Solución de parada para los sustratos de TMB

La solución de parada es ácido sulfúrico 0,16 M que se utiliza con el sustrato de ELISA 3,3’,5,5’- tetrametilbencidina (TMB). En presencia de conjugados enzimáticos de peroxidasa de rábano picante (HRP), la TMB y el peróxido reaccionan para producir un subproducto azul con una absorbancia máxima a 605 nm. La intensidad del color es proporcional a la cantidad de actividad de HRP, que a su vez está relacionada con los niveles de analito objetivo en un procedimiento ELISA optimizado. La adición de solución de parada de ácido sulfúrico cambia el color a amarillo (absorbancia máxima a 450 nm), estabilizando el desarrollo de color para permitir una medición exacta de la intensidad a 450 nm mediante un espectrofotómetro o un lector de placas.

Características de la solución de parada:

• Tamaño: 55 ml (suficiente para unas cinco microplacas de 96 pocillos)
• Almacenamiento: Se envía a temperatura ambiente Almacenar a temperatura ambiente o a 2-8 °C.
• Aplicación: ELISA: Tras la incubación con TMB, añada una cantidad de solución de parada igual a la cantidad de sustrato TMB añadida a cada pocillo de la placa de ELISA (normalmente de 50–100 µl por pocillo). Utilícelo a plena potencia.