El kit de ensayo de neuraminidasa de la gripe NA-Fluor™ proporciona reactivos validados y un protocolo estandarizado para realizar ensayos de enzimas de la neuraminidasa, incluida la detección de susceptibilidad al inhibidor de la neuraminidasa (NI), mediante un sustrato fluorescente de MUNANA.

Características clave del producto:
• Diseño eficiente: ensayo de neuraminidasa en un kit completo
• Formulaciones optimizadas: los reactivos del ensayo se han optimizado para conseguir un rendimiento máximo basado en los protocolos NISN
• Aplicación fiable: detección funcional del virus resistentes a NI en poblaciones de virus mixtas
• Función de detección flexible y fácil de usar: señal fluorescente estable que permite el procesamiento por lotes o de alto rendimiento

Ensayo de neuraminidasa en un kit completo
El kit de ensayo de neuraminidasa de la gripe NA-Fluor™ incluye protocolos completos para la titulación de aislados virales según actividad de la neuraminidasa y la realización de ensayos de inhibición de la enzima neuraminidasa. El ensayo también se puede utilizar para controlar la actividad enzimática de la neuraminidasa a partir de fuentes no virales o bacterianas. El kit NA-Fluor™ contiene reactivos para 10 microplacas de 96 pocillos, suficientes para un total de 960 pocillos de ensayo, e incluye los siguientes componentes: sustrato de neuraminidasa fluorescente MUNANA, tampón de ensayo y solución de interrupción para mejorar y estabilizar la señal. El ensayo se realiza en microplacas estándar de color negro (las microplacas no están incluidas en el kit) y se lee en fluorímetros estándar.

Posibilidad de cotejar los resultados del ensayo de neuraminidasa con los protocolos de NISN
Las formulaciones de reactivos del ensayo de NA-Fluor™ están optimizadas para que puedan cotejarse con varios protocolos de ensayo basados en MUNANA de larga data, como:
• La concentración de sustrato de MUNANA, la formulación del tampón de ensayo y las condiciones del ensayo son coherentes con los protocolos de determinación de NISN IC-50
• Los datos generados mediante los ensayos NA-Fluor™ se corresponden con los datos generados con protocolos establecidos basados en MUNANA
Estos parámetros clave permiten a los investigadores cotejar los datos obtenidos durante los periodos de detección de virus resistentes a NI actuales gracias al ensayo NA-Fluor™ con los datos obtenidos a través de los protocolos de ensayo de MUNANA anteriores (figura 1).

Detección de virus resistentes a NI en poblaciones de virus mixtas
El gran cambio en los valores de IC-50 entre el virus sensible al oseltamivir y el resistente a dicho fármaco mediante el ensayo NA-Fluor™ permite detectar los virus mutantes en muestras virales mixtas (figura 2). Esto es fundamental para identificar a los virus resistentes en aislamientos clínicos que abarcan poblaciones mezcladas de virus resistentes y sensibles durante los controles de susceptibilidad frente a los NI.

Flexibilidad a la hora de detectar la actividad de la neuraminidasa
El ensayo NA-Fluor™ proporciona un formato fácil y flexible para analizar varios cientos de aislados virales, o incluso de miles de compuestos en la búsqueda de candidatos potenciales de alto rendimiento con datos de calidad muy fiables. Gracias a su excelente rendimiento, el ensayo tiene un factor Z de entre 0,78 y 0,8, por lo que es perfecto para su uso en pruebas de detección de alto rendimiento. El producto de reacción fluorescente permanece estable durante horas a temperatura ambiente una vez se ha completado el ensayo, lo que permite una mayor flexibilidad en el tiempo de lectura y datos comparables de la primera placa a la última. La señal del ensayo permanece casi constante y los valores de IC50 (no se muestran los datos) son idénticos a los datos recopilados hasta 4 horas después de la finalización del ensayo si se conserva a temperatura ambiente y hasta 4 días después de la finalización del ensayo si se conserva a 4 °C (figura 3). El ensayo de NA-Fluor™ se ha optimizado para conseguir criterios de punto final si se lleva a cabo a 37 °C durante una hora después de la incubación previa de NI. Sin embargo, la tasa de renovación del sustrato de MUNANA permanece constante durante más de 2 horas con la neuraminidasa del virus, lo que permite que el ensayo se realice durante tan solo 20 minutos para ahorrar tiempo o durante 2 horas para aumentar la salida de la señal. El ensayo también se puede realizar en tiempo real sin la adición de una solución de parada para aquellos investigadores que deseen realizar su propio desarrollo de ensayo o controlar las tasas de rotación del sustrato en presencia de un inhibidor (figura 4).

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.