Arcturus™ RiboAmp™ PLUS Kit
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Applied Biosystems™

Arcturus™ RiboAmp™ PLUS Kit

El kit de amplificación de ARN ARCTURUS™ RiboAmp™ PLUS permite al investigador realizar análisis moleculares en muestras de ARN queMás información
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Número de catálogoCantidad
KIT050124 muestras
KIT05216 muestras
Número de catálogo KIT0501
Precio (CLP)
-
Cantidad:
24 muestras
El kit de amplificación de ARN ARCTURUS™ RiboAmp™ PLUS permite al investigador realizar análisis moleculares en muestras de ARN que antes se consideraban demasiado pequeñas para el análisis de micromatrices. El kit RiboAmp™ PLUS ofrece una amplificación lineal única desde tan solo 1 ng de ARN total. Mediante un proceso exclusivo para la amplificación lineal de alta eficiencia y alta fidelidad, el ARN mensajero se amplifica hasta 1000 veces en una ronda de síntesis y hasta 1 000 000 de veces en dos rondas. El kit RiboAmp™ PLUS produce ARN antisentido amplificado (ARNa), listo para etiquetado e hibridación de micromatrices o PCR en tiempo real. El kit RiboAmp Plus se puede utilizar para generar resultados biológicamente relevantes con plataformas de matriz de oligonucleótidos y ADNc. También ofrecemos kits RiboAmp™ HS PLUS para cantidades más pequeñas de ARN.

Características principales del producto:
• Alta fidelidad: mantiene los niveles de expresión nativa
• Mayor sensibilidad: detecta ARNm de baja abundancia
• Alta fiabilidad: entrega ARN amplificado reproducible para experimentos de micromatrices
• Aplicación rápida: procesa muestras más rápido
• Especificidad mejorada: revela diferencias en la expresión génica entre tipos de células

Mantiene niveles de expresión nativos
El kit de amplificación de ARN RiboAmp™ PLUS ofrece una amplificación de ARN de alta fidelidad sin precedentes incluso a partir de muestras microscópicas. La comparación de los resultados de micromatrices del ARN celular total y del ARNa amplificado con el kit RiboAmp™ PLUS revela una concordancia muy alta entre genes expresados diferencialmente. Esto demuestra la capacidad del kit RiboAmp™ PLUS para ofrecer la fidelidad de amplificación necesaria para un análisis de datos fiable a partir de muestras pequeñas.

Detecta ARNm de baja abundancia
El kit de amplificación de ARN RiboAmp™ PLUS permite la amplificación de ARNm en todas las clases de abundancia. Mediante RT-PCR, los genes de abundancia baja, media y alta se detectan fácilmente dentro de la población de ARN amplificado. La amplificación de ARNm en todas las clases de abundancia garantiza que se identificarán patrones diferenciales de expresión génica.

Entrega ARN amplificado reproducible para experimentos de micromatrices
El kit de amplificación de ARN RiboAmp™ proporciona sistemáticamente ARNa listo para el etiquetado e hibridación en micromatrices de expresión con una variabilidad mínima de amplificación a amplificación. El análisis de micromatrices de amplificaciones independientes de la misma fuente de ARN muestra una excelente correlación.

Procesamiento de muestras más rápido
El kit RiboAmp™ PLUS incluye reactivos y dispositivos completos para la síntesis de plantillas, la transcripción y la purificación de ácidos nucleicos. Las tediosas concentraciones de vacío se eliminan por completo incorporando químicas optimizadas y utilizando las novedosas columnas de purificación MiraCol™ de alta recuperación de Arcturus. Hay significativamente menos pasos de pipeteo porque la muestra se eluye directamente en los tubos de reacción y los reactivos se dispensan y se mezclan previamente de manera práctica. En una jornada laboral de ocho horas, el kit RiboAmp™ PLUS permite configurar la amplificación, el etiquetado y la hibridación de micromatrices. Con una transcripción in vitro práctica durante la noche, se puede completar una segunda ronda de amplificación a la mañana siguiente.

Revela diferencias en la expresión génica entre tipos de células
El análisis preciso de la expresión génica requiere el análisis de tipos de células específicos sin interferencia de las células circundantes. Comenzar con estas poblaciones de células puras suele significar trabajar con muestras pequeñas. Se necesitan tecnologías especiales para superar los desafíos de manipular estas valiosas muestras. La combinación de LCM, amplificación de ARN y análisis de micromatrices revela una expresión génica diferencial entre tipos de células.

Sistemas integrados para Microgenomics
El sistema completo Arcturus™ para Microgenomics™ ofrece una solución integrada para preparar pequeñas cantidades de ARN para el análisis de expresión génica. El sistema cuenta con el instrumento de microdisección por captura láser (LCM) ArcturusXT™ para obtener poblaciones de células puras, el kit de aislamiento de ARN PicoPure™ para extraer y purificar ARN y el kit RiboAmp™ PLUS para la amplificación lineal de ARN. Los sistemas de Arcturus para Microgenomics permiten ensayos de micromatrices precisos y sensibles que revelan moléculas que de otro modo se ocultarían en muestras de tejido completo o mezclas de células.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Especificaciones
Para utilizar con (aplicación)Microarray Analysis, Real-Time Quantitative PCR (qPCR)
Para utilizar con (equipo)ArcturusXT™ LCM Instrument
IncluyeAmplification Purification Kit (Purification Reagents and Columns), cDNA Synthesis Kit, In vitro Transcription (IVT) Kit
Etiqueta o tinteUnlabeled
Línea de productosARCTURUS, RiboAmp
Cantidad24 muestras
Transcriptasa inversaNot Included
Tipo de muestraAny Tissue Type, Cell Cultures, LCM Samples
TipoPLUS Kit
Paso del flujo de trabajoReverse Transcription, In Vitro Transcription, RNA Amplification
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
cDNA synthesis kit, in vitro transcription (IVT) kit, amplification purification kit (purification reagents and columns). Variable storage conditions

Preguntas frecuentes

What is the typical size range of amplified RNA?

A single round of amplification yields product sizes ranging from 200 bases to 6 kb. The majority of these products are approximately 1.5 kb in length. A second round of amplification will result in shorter products. We recommend using an Agilent 2100 bioanalyzer to visualize these products. Amplification products can be visualized by agarose gel electrophoresis; they will migrate as a smear. Although this data is still useful, it is less informative than bioanalyzer analysis.

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Why is RNA amplification necessary?

Glass microarray analysis experiments typically require 5-20 µg of total RNA per slide for sample labeling and hybridization. Thus, microarray-based gene expression analysis of very small samples [laser capture microdissection (LCM), tissue biopsies, or other clinical samples] is difficult due to the very low amounts of total RNA recovered from the samples. Linear amplification of RNA from small samples produces sufficient quantities of RNA for sample labeling and hybridization. Since the amplification technique is highly reproducible and maintains representation of the gene expression in the original sample, it is recommended for probe synthesis by most manufacturers of commercially available microarrays.

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How is fold amplification calculated?

RNA amplification using the Van Gelder and Eberwine technique (Van Gelder 1990) utilizes an oligo(dT) primer containing the T7 RNA polymerase promoter for synthesis of first strand cDNA. The poly(A) tail at the end of mRNA sequences serves as the substrate for the binding of these primers. Since mRNA typically constitutes only 1-5% of the total RNA in the cell, only this fraction of the total RNA is amplified. The tissue type, its developmental state, and its health all influence the actual proportion of mRNA in a total RNA sample. Total RNA from brain, testes, and embryonic tissues may contain up to 4% mRNA, while RNA from many other tissues will have only 1% or less mRNA. The RNA isolation method can also influence mRNA content. The generally accepted average value for mRNA content is about 2% of a total RNA sample. When 1 µg of total RNA, 2% or 20 ng of which is mRNA, is amplified 1000-fold, yields of 20 µg aRNA (or cRNA) should be expected. You may observe higher fold amplification when starting with lower amounts of total RNA. This is because, in an in vitro transcription (IVT) reaction, a finite amount of RNA can be synthesized with the fixed amount of NTPs. When starting with less RNA, NTPs do not become limiting until the RNA is amplified beyond the typical 1000-2000 fold amplification levels seen with higher amounts of input RNA.

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How do I locate the overview image on the Arcturus XT LCM Instrument?

First, optimize the visualization of the image in the live video at 2X by increasing or decreasing the brightness setting, then right-click on the overview image and select "remember settings". This resets your optimized image settings, and when you select "re-acquire overview image" you will now generate a perfectly exposed overview image.

With the ArcturusXT LCM Instrument, which laser should I use to isolate my region of interest? UV cutting laser or IR capture laser?

For a few cells: The gentle IR-only approach is the best recommendation for preserving nucleic acids and verifying that the desired material is collected on the cap. For groups of cells or large tumor regions: Mount your tissue on a membrane slide and take advantage of the power of the IR, or IR + UV cutting laser to cut around your region of interest quickly and cleanly.