Tinción de ácidos nucleicos SYTOX™ Deep Red, para células fijas/muertas

La tinción de ácidos nucleicos SYTOX Deep Red es una tinción de ácido nucleico de alta afinidad que penetra fácilmente en las células con membranas plasmáticas comprometidas y, sin embargo, no traspasa las membranas de las células vivas. Con una tinción citoplasmática mínima, la tinción SYTOX Deep Red es particularmente útil en experimentos de inmunocitoquímica (ICC), inmunohistoquímica (IHC) e inmunofluorescencia (IF) para la tinción de núcleos de células fijas. Después de una breve incubación con la tinción SYTOX Deep Red, los ácidos nucleicos de células muertas o fijas producen fluorescencia en rojo brillante e intenso/rojo lejano y pueden ser detectados con un conjunto de filtros estándar CY5/Deep Red o configuración láser.

Las características de la tinción de ácidos nucleicos SYTOX Deep Red incluyen:
• Impermeable para células vivas; permeable para células muertas o fijas
• Pico de excitación/emisión: 660/682 nm
• Uso con el conjunto de filtros tradicional Cy5 o la línea láser 647
• Funciona con células de mamíferos en cultivos celulares monocapa o 3D, tejido animal y bacterias
• Detectable con micro¬scopios de fluorescencia, fluorímetros, lectores de microplacas de fluorescencia y citómetros de flujo

La tinción de ácidos nucleicos SYTOX Deep Red es multiplexable con fluoróforos azules, verdes, naranjas, rojos y cercanos al infrarrojo, cuando se utilizan configuraciones de filtro fluorescente/láser compatibles. La tinción SYTOX Deep Red muestra una mayor fluorescencia con concentraciones crecientes de ADNbc, pero no muestra mucha afinidad con ARN o ADNmc. Tiene una señal inicial brillante y una excelente estabilidad fotográfica en un experimento típico de adquisición de imágenes. Estas propiedades hacen de la tinción SYTOX Deep Red una tinción simple y cuantitativa de marcado del núcleo de células muertas/fijas en un solo paso para su uso con micro¬scopios de fluorescencia, fluorímetros, lectores de microplacas de fluorescencia y citómetros de flujo.

La tinciones de ácidos nucleicos SYTOX Deep Red se había utilizado con éxito en células monocapa, tejido en cortes finos, tejido en cortes gruesos, cultivos celulares/esferoides en 3D y bacterias. Se suministra a una concentración de 1 mm en DMSO (concentración ∼2000X). Se recomienda una concentración de 0,5 µm (1X) para la mayoría de las aplicaciones y tipos de células. En la adquisición de imágenes fluorescentes de varias células de mamíferos, se ha utilizado un intervalo de concentración de 2,5 µm a 0,25 µm. Para las pruebas de viabilidad por citometría de flujo, se ha utilizado una concentración de 1 µm a 10 nm para las células Jurkat y se ha utilizado un intervalo de 4 µm a 0,5 µm con E. coli.