Flp-In™-CHO Cell Line
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Invitrogen™

Flp-In™-CHO Cell Line

Las líneas celulares Flp-In™ están diseñadas para la generación rápida de líneas celulares estables que expresan una proteína de interésMás información
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Número de catálogoCantidad
R75807
también denominado R758-07
1 mL
Número de catálogo R75807
también denominado R758-07
Precio (CLP)
-
Cantidad:
1 mL
Las líneas celulares Flp-In™ están diseñadas para la generación rápida de líneas celulares estables que expresan una proteína de interés a partir de un vector de expresión Flp-In™. Estas células contienen un solo sitio de FRT integrado de forma estable en un locus genómico activo transcripcionalmente. La integración selectiva del vector de expresión de Flp-In™ garantiza la expresión de alto nivel del gen de interés. Hay seis líneas celulares Flp-In™ disponibles para la generación de líneas celulares estables isogénicas y una línea celular T-REx™ Flp-In™ para la generación de líneas celulares estables reguladas por tetraciclina. Las líneas celulares Flp-In™-CV-1, Flp-In™-293, Flp-In™-BHK, Flp-In™-Jurkat y Flp-In™-3T3 se crearon mediante la transfección de las líneas de células madre con pFRT/lacZeo y la selección de clones estables resistentes a Zeocin™. La línea celular Flp-In™-CHO se creó mediante la transfección de las células CHO con pFRT/lacZeo2 y la selección de clones estables resistentes a Zeocin™. La línea celular Flp-In™ T-REx™-293 contiene pFRT/lacZeo y pcDNA™6/TR (del sistema T-REx™) integrado de forma estable. La cotransfección de las líneas celulares Flp-In™ con un vector de expresión Flp-In™ y el vector de recombinada Flp, pOG44, da como resultado la integración selectiva del vector de expresión en el mismo locus en cada célula, asegurando niveles homogéneos de expresión génica.

Elección de Flp-In™ Combinación de línea celular/vector
Las líneas celulares Flp-In™-CV-1, Flp-In™-293, Flp-In™-CHO y Flp-In™-Jurkat (Figura 1) funcionan bien con los vectores Flp-In™ que expresan un gen de un promotor CMV (pcDNA™5/FRT, pcDNA5/FRT/V5-His-TOPO™ y pSecTag/FRT/V5-His-TOPO™). Las Flp-In™-BHK y Flp-In™-3T3 tienden a regular el promotor del CMV. Por lo tanto, se recomienda que los vectores Flp-In™ que contengan el promotor EF-1α (pEF5/FRT/V5-DEST™ y pEF5/FRT/V5-D-TOPO™) se usen con estas líneas celulares.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Línea de célulasLínea celular Flp-In™-CHO
Cantidad1 mL
EspecieHámster
Línea de productosFlp-In
Etiqueta de proteínapSec
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
3 x 106 células se suministran congeladas en 1 ml de 90 % de medio completo y 10 % de DMSO. Las células deben almacenarse en nitrógeno líquido. Se garantiza la estabilidad de todas las células durante 6 meses si se almacenan adecuadamente.

Preguntas frecuentes

Is multiple integration of the Flp-In expression construct possible? How do you screen for multiple integrants, and how stable is the Flp-In expression cell line?

In theory, one can get multiple integrations of the Flp-In expression construct—an FRT-specific integration event and a random, second-site integration. However, random integration is a relatively uncommon event. Limiting the amount of DNA in the transfection will reduce the chance of second-site integration. We have transfected 293 cells (lacking the FRT site) with the pcDNA5/FRT vector and have identified one potential second-site integrant after screening over 200 clones. DNA integrations can be detected by Southern blot. A single integrant will display a single band; double: two; triple: three, etc. We have maintained a number of Flp-In expression cell lines for over four months and have not observed any loss of the Flp-In expression construct, whether hygromycin selection was maintained or not.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Expression Support Center.

What kind of Flp-In T-REx cell lines do you offer?

We offer the Flp-In T-REx system that contains pFRT/lacZeo and pcDNA6/TR stably integrated into HEK 293 cells. This cell line has been functionally tested for its ability to regulate expression.

Citations & References (8)

Citations & References
Abstract
Detection of anti-type 3 muscarinic acetylcholine receptor autoantibodies in the sera of Sjögren's syndrome patients by use of a transfected cell line assay.
Authors:Gao J, Cha S, Jonsson R, Opalko J, Peck AB,
Journal:Arthritis Rheum
PubMed ID:15334476
'OBJECTIVE: Sjögren''s syndrome (SS) is an autoimmune disease affecting primarily the salivary and lacrimal glands, leading to dry mouth and dry eyes. Recent studies have suggested that autoantibodies reactive with the type 3 muscarinic acetylcholine receptors (M3Rs) expressed on salivary and lacrimal gland cells may be highly specific for SS. ... More
The macrophage scavenger receptor CD163: endocytic properties of cytoplasmic tail variants.
Authors:Nielsen MJ, Madsen M, Møller HJ, Moestrup SK,
Journal:J Leukoc Biol
PubMed ID:16434690
'CD163 is the monocyte/macrophage-specific receptor for haptoglobin-hemoglobin (Hp-Hb) complexes. The cytoplasmic tail of human CD163 exists as a short tail variant and two long tail variants. Reverse transcriptase-polymerase chain reaction analysis indicated that all three CD163 variants are substantially expressed in blood, liver, and spleen, and the short tail variant ... More
Effect of genetic variation on human cytochrome p450 reductase-mediated paraquat cytotoxicity.
Authors:Han JF, Wang SL, He XY, Liu CY, Hong JY,
Journal:Toxicol Sci
PubMed ID:16495354
Paraquat (1,1'-dimethyl-4,4'-bipyridylium dichloride) is a widely used herbicide and is highly toxic to human and animals. The mechanisms of paraquat toxicity involve the generation of superoxide anion through the process of redox cycling. NADPH-cytochrome P450 oxidoreductase (POR) has been reported to be a major enzyme for one-electron reduction of paraquat ... More
The missense genetic polymorphisms of human CYP2A13: functional significance in carcinogen activation and identification of a null allelic variant.
Authors:Wang SL, He XY, Shen J, Wang JS, Hong JY,
Journal:Toxicol Sci
PubMed ID:16917071
Cytochrome P450 2A13 (CYP2A13), an enzyme predominantly expressed in human respiratory tissues, is highly efficient for the metabolic activation of two suspected human lung carcinogens 4-(methylnitrosamino)-1-(3-pyridyl)-1-butanone (NNK) and aflatoxin B1 (AFB1). Functional genetic polymorphisms of CYP2A13 may therefore be an important factor in human susceptibility to related lung cancers. Among ... More
Targeting of the dual oxidase 2 N-terminal region to the plasma membrane.
Authors:Morand S, Agnandji D, Noel-Hudson MS, Nicolas V, Buisson S, Macon-Lemaitre L, Gnidehou S, Kaniewski J, Ohayon R, Virion A, Dupuy C,
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:15150274
Dual oxidase 2 (Duox2) is a cell surface glycoprotein that probably provides thyroperoxidase with the H2O2 required to catalyze thyroid hormone synthesis. No functional H2O2-generating system has yet been obtained after transfecting Duox2 into non-thyroid cell lines, because it is retained in the endoplasmic reticulum (ER). We investigated the level ... More
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