El reactivo Thermo Scientific EZ-Link NHS-SS-biotina permite la biotinilación sencilla y eficaz de anticuerpos, proteínas y otras moléculas primarias que contienen aminas, así como el etiquetado intracelular.

Características del reactivo EZ-Link NHS-SS-biotina:

• Etiquetado de proteínas: biotinile anticuerpos u otras proteínas para la detección o purificación mediante resinas o sondas de estreptavidina.
• Penetra en la membrana: se puede utilizar para etiquetar el interior de las células (intracelular).
• Aminorreactivo: reacciona con aminas primarias (-NH2), como la cadena lateral de los lisinos (K) o los extremos de aminas de los polipéptidos.
• Escindible: el enlace de disulfuro del brazo espaciador permite eliminar la etiqueta de biotina mediante el uso de agentes reductores como la DTT; solo un pequeño grupo sulfhidrilo permanece conectado a la molécula.
• Solubilidad: debe disolverse en DMSO o DMF antes de su posterior dilución en tampones acuosos.
• Longitud media: la longitud del brazo espaciador es de 24,3 angstroms (longitud total añadida al elemento diana); se compone del grupo de ácido valérico de biotina nativo extendido mediante una cadena de 7 átomos.

La NHS-SS-biotina está formada por succiniimidil 2-(biotinamido)-etil-1,3' -ditiopropionato, un compuesto que permite la biotinilación simple y eficaz de anticuerpos, proteínas y otras moléculas primarias que contienen aminas. El brazo espaciador extendido (24,3 angstroms) de este reactivo reduce el impedimento estérico asociado a la unión a la avidina u otras proteínas de unión a la biotina e incorpora un enlace de disulfuro (-S-S-) de escisión por agente reductor en el espaciador, lo que proporciona mayor versatilidad al reactivo.

Fabricamos reactivos de biotina para garantizar la máxima integridad, coherencia y rendimiento global posible del producto en las aplicaciones de investigación previstas.

Los ésteres N-hidroxisulfosuccinimida (NHS) de biotina son el reactivo de biotinilación que más se utiliza. Las biotinas activadas por NHS reaccionan eficazmente con grupos amino primarios (-NH2) en tampones alcalinos para formar enlaces amida estables. Las proteínas (como los anticuerpos) suelen tener varias aminas primarias que están disponibles como objetivos de etiquetado, incluyendo la cadena lateral de residuos de lisina (K) y el extremo N de cada polipéptido.

Las variedades de reactivos de éster de NHS de biotina difieren en longitud, solubilidad, permeabilidad celular y capacidad de escisión. Las biotinas de NHS no sulfonadas permean las células, pero deben disolverse en disolvente orgánico, como DMSO o DMF. Las biotinas de sulfo-NHS (y aquellas con separadores pegilados) son solubles en agua directamente, pero no permean las membranas. Las variedades que contienen enlaces de disulfuro se pueden escindir mediante agentes reductores, lo que permite desconectar el grupo de biotina de la proteína etiquetada.