Pierce™ NHS-Activated Agarose Slurry

Thermo Scientific Pierce NHS-aktivierte Agarose-Aufschlämmung ist ein hochwertiges, aminreaktive Agarose-Harz-Beads für die schnelle und stabile Immobilisierung von Proteinen, Peptiden und anderen Liganden über primäre Amine.

Merkmale von NHS-Activated Agarose:

• Einfach zu verwenden— Immobilisieren in einer einfachen Reaktion in einem Schritt bei minimaler Bedienerintervention
• Schnell und effizient— mehr als 85 % Kopplung für die meisten Proteine innerhalb von 30 Minuten
• Innovatives Format —die trockene Agarose konzentriert die Probe, wodurch sie ideal für die Immobilisierung verdünnter Proteine geeignet ist
• Sicher— keine gefährlichen Chemikalien erforderlich (z. B. Natriumcyanoborohydrid, Cyanogen-Bromid)
• Vielseitig— Affinitätsharz ist an Säulen- und Chargenaffinitätschromatographietechniken und FPLC-Anwendungen anpassbar
• Kompatibel— mit jeder primären aminhaltigen Verbindung zu verwenden
• Wiederverwendbar— durch die lecksichere Chemie können Sie das Affinitätsharz wiederverwenden
• Hohes Bindungsvermögen— Bindungsvermögen von >30 mg/ml (Trockenharz)

Die NHS-aktivierte Agarose ist ein vernetztes 6 %-Agarose-Harz in Beadform, das funktionelle Gruppen von N-Hydroxysuccinimid (NHS) enthält. Das aktivierte Harz reagiert mit primären Aminen und bildet stabile Amidverbindungen, die Antikörper oder andere Proteine kovalent immobilisieren und in Affinitätsreinigungsverfahren eingesetzt werden können. Pierce NHS-aktivierte Agarose hat eine Kopplungskapazität von mehr als 30 mg/ml für die Aufschlämmung.

Anwendungen:
• Schnelle Immobilisierung von Ziege-Anti-Maus- und Anti-Kaninchen-Antikörpern zur Reinigung von IgG, das in Tieren oder Hybridomen produziert wird.
• Massenimmobilisierung von Protein A zur Aufreinigung monoklonaler Antikörper
• Immobilisierung von Liganden zur Aufreinigung rekombinanter Proteine

Pierce NHS-aktiviertes Agarose-Harz verwendet zuverlässige NHS-Ester-Chemie und benötigt keine gefährlichen Chemikalien zur Immobilisierung. Andere aminreaktive Träger, wie z.B. periodatoxidierte Harze, müssen mit dem toxischen Natriumcyanoborhydrid behandelt werden, um die Reaktionsbindung an die primären Amine zu stabilisieren; darüber hinaus beläuft sich der Zeitaufwand auf 4 bis 6 Stunden. Auch herkömmliche Methoden, z. B. mit Bromcyan-aktivierten Trägern, können zur Aminkopplung eingesetzt werden; allerdings ist diese Chemie mit nicht spezifischen Bindungen und konstanter langsamer Leckage des gekoppelten Liganden verbunden. Die Reaktionen mit Pierce NHS-aktivierter Agarose sind in weniger als einer Stunde abgeschlossen und führen zu deutlich stabileren Verbindungen.

Die NHS-Activated Agarose-Kopplungsreaktion wird in einem aminfreien Puffer bei einem pH-Wert von 7 bis 9 durchgeführt. Der Wirkungsgrad der Proteinkopplung liegt in der Regel über 80%, unabhängig von dem Molekulargewicht oder vom isolektrischen pl. Nach Immobilisierung eines Liganden kann das dermaßen präparierte Harz mehrfach für Protein-Affinitätsreinigungsverfahren eingesetzt werden. Die vernetzte Agarose in Beadform hat ein schnelles lineares Flusspotenzial und ist daher für Anwendungen mit Schwerkraftfluss und niedrigem bis mittlerem Druck nützlich.

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