El kit de ensayo doble de luciferasa de Cypridina y de luciérnaga de Thermo Scientific proporciona los reactivos necesarios para detectar simultáneamente la actividad de luciferasa intracelular de Cypridina y de luciferasa roja en lisados de células completas de mamíferos.

Características del kit de ensayo doble de luciferasa de Cypridina y de luciérnaga:

• Simultáneo: detección concurrente, basada en filtros, separada por longitud de onda de dos actividades de luciferasa
• Sensible: medida de las actividades de la luciferasa de Cypridina azul brillante y la luciferasa de luciérnaga roja en la misma muestra
• Rápido: no se requiere el paso de enfriamiento, a diferencia de los ensayos dobles secuenciales tradicionales
• Multiplex: capaz de cuantificar dos actividades celulares en la misma muestra

El kit de ensayo doble de luciferasa de luciérnaga y de Cypridina de Pierce es un ensayo altamente sensible que permite la detección simultánea de la actividad de luciferasa de Cypridina y de luciérnaga roja. La luciferasa de Cypridina actúa como indicador experimental con luciérnaga roja constitutivamente activa como control de normalización. Como se muestra en los siguientes vídeos animados, esta combinación de indicador y control permite la monitorización simultánea de las actividades de luciferasa de indicador y control experimentales en un ensayo de lectura única sin necesidad de añadir dos pasos de reactivos de sustrato o de enfriamiento. La solución de trabajo del ensayo contiene sustratos para ambas luciferasas, y las reacciones se producen simultáneamente con la cinética de tipo flash. Las señales luminiscentes resultantes son resolubles espectralmente mediante filtros. En una sola muestra, los investigadores pueden analizar la actividad transcripcional de los elementos reguladores, las vías de transducción de señales y los efectos de los activadores o inhibidores.

Incluye:
tampón de lisis celular, tampón de reacción y sustratos Vargulina y D-luciferina

Requiere:
indicadores de luciferasa de Cypridina y de luciérnaga roja; filtros en los intervalos de 425 a 525 nm para luciferasa de Cypridina y de 615 a 675 nm para luciferasa de luciérnaga roja. Luminómetro u otro instrumento capaz de controlar la luminiscencia, como los lectores de microplacas Luminoskan Ascent y Varioskan Flash y de Thermo Scientific; inyector necesario para evaluar más de 24 pocillos a la vez.

Aplicaciones:
• Estudiar dos elementos normativos al mismo tiempo
• Controlar dos vías de señalización simultáneamente
• Permitir el estudio de más de un blanco por pantalla (p. ej., efectos inespecíficos)

Vídeos de aplicación:
la luciferasa de Cypridina produce una señal bioluminiscente más brillante que las luciferasas de luciérnaga y de Renilla nativa. La señal bioluminiscente (λmáx. = 463 nm) producida por luciferasa de Cypridina es el resultado de la oxidación de Vargulina. Esta reacción no requiere adenosina trifosfato (ATP) u otros cofactores. La luciferasa roja es una forma mutante de la luciferasa de luciérnaga japonesa de Luciola cruciata. Esta luciferasa produce un espectro de emisión de desplazamiento rojo (λmáx. = 613 nm) que resulta de la oxidación de D-luciferina en presencia de ATP. Las luciferasas de luciérnaga roja y de Cypridina se utilizan en el ensayo doble porque las señales son resolubles espectralmente.

Más datos de producto
• Ensayos de indicador de luciferasa multiplex altamente sensible
• Detección de emisión doble simultánea de ensayos de indicador de luciferasa
• Monitorización de la diferenciación neuronal usando indicadores de luciferasa multiplexados
• Activación de la vía de respuesta antioxidante por químicos pesticidas