Luc-Screen™ Extended-Glow Luciferase Reporter Gene Assay System
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Luc-Screen™ Extended-Glow Luciferase Reporter Gene Assay System

El sistema de ensayo Luc-Screen™ con emisión de luz de brillo extendido está diseñado para la detección sensible de laMás información
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Número de catálogoCantidad
T10331000 ensayos
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Número de catálogo T1033
Precio (CLP)
-
Cantidad:
1000 ensayos
Pedido a granel o personalizado
El sistema de ensayo Luc-Screen™ con emisión de luz de brillo extendido está diseñado para la detección sensible de la enzima indicadora de luciferasa luciérnaga en cultivos celulares de microplacas. Con el ensayo Luc-Screen™ se obtiene una señal lineal de 50 fg a 100 ng de enzima pura en medio de cultivo.

• El formato de ensayo homogéneo permite la detección la luciferasa luciérnaga en presencia de medios de cultivo normales sin la eliminación de medios y sin un paso adicional de lisis celular, lo que crea el procedimiento de ensayo más fácil y más racionalizado posible.
• La cinética del ensayo luminiscente proporciona una «ventana» durante la cual se pueden realizar mediciones, facilitando las aplicaciones de HTS donde se utiliza la automatización del ensayo.
• El amplio rango dinámico del ensayo de luciferasa luciérnaga permite al usuario medir el nivel enzimático con precisión desde femtogramos hasta nanogramos.
• La sensibilidad del ensayo es de 100 a 1000 veces mejor que con los ensayos isotópicos⁄no isotópicos para cloranfenicol acetil transferasa (CAT) o los ensayos colorimétricos⁄fluorescentes para b-galactosidasa, lo que proporciona mayor sensibilidad que las tecnologías de ensayo de la competencia.
• El ensayo de alta sensibilidad con un amplio rango dinámico permite la detección de niveles altos y bajos de indicador sin realizar numerosas diluciones de la muestra.
• El kit de ensayo de genes indicadores no radioactivos elimina los radioisótopos.
• El ensayo se puede completar en aproximadamente una hora, lo que proporciona una respuesta rápida del ensayo.

Sensible
La luciferasa es un indicador ideal debido a la alta sensibilidad de la detección y la ausencia de actividad de la luciferasa endógena en células de mamíferos. El ensayo Luc-Screen™ combina convenientemente la lisis celular en pocillos en presencia de medio de cultivo con un ensayo de alta sensibilidad que muestra cinética de emisión de luz de brillo prolongado. La señal de luz se puede medir entre 10 minutos y varias horas después de añadir los reactivos del ensayo, lo que proporciona una gran flexibilidad en el tiempo entre la adición y la medición del reactivo.

Alto rendimiento
El sistema Luc-Screen™ está diseñado para ofrecer la máxima flexibilidad de ensayo en un formato de alto rendimiento y se puede utilizar en luminómetros sin inyectores automáticos. El sistema Luc-Screen™ está formulado para proporcionar un ensayo de luciferasa cómodo y fácil de usar, optimizado para su uso en pruebas de detección de alto rendimiento. La alta sensibilidad del ensayo Luc-Screen™ va acompañada de un amplio rango dinámico.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
ensayoEnsayo de luciferasa
Células compatiblesCélulas de mamíferos
Método de detecciónQuimioluminiscente
Para utilizar con (aplicación)Ensayo de enzimas
Para utilizar con (equipo)Luminómetro (microplaca)
FormularioLíquido
Compatibilidad de alto rendimientoCompatible con alto rendimiento
Línea de productosLuc-Screen, NovaBright
Tipo de productoKit de ensayo de gen indicador de luciferasa
Cantidad1000 ensayos
Presentación de datosExtremo
Tipo de muestraCultivos celulares
SustratoLuciferina
Propiedades de sustratoSustrato químico
Tipo de sustratoSustrato de luciferasa
Enzima dianaLuciferasa
Unit Size1,000 assays
Contenido y almacenamiento
Este kit contiene dos tampones de reacción.
Almacenar el producto a -20 °C.

Preguntas frecuentes

Does serum concentration have an inhibitory effect on the luciferase assay?

For Fetal Bovine Serum (FBS), there is no difference between 10% and 5% FBS. It is worthwhile to note that the type of serum does affect the luciferase assay. We tested the effect of 6 different types of sera (FBS, heat-inactivated FBS, dialyzed FBS, charcoal-treated FBS, donor adult bovine serum, and donor equine serum) on secreted luciferases, e.g. Gaussia, Gaussia-Dura, and Cypridina Luciferases. No noticeable difference was observed among different types of sera except for donor adult bovine serum. Unknown factors in donor adult bovine serum caused up to 35% inhibition in secreted luciferase activity. Therefore, we don’t recommend using donor adult bovine serum for Gaussia, Gaussia-Dura, and Cypridina Luciferases.

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I used a white plate to read the luciferase assay and have very high background readings. Should I use a black plate?

The problems with white plates are related to cross-talk blocking, surface reflectivity and tendency to phosphorescence. We do not recommend using white plates because they give much higher background even if adapted to darkness for 10 minutes. The white plastic does not block the light completely, and some portion of the signal will go through the plastic and will be seen when you measure adjacent wells. The typical situation is if you change from black to white plates, where the background is about doubled and the signal is increased about 10 times. Black plates are recommend for best signal to noise ratio even though the RLU values will be lower. 

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What is the stability of the secreted luciferase?

Gaussia, Gaussia-Dura, and Cypridina Luciferase are stable in the culture media for greater than 24 hours. Generally, after transfection of CMV driven constructs, we see ever increasing secreted signal between 24 and 72 hours.

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How quickly is luciferase secreted?

The earliest detectable signal will depend on the strength of the promoter. In general, with a strong promoter (such as CMV), significant signal over background can be seen in as little as 20 minutes. However, with a weaker inducible promoter, significant signal over background may take 1-2 hours after induction.

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What instrument filters are required to read the luciferase assays?

We always recommend the luciferases to be read without filters for single luciferase assays. Use of filters reduces the amount of signal captured that may lead to decrease in sensitivity. Filters are required only for dual-spectral assays.

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