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Annexin-V-Konjugate für die Apoptose-Detektion
Zitierungen und Referenzen (21)
Invitrogen™

Annexin-V-Konjugate für die Apoptose-Detektion

Erkennen Sie frühe Phasen der Apoptose mittels Durchflusszytometrie mit dem eigenständigen Alexa Fluor, APC, Pacific Blue, PE, FITC und Biotin-Konjugaten.
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KatalognummerAnregung/EmissionDurchflusszytometer-LaserlinienKonjugat
A35111565/578488, 532, 561PE
A13201495/519488Alexa Fluor 488
A13199494/518488FITC
A13202578/603532, 561Alexa Fluor 568
A13203590/617532Alexa Fluor 594
A13204Biotin-X
A23202346/442UVAlexa Fluor 350
A23204650/665633-637Alexa Fluor 647
A35108555/565532, 561Alexa Fluor 555
A35109679/702633-637Alexa Fluor 680
A35110650/660633-637APC (Allophycocyanin)
A35122410/455405Pacific Blue
Katalognummer A35111
Preis (EUR)
664,00
Each
Anregung/Emission:
565/578
Durchflusszytometer-Laserlinien:
488, 532, 561
Konjugat:
PE
Preis (EUR)
664,00
Each
Erzielen Sie eine schnelle und zuverlässige Erkennung von früher Zellapoptose mit den eigenständigen Annexin V-Konjugaten für die Apoptose-Erkennung. Annexin V-Konjugate bieten mittels Durchfluss-Zytometrie einen bis zu 100-fachen Unterschied für die fluoreszenzbasierte Signalintensität zwischen apoptotischen und nicht apoptotischen Zellen.
Annexin V hat eine hohe Affinität zu Phosphatidylserin (PS), die sich auf der äußeren Schicht von sich einer Apoptose unterziehenden Zellen zeigt. Aufgrund dieser Affinität werden fluoreszierend markierte Annexion V-Reagenzien häufig in der Apoptose-Forschung verwendet.

Annexin V-Konjugate bieten schnelle und zuverlässige Nachweismethoden für die Untersuchung der Externalisierung von Phosphatidylserin, einem Indikator für Zwischenstufen der Apoptose. Der Unterschied in der Fluoreszenzintensität zwischen apoptotischen und nicht apoptotischen Zellen, die mit unseren fluoreszierenden Annexin V-Konjugaten gefärbt wurden, beträgt typischerweise etwa das 100-fache und wird mittels Durchflusszytometrie gemessen.

In Zusammenarbeit mit Nexins Research BV bieten wir die besten und hellsten Annexin V-Konjugate auf dem Markt, einschließlich der Annexin V-Konjugate Alexa Fluor 350, 488, 555, 568, 594, 647 und 680 sowie Annexin V-APC-, Biotin-X-, FITC-, Pacific Blue- und PE-Konjugaten. Stark fluoreszierende Annexin V-Konjugate ermöglichen schnelle und zuverlässige Erkennungsmethoden für die Untersuchung der Externalisierung von Phosphatidylserin, einem der ältesten Indikatoren der Apoptose.

Das Annexin V, Pacific Blue Konjugat ist durch Violett anregbar und eignet sich daher ideal für Geräte mit violettem Laser und für mehrfarbige Experimente, in denen grün- oder rot-fluoreszierende Farbstoffe verwendet werden.

Die Vorteile unserer Annexin V-Konjugate sind:
• Konjugiert mit Invitrogen Alexa Fluor und eFluor-Färbemitteln für leuchtendere Signale
• Konjugiert für alle verfügbaren Laser
• Erhältlich als eigenständige Reagenzien oder in Form einfach zu bedienender Kits

Eine Färbung mit Annexin V zum Nachweis apoptotischer Zellen kann nur an lebenden Zellen und Gewebe vorgenommen werden. Wenn Proben nach dem Färben fixiert werden sollen, sind spezifische Bedingungen erforderlich, um eine transiente Signalretention zu erreichen. Dazu gehören die Verwendung eines alkoholfreien Fixierverfahrens auf Aldehydbasis, die Verwendung von Puffern, die Ca2+ enthalten, und die Vermeidung von Tensiden/Detergenzien. Für Ihren Komfort bieten wir auch einen konzentrierten Puffer zur Bindung von Annexin an. Dieser erleichert die Bindung von Annexin V mit Phosphatidylserin in Apoptose-Assays.

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
FarbeRot
BeschreibungAnnexin V, PE-Konjugat (R-PE Annexin V) (ersetzt Annexin-Produkt Annexin V04)
Anregung/Emission565/578
Durchflusszytometer-Laserlinien488, 532, 561
Zur Verwendung mit (Geräte)Durchflusszytometer
FormLösung
KitinhaltEnthält 1 Fläschchen Annexin V, R-PE-Konjugat.
Anzahl Reaktionen50
ProdukttypAnnexin V-Konjugat
Menge250 μL
VersandbedingungNasseis
KonjugatPE
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Im Kühlschrank (2  bis 8 °C) aufbewahren und vor Licht schützen.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

I trypsinized my adherent cells and labeled with annexin V, and now my flow data is showing a high percentage of apoptotic cells even for control, untreated cells. What is the problem?

Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. Allow the cells to recover for about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium after trypsinizing/scraping so that they can recover their membrane integrity before staining. For lightly adherent cell lines, such as HeLa and NIH 3T3, another option is to use non-enzyme treatments like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can I detect annexin V staining in an imaging assay?

Annexin V staining is not typically used in imaging experiments; it is a better reagent for flow cytometry analysis. All cells will stain to some extent, so it can be difficult to distinguish a relatively bright annexin V-stained cell from a dimmer non-apoptotic cell. Caspase activation, detected using our CellEvent Caspase 3/7 or Image-iT LIVE Caspase detection kits, is a better method for detecting apoptosis in an imaging assay.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

When should I stain adherent cells with annexin V for flow cytometric analysis? Before or after I trypsinize them?

Trypsinize first and then allow the cells to recover about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium before staining with annexin V conjugates. Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing for annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. For lightly adherent cell lines such as HeLa and NIH 3T3, you could use a less harsh (non-enzymatic) dissociation product like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can I fix my cells after annexin V staining?

Yes, this is possible. We have established protocols for annexin V staining combined with intracellular staining of lymphocytes that can be found here. The most important step is to leave some binding buffer in the suspension when fixation is started. Compared to staining of live cells, the intensity of the annexin V signal may be somewhat reduced.

I am trying to label adherent cells with annexin V and am finding that everything is getting labeled. How can I fix this?

Treating cells with trypsin or other reagents to detach adherent cells causes damage to the membrane, such that cells will be labeled with annexin V. The best way to avoid this problem is to allow your cells to recover for 30-45 min in the incubator. Swirl the tube/plate/flask every few minutes to prevent re-attachment. After this recovery period, you can label your cells with annexin V and analyze by flow cytometry.

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Zitierungen und Referenzen (21)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Human fetal retinal pigment epithelial cells induce apoptosis in the T-cell line Jurkat.
Authors:Farrokh-Siar L, Rezai KA, Semnani RT, Patel SC, Ernest JT, Peterson EJ, Koretzky GA, van Seventer GA
Journal:Invest Ophthalmol Vis Sci
PubMed ID:10359333
'PURPOSE: To investigate the mechanism(s) involved in human fetal retinal pigment epithelium (HFRPE)-mediated T-cell death. METHODS: Pure HFRPE cells were isolated and cultured. Normal and interferon (IFN)-gamma-activated HFRPE from early and late in vitro passages were incubated with cells from the human T-cell leukemia line Jurkat (Jkt). Cultures were pulsed ... More
High-resolution mapping reveals topologically distinct cellular pools of phosphatidylserine.
Authors:Fairn GD, Schieber NL, Ariotti N, Murphy S, Kuerschner L, Webb RI, Grinstein S, Parton RG,
Journal:J Cell Biol
PubMed ID:21788369
'Phosphatidylserine (PS) plays a central role in cell signaling and in the biosynthesis of other lipids. To date, however, the subcellular distribution and transmembrane topology of this crucial phospholipid remain ill-defined. We transfected cells with a GFP-tagged C2 domain of lactadherin to detect by light and electron microscopy PS exposed ... More
Cigarette smoke extract induces oxidative stress and apoptosis in human lung fibroblasts.
Authors:Carnevali S, Petruzzelli S, Longoni B, Vanacore R, Barale R, Cipollini M, Scatena F, Paggiaro P, Celi A, Giuntini C
Journal:Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol
PubMed ID:12547733
'Cigarette smoke is a mixture of chemicals having direct and/or indirect toxic effects on different lung cells. We investigated the effect of cigarette smoke on human lung fibroblasts (HFL-1) oxidation and apoptosis. Cells were exposed to various concentrations (1, 5, and 10%) of cigarette smoke extract (CSE) for 3 h, ... More
Pseudomonas aeruginosa-induced apoptosis is defective in respiratory epithelial cells expressing mutant cystic fibrosis transmembrane conductance regulator.
Authors:Cannon CL, Kowalski MP, Stopak KS, Pier GB
Journal:Am J Respir Cell Mol Biol
PubMed ID:12878584
'Chronic lung infection with Pseudomonas aeruginosa constitutes the most severe manifestation of cystic fibrosis, a scenario that results from defects in early clearance of the microbe. Early clearance involves epithelial cell ingestion of bacteria, rapid activation of nuclear factor-kappa B and cellular desquamation within minutes of P. aeruginosa infection, processes ... More
N- and O-glycans modulate galectin-1 binding, CD45 signaling, and T cell death.
Authors:Earl LA, Bi S, Baum LG,
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:19920154
'Galectin-1, a beta-galactoside-binding protein highly expressed in the thymus, induces apoptosis of specific thymocyte subsets and activated T cells. Galectin-1 binds to N- and O-glycans on several glycoprotein receptors, including CD7, CD43, and CD45. Here we show that galectin-1 signaling through CD45, which carries both N- and O-glycans, is regulated ... More
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