El kit de síntesis de ADNc CellsDirect SuperScript IV está optimizado para la síntesis de ADNc de primera cadena directamente desde un lisado celular de mamíferos sin primero aislar ARN. La lisis celular y la transcripción inversa se realizan en el mismo tubo, y la primera cadena de ADNc resultante está listo para su uso en PCR y qPCR.
Las características del kit SuperScript IV incluyen: • Compatible con un amplio intervalo de tipos de células de mamíferos cultivados en diferentes condiciones de tratamiento • El formato de un solo tubo minimiza la pérdida de reactivos, la pérdida de muestras y el tiempo de manipulación • El volumen total de lisado se puede utilizar en la reacción de síntesis de la primera cadena ADNc, proporcionar mayor rendimiento con un número limitado de células y permitir la detección de transcripciones raras • ADNc de alta calidad generada para su uso en una variedad de aplicaciones, incluyendo PCR y qPCR • El protocolo sencillo tarda alrededor de 37 minutos • Compatible con mezclas maestras TaqMan y SYBR verde qPCR de varios fabricantes • Rendimiento optimizado para 1–10.000 células por muestra, resultados equivalentes a los de ARN purificado
El kit de síntesis de ADNc SuperScript IV CellsDirect incluye transcriptasa inversa SuperScript IV. Algunas de las características de esta enzima son: • Actividad de la ARNasa H reducida • Mayor estabilidad térmica • Altas tasas de rendimiento del ADNc en la reacción de síntesis de primera cadena, para una mayor sensibilidad y detección mejorada de transcripciones raras • Tolerancia superior a varios inhibidores de la RT
La transcriptasa inversa SuperScript IV es una opción superior para todas las aplicaciones de RT-PCR y qRT-PCR Mutación de MMLV exclusiva con una resistencia y fiabilidad superiores en las reacciones de RT. Respecto a SuperScript III, ha mejorado ostensiblemente en resistencia al inhibidor, capacidad de procesamiento y velocidad de reacción, al tiempo que retiene todas las ventajas de la enzima anterior, incluido el aumento de la termoestabilidad, la síntesis de ADNc de longitud completa altamente eficaz y la reducción de la actividad de ARNasa.
Cómo funciona En la RT-PCR tradicional, el ARN se aísla primero de las células en un procedimiento que requiere mucho tiempo y puede llevar a una pérdida de material. Con el kit de síntesis de ADNc CellsDirect SuperScript IV, las células se lisan y el ADNc se genera a partir del lisado en un único tubo con un manejo mínimo y sin pérdida de muestras. El tratamiento con DNasa I es un paso opcional y puede usarse para eliminar el ADN genómico antes de la síntesis de primera cadena. Este kit se ha optimizado para muestras de células pequeñas, que van desde las 10.000 células hasta una sola célula.
Especificaciones
Formato
Kit
GC-Rich PCR Performance
Alto
Velocidad de reacción
10 min
Técnica
Transcripción reversa
Características ecológicas
Menos peligroso, menos residuos
Temperatura óptima de reacción
de 50 °C
Transcriptasa inversa
SuperScript IV
Actividad de la ribonucleasa H
Reducido
Condiciones de envío
Hielo seco
Para utilizar con (aplicación)
RT-PCR, PCR en tiempo real (PCRq)
Tipo de producto final
Primera cadena de ADNc
N.º de reacciones
50 reacciones
Formato de reacción
Componentes premezclados
Tipo de reactivo
Transcripción reversa
Material de partida
Células
Contenido y almacenamiento
• Solución de lisis directa CellsDirect SuperScript IV (2 x 1,25 ml) • Solución de parada directa CellsDirect SuperScript IV (1 x 250 µl) • Potenciador de lisis (1 x 25 µl) • ADNasa I (1 x 55 µl) • Mezcla maestra RT SuperScript IV (1 x 400 µl) • Mezcla maestra control sin RT SuperScript IV (1 x 400 µl)
Almacenar a –20 °C.
Figuras
Documentos y descargas
Certificados
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