solution is not compatible with the HiPure system and should not be used with those kits. Alternatively, heat the eluted DNA in TE for 10 min at 70 degrees C. This should heat-inactivate any contaminating nucleases.

I'm seeing extra bands present after plasmid purification using your PureLink column-based system. What could cause this to happen?

Extra bands can occur when plasmid DNA is nicked and/or permanently denatured. Plasmid DNA that has been nicked (covalently opened) will run slower than supercoiled DNA during electrophoresis. A small amount of this species of DNA is common and is suitable for downstream applications. Permanently denatured DNA will migrate ahead of the supercoiled DNA and may not be suitable for downstream applications. Do not allow the lysis reaction to proceed longer than 5 minutes.

My purified DNA has particles in it after column-based plasmid purification. Any suggestions?

We have seen this on occasion. The particles do not affect quality of the DNA. Remove the particles by performimg a 1 minute centrifugation at 12,000 x g.

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