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Invitrogen™

pGlow TOPO™ TA Expression Kit

El kit de expresión pGlow TOPO® TA utiliza el mutante (1) GFP de ciclo 3 como una proteína indicadora paraMás información
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Número de catálogoCantidad
K48300120 reacciones
Número de catálogo K483001
Precio (CLP)
1.411.963
Each
Cantidad:
20 reacciones
Precio (CLP)
1.411.963
Each
El kit de expresión pGlow TOPO® TA utiliza el mutante (1) GFP de ciclo 3 como una proteína indicadora para una actividad transcripcional. GFP de ciclo 3 es ideal para el análisis no invasivo de elementos promotores dentro de células vivas e intactas. La propiedad fluorescente del GFP de ciclo 3 permite la detección in vivo en prácticamente cualquier tipo de célula o especie con el uso de microscopía con conjuntos de filtros de GFP de tipo salvaje o mediante métodos de clasificación de células activadas por fluorescencia.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Tipo de entregaTransfección
Para utilizar con (aplicación)Ensayos con indicador, clone su propio promotor
Tipo de productoKit de expresión TOPO TA
Cantidad20 reacciones
Gen marcadorGFP (ciclo 3)
Agente de selección (eucariótico)Geneticin™ (G-418)
VectorpGlow, vectores TOPO-TA
Método de clonaciónTOPO-TA
Línea de productosTOPO
PromotorNinguno (sin promoción)
Etiqueta de proteínaSin etiquetar
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
El kit de expresión pGlow TOPO™ TA contiene dos cajas. La caja TOPO™ TA Cloning contiene un vector pGlow-TOPO™ linealizado y activado con la topoisomerasa I, dNTP, primers para la secuenciación, una solución salina, y un molde de PCR de control y primers; almacenar a -20 °C. La caja One Shot™ contiene células de E. coli One Shot™ TOP10, medio SOC y un plásmido de control superhelicoidal; almacenar a -80 °C. Se garantiza la estabilidad de los kits durante 6 meses si se almacenan adecuadamente.

Preguntas frecuentes

Can I store my competent E. coli in liquid nitrogen?

We do not recommend storing competent E. coli strains in liquid nitrogen as the extreme temperature can be harmful to the cells. Also, the plastic storage vials are not intended to withstand the extreme temperature and may crack or break.

How should I store my competent E. coli?

We recommend storing our competent E. coli strains at -80°C. Storage at warmer temperatures, even for a brief period of time, will significantly decrease transformation efficiency.

Can I use pBlue- or pGlow-TOPO reporter vectors to evaluate promoter function in E. coli?

pBlue-TOPO contains a cryptic prokaryotic promoter upstream of the lacZ reporter gene, due to which E. coli transformants may appear to be light blue when screened on plates containing X-Gal. Hence, we do not recommend using pBlue-TOPO to evaluate promoter function in E. coli. However, pGlow-TOPO can be used for these studies. Note that background expression of beta-galactosidase from pBlue-TOPO does not occur in mammalian cells.

Do you offer a vector that I could use to do some promoter analysis studies?

Yes, we do offer the pBlue-TOPO and pGlow-TOPO vectors that facilitate cloning of the DNA sequence of interest directly upstream of either the b-galactosidase or Cycle 3 GFP gene, respectively.
pBlue-TOPO is ideal for functional analysis of promoters with low transcriptional activity, since assays for beta-galactosidase are easy to perform and are quantitative at very low levels of expression. pGlow-TOPO is ideal for non-invasive analysis of promoter elements within intact, living cells. The fluorescent property of Cycle 3 GFP allows in vivo detection in virtually any cell type or species using microscopy with wild-type GFP filter sets or by fluorescence-activated cell sorting methods.

Can GFP fluorescence be detected in cells that have been stained for beta-galactosidase?

We recommend looking for GFP fluorescence before staining for beta-galactosidase. This is because the beta-galactosidase staining process produces a very high autofluorescence that will interfere with detection of GFP fluorescence.