PureLink™ Pro Quick96 Plasmid Purification Kit
PureLink&trade; <i>Pro</i> Quick96 Plasmid Purification Kit
Invitrogen™

PureLink™ Pro Quick96 Plasmid Purification Kit

El kit plasmídico PureLink™ Pro Quick96 combina la química avanzada de extracción de placas de sílice con un diseño optimizadoMás información
Have Questions?
Cambiar vistabuttonViewtableView
Número de catálogoCantidad
K211024A
también denominado K2110-24A
1 Kit
K211004A1 kit
Número de catálogo K211024A
también denominado K2110-24A
Precio (CLP)
-
Solicite un presupuesto
Cantidad:
1 Kit
El kit plasmídico PureLink™ Pro Quick96 combina la química avanzada de extracción de placas de sílice con un diseño optimizado de placas de 96 pocillos para el procesamiento manual o automatizado de ADN plasmídico de E. coli en tan solo 45 minutos (tabla 1). Con el kit plasmídico PureLink™ Pro Quick96 podrá:

• Obtener siempre una gran producción de ADN plasmídico de alta pureza
• Experimentar la facilidad de uso y el mejor rendimiento gracias a la mejora en diseño y protocolo de la placa
• Aumentar la flexibilidad de procesamiento con protocolos para centrífuga, colector de vacío o plataformas automatizadas

Funcionamiento
El kit plasmídico PureLink™ Pro Quick96 utiliza dos placas de 96 pocillos, una placa de filtración (junta tórica transparente) y una placa de unión (junta tórica roja) para purificar el ADN plasmídico. Las células bacterianas se someten a lisis alcalina y se sedimentan mediante la centrifugación. El lisado bacteriano se aplica entonces a la placa de filtración Quick96 para la limpieza y recogida en la placa de unión Quick96, donde el ADN plasmídico se une a la membrana de sílice. Después de los pasos de lavado para eliminar contaminantes, el ADN purificado se eluye y, seguidamente, estará listo para usarse en aplicaciones posteriores. El procedimiento completo se puede realizar en 45 minutos (figura 1).

Diseño mejorado de la placa
El kit plasmídico PureLink™ Pro Quick96 proporciona placas con semifaldón optimizadas de 96 pocillos para un rendimiento y unos resultados mejorados (figura 2). La placa de filtración Quick96 está diseñada para realizar una limpieza rápida y eficaz de los lisados bacterianos. La placa de unión Quick96 ofrece una mayor capacidad de unión de hasta 20 µg de ADN plasmídico. Además, las boquillas de la placa con cuello anular evitan la contaminación cruzada de las muestras y mejoran el secado de la membrana de sílice para evitar el arrastre de etanol. Asimismo, el procesamiento de muestras se puede realizar manualmente con un colector de vacío de sobremesa, mediante la centrifugación o con una plataforma de manipulación automatizada de líquidos. El diseño de la placa con semifaldón es compatible con la mayoría de los colectores de vacío en las estaciones de trabajo robóticas.

Mayor producción y pureza
El kit plasmídico PureLink™ Pro Quick96 permite una purificación rápida y reproducible de hasta 20 µg de ADN plasmídico de cepas de E. coli cultivadas en hasta 5 ml LB, 3 ml 2xYT o 3 ml TB. En una plataforma automatizada que utiliza 1,5 ml de cultivo de E. coli cultivado durante la noche en un bloque de pocillo cuadrado, las producciones habituales son de 5 a 15 µg de ADN plasmídico, con un promedio de 9,4 µg (figura 3). El ADN plasmídico resultante forma superhélices sin ADN genómico o ARN detectable (figura 4). El kit plasmídico PureLink™ Pro Quick96 proporciona una mayor producción de ADN plasmídico de alta calidad para usar en aplicaciones posteriores comunes, como la secuenciación automatizada, la PCR, la digestión de enzimas de restricción y la clonación.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Volumen de elución50 µl (centrífuga), 100 µl (vacío), 150 µl
Tipo de producto finalADN plasmídico
Para utilizar con (aplicación)Secuenciación de última generación, secuenciación, PCR, clonación
Para utilizar con (equipo)Biomek™ FX, sistemas de manipulación de líquidos robóticos, colector de vacío, Eppendorf epMotion, centrífuga, TECAN Freedom Evo, TECAN Genesis
Compatibilidad de alto rendimientoCompatible con alto rendimiento, no compatible con alto rendimiento (manual)
Escala preparativa<100 µ g de ADN plasmídico (pequeña escala)
Línea de productosPureLink
Tipo de productoKit de purificación de plásmidos
PurezaGrado de biología molecular
Cantidad1 Kit
Tipo de muestraCultivo bacteriano
Cantidad de material de partida1,2-1,5 ml de lisado⁄pocillo
Tipo de sistemaPureLink™
ObjetivoADN plasmídico
Tiempo de prueba45 min
Producción15 µg
FormatoPlaca de 96 pocillos
Isolation TechnologyPlaca de sílice
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
El kit de plásmidos Quick96 PureLink™ Pro incluye tampón de resuspensión Quick96 PureLink™ Pro, tampón de lisis, tampón de neutralización, RNasa A, tampones de lavado, tampón de elución, bloques de pocillos cuadrados, placas de filtración Quick96, placas de unión Quick96, placas de lavado, placas de elución y un manual. Conserve todos los componentes a temperatura ambiente. Almacene el tampón de resuspensión tras añadir el RNasa A a +4 °C. Se garantiza la estabilidad durante un año si se almacena correctamente.

Preguntas frecuentes

I'm getting low/no plasmid DNA after purification using a PureLink HiPure kit, even though there was measurable absorbance. Do you have any suggestions for what I can do?

A common problem encountered with absorbance measurements is turbidity of samples. (This could be caused by residual resin from the column.) If there is insoluble material in the cuvette (not often detected by the naked eye), much of the UV light is not absorbed but scattered, leading to an artificially high UV absorbance reading (at 260 or 280 nm, for example.) If your A260 is high, we recommend that you check the A320 to determine if there is resin in the sample. You can also try to centrifuge or filter (0.2 µm filter) your sample to remove any resin and then recheck the concentration.

I've run out of buffer when using the PureLink HiPure Plasmid Purification Kit (Cat. No. K210018). Can I purchase the buffers separately?

Yes, we would recommend purchasing the PureLink HiPure BAC Buffer Kit (Cat. No. K210018). This kit includes Resuspension Buffer (R3) (250 ml), Lysis Buffer (L7) (250 ml), Precipitation Buffer (N3) (250 ml), and RNase A (20 µg/ml) (5 ml).
You will need to add less RNase A than stated on the bottle label of the R3 buffer in this kit. It says to add 5.6 mL of RNase A. This is the correct amount for the BAC protocol; however, if you are performing standard plasmid isolation, 1.4 mL RNase A should be added.

Plasmid DNA isolated using a PureLink column-based purification kit from an endA+ strain is degraded after a restriction digest. Do you have a suggestion for this?

The HiPure kits should remove all protein from the DNA including endonucleases. For the silica-based PureLink Quick Plasmid Miniprep Kit, we recommend an extra wash with the optional Wash Buffer W10 to remove endonucleases. This solution is not compatible with the HiPure system and should not be used with those kits. Alternatively, heat the eluted DNA in TE for 10 min at 70 degrees C. This should heat-inactivate any contaminating nucleases.

I'm seeing extra bands present after plasmid purification using your PureLink column-based system. What could cause this to happen?

Extra bands can occur when plasmid DNA is nicked and/or permanently denatured. Plasmid DNA that has been nicked (covalently opened) will run slower than supercoiled DNA during electrophoresis. A small amount of this species of DNA is common and is suitable for downstream applications. Permanently denatured DNA will migrate ahead of the supercoiled DNA and may not be suitable for downstream applications. Do not allow the lysis reaction to proceed longer than 5 minutes.

My purified DNA has particles in it after column-based plasmid purification. Any suggestions?

We have seen this on occasion. The particles do not affect quality of the DNA. Remove the particles by performimg a 1 minute centrifugation at 12,000 x g.