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Invitrogen™

DES™-Inducible/Secreted Kit with pCoBlast

El kit inducible/de secreción DES™ proporciona el vector pMT/BiP/V5-His para la expresión inducible y secretada de proteínas recombinantes y unaMás información
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Número de catálogoCantidad
K5130011 kit
Número de catálogo K513001
Precio (CLP)
-
Cantidad:
1 kit
El kit inducible/de secreción DES™ proporciona el vector pMT/BiP/V5-His para la expresión inducible y secretada de proteínas recombinantes y una opción de selección blasticidina (pCoBlast) o higromicina (pCoHygro). Este vector ofrece el promotor de metalotioneína inducible que se induce a la adición de sulfato de cobre o cloruro de cadmio. Se proporciona una secuencia de señal de terminal N del gen BiP de insecto para dirigir la proteína de fusión recombinante a través de la ruta secretora de células S2 en el medio de cultivo. El vector pMT/BiP/V5-His ofrece las siguientes características adicionales:

• Tamaño reducido (3,6 kb) para mejorar la producción del ADN y aumentar la eficacia de la subclonación
• Etiqueta de epítopo C-terminal V5 para la rápida detección con un anticuerpo anti-V5 de Invitrogen
• Etiqueta C-terminal 6xHis para la purificación sencilla de proteínas de fusión recombinantes utilizando una resina quelante del níquel

Para facilitar la clonación, se proporciona un conjunto de tres vectores: A, B y C. Cada vector tiene múltiples sitios de clonación en diferentes marcos de lectura relativos a la secuencia de señal BiP.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Tipo de productoKit inducible/secretado
Posición de la etiqueta de la proteína (a su gen)C-terminal
Cantidad1 kit
VectorpMT
Método de clonaciónGateway
Línea de productosDES
PromotorMT
Etiqueta de proteínaEtiqueta His (6x), Etiqueta de epítopo V5
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
El kit inducible/de secreción DES™ contiene 20 μg de cada vector de selección (pCoHygro or pCoBlast), pMT/BiP/V5-His A, B, C y pMT/BiP/V5-His/GFP, kit de transfección de fosfato cálcico, cebadores directos e inversos (2μg cada uno), medio de Dophroshila de Schneider GIBCO™, células S2 congeladas y el agente de selección apropiado. Almacenar las células S2 en nitrógeno líquido. Conservar el medio y el agente de selección a +4°C. Conservar todos los demás reactivos a -20°C. Se garantiza la estabilidad de todos los componentes durante 6 meses si se almacenan correctamente.

Preguntas frecuentes

What is the doubling time of Drosophila S2 cells?

When grown at the optimal temperature of 27-28ºC, Drosophila S2 cells grow very quickly, with an approximate 14-16 hr doubling time. The cells can also be grown at 22-25ºC with doubling time of 24hrs. Humidity is an issue, so a shallow pan of water can be left in the incubator, but the incubator does not need to be turned on.

Growth medium is also a factor in doubling time - the doubling times listed here are for Sf900 II medium.

The cells can reach maximum densities of 1 to 2.5 x 10E7 cells/ml in shake flask cultures.