Kit de clonación pCR™8/GW/TOPO™ TA, con E. coli TOP10 One Shot™
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Invitrogen™

Kit de clonación pCR™8/GW/TOPO™ TA, con E. coli TOP10 One Shot™

El kit pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning ofrece una clonación sencilla en 5 minutos y acceso a la plataforma de vectores deMás información
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Número de catálogoCantidad
K25002020 reacciones
Número de catálogo K250020
Precio (CLP)
613.862
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Cantidad:
20 reacciones
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El kit pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning ofrece una clonación sencilla en 5 minutos y acceso a la plataforma de vectores de clonación de recombinación Gateway™. Nuestro vector pCR™8 TOPO™ TA contiene un mínimo de MCS, por lo que la secuencia más de su inserción y menos del vector.

Con nuestros sitios att patentados, el vector pCR™8 es la forma más sencilla de crear un clon de entrada, lo que facilita el acceso mediante la clonación de recombinación Gateway™ a una variedad de vectores de expresión sin la tediosa subclonación, lo que supone un valioso ahorro de tiempo de investigación.

El kit pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning ofrece:

• Sitios att para una recombinación rápida en una variedad de vectores de destino Gateway™
• Salientes 3´-T para la ligación directa de productos de PCR amplificados con Taq
• Sitios de primers de secuenciación a 55 bp del sitio de inserción que garantizan más secuenciación de injerto y menos de vector
• Gen de resistencia a la espectinomicina para una sólida selección en E. coli
• Sitios EcoRI que flanquean el sitio de inserción del producto de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para una sencilla escisión de insertos

este kit incluye E. coli químicamente competente One Shot™ TOP10.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Método de clonaciónTOPO™ con Gateway™
N.º de reacciones20 reactions
Línea de productosOne Shot
Tipo de productoKit de clonación de TA
Cantidad20 reacciones
VectorpCR
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
El kit pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning contiene el vector pCR™8/GW/TOPO™ listo para su uso y adaptado a TOPO™, dNTP, solución salina, agua estéril, primers de secuenciación de sentido directo e inverso Gateway, plantilla de control y primers de PCR, E. coli TOP10 químicamente competente One Shot™, E. coli químicamente competente, medio SOC. y un plásmido de control de pUC19. Almacenar la E. coli One Shot™ a -80 °C. Almacene todos los demás componentes a - 20 °C. Se garantiza la estabilidad de todos los reactivos durante 6 meses si se almacenan correctamente.

Preguntas frecuentes

Can I store my competent E. coli in liquid nitrogen?

We do not recommend storing competent E. coli strains in liquid nitrogen as the extreme temperature can be harmful to the cells. Also, the plastic storage vials are not intended to withstand the extreme temperature and may crack or break.

How should I store my competent E. coli?

We recommend storing our competent E. coli strains at -80°C. Storage at warmer temperatures, even for a brief period of time, will significantly decrease transformation efficiency.

Your Gateway-adapted TOPO vectors are supplied with a control template and control primers. Can I obtain the sequence of the control template?

The sequence of the control template is proprietary.

What is the best ratio of insert:vector to use for cloning? Is there an equation to calculate this?

The optimal ratio is 1:1 insert to vector. Optimization can be done using a ratio of 0.5-2 molecules of insert for every molecule of the vector.

Equation:

length of insert (bp)/length of vector (bp) x ng of vector = ng of insert needed for 1:1 insert:vector ratio

Does Platinum Taq DNA Polymerase High Fidelity enzyme mix leave 3' A-overhangs on the PCR product for subsequent cloning into a TOPO TA or original TA vector?

Yes, the enzyme mix leaves 3' A-overhangs on a portion of the PCR products. However, the cloning efficiency is greatly decreased compared to that obtained with Taq polymerase alone. It is recommended to add 3' A-overhangs to the product for TA cloning.