pHrodo™ Red Avidin (Fluorogenic pH Sensor)

pHrodo™ Red Avidin es un conjugado de avidina y tinte pHrodo™ Red, un tinte nuevo y fluorogénico que aumenta dramáticamente la fluorescencia a medida que el pH de su entorno se vuelve más ácido. Los conjugados de tinte pHrodo™ Red no son fluorescentes fuera de la célula, pero presentan una fluorescencia brillante de color rojo en los fagosomas, lo que los convierte en herramientas ideales para estudios que van desde la fagocitosis de las biopartículas hasta la internalización de los receptores. El tinte original pHrodo™ y pHrodo™ Red son la misma molécula.

Con el sensor de pH fluorogénico pHrodo™ Red Avidin obtiene:
• Detección específica de la fagocitosis y la endocitosis
• Tinción más rápida
• Resultados más precisos en experimentos sensibles
• Capacidad de multiplexación con colorantes verdes
• Validación en citometría de flujo, adquisición de imágenes, HTS y HCS

Obtenga mejores resultados en los estudios de endocitosis
La endocitosis y la fagocitosis subyacen a eventos fisiológicos que van desde la respuesta huésped-patógeno hasta la desensibilización de los receptores a través de la internalización, como es común en la clase de receptores GPCR. Una vez internalizado, el material puede acidificarse en endosomas o lisososomas. Nuestra sonda sensible al pH fluorogénico del tinte pHrodo™ Red, cuando se conjuga con moléculas objetivo, permite la monitorización visual directa del material que entra en estos compartimentos ácidos. En valores de pH neutro y básico, la emisión de tinte pHrodo™ Red es mínima; con acidificación, la emisión de tinte pHrodo™ Red se incrementa hasta 8 veces (a pH 4). La fluorescencia roja de la avidina pHrodo™ Red es ideal para aplicaciones de multiplexado con compuestos fluorescentes verdes como GFP, Fluo-4 o calceína.

Tinción más rápida y precisa en múltiples aplicaciones validadas
La avidina pHrodo™ Red ofrece una menor variabilidad de la señal y una mejor temporización en comparación con los colorantes radiométricos como el BCECF y el SNARF, y la falta de fluorescencia fuera de la célula elimina la necesidad de pasos de lavado y colorantes absorbidos. La fluorescencia del tinte pHrodo™ Red se atenúa en medios completos y sangre completa, lo que mejora aún más la relación señal-ruido. pHrodo™ Red se ha citado en más de 150 publicaciones y se valida en citometría de flujo, detección de alto rendimiento (HTS), detección de alto contenido (HCS) y otras aplicaciones de adquisición de imágenes.

La biotinilación fácil le permite disfrutar de la flexibilidad en el diseño experimental
El reactivo pHrodo™ Red Avidin puede acoplarse rápidamente a cualquier reactivo biotinilado, incluyendo muchos de nuestros propios conjugados de biotina de anticuerpos, proteínas y toxinas, incluyendo transferrina, factor de crecimiento epidérmico (EGF) y toxina del cólera. También puede crear su propio objetivo biotinilado utilizando la química Click-iT™ para incorporar metabólicamente una biotina alquina o utilizando cualquiera de nuestros kits de etiquetado de biotina.

Química de conjugación alternativa a pHrodo™ SE
En los casos en que los conjugados de pHrodo-SE reactivos a aminas muestren pérdida de función reducida o completa, se puede considerar la conjugación de biotina y avidina utilizando pHrodo™ Red Avidin. En un ejemplo, pHrodo-EGF se creó utilizando el enfoque de avidina-biotina y se demostró que se une a su receptor y se internaliza (ref. 1).

Para uso exclusivo en investigación. No está diseñado para un uso terapéutico ni de diagnóstico en animales o humanos.

Referencia:

1. Suprynowicz FA, Krawczyk E, Hebert JD, Sudarshan SR, Simic V, Kamonjoh CM, Schlegel R. The human papillomavirus type 16 E5 oncoprotein inhibits epidermal growth factor trafficking independently of endosome acidification. J Virol. 2010 Oct;84(20):10619-29. PubMed PMID: 20686024