Amplex™ Red Neuraminidase (Sialidase) Assay Kit
Amplex™ Red Neuraminidase (Sialidase) Assay Kit
Invitrogen™

Amplex™ Red Neuraminidase (Sialidase) Assay Kit

El kit de ensayo de neuraminidasa (sialidasa) Amplex™ Red proporciona un método sencillo y sensible para detectar la actividad deMás información
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Número de catálogoCantidad
A22178400 ensayos
Número de catálogo A22178
Precio (EUR)
650,00
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Cantidad:
400 ensayos
Precio (EUR)
650,00
Each
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El kit de ensayo de neuraminidasa (sialidasa) Amplex™ Red proporciona un método sencillo y sensible para detectar la actividad de la neuraminidasa en suero y en sistemas enzimáticos purificados mediante un lector de microplacas de fluorescencia o un fluorímetro.

Consulte nuestra línea completa de ensayos de microplacas de fluorescencia.

• Detecta niveles de neuraminidasa de tan solo 0,2 mU/ml
• Su formato permite realizar varias mediciones en un punto de tiempo
• Diseñado para una mínima interferencia de autofluorescencia
• Detecta la actividad de la neuraminidasa en muestras biológicas como el suero

La neuraminidasa (también conocida como sialidasa) es una enzima muy común que hidroliza los residuos de ácido siálico terminales en las cadenas de polisacáridos, exponiendo con mayor frecuencia un residuo de galactosa. La neuraminidasa desempeña un papel fundamental en la invasión de las células objetivo y la posterior replicación del virus de la gripe porcina, lo que convierte a la neuraminidasa en un objetivo importante para el desarrollo de medicamentos contra la gripe porcina.

El kit de ensayo de neuraminidasa (sialidasa) Amplex™ Red proporciona un método ultrasensible para detectar la actividad de la neuramimidasa. Este ensayo utiliza el reactivo Amplex™ Red para detectar el peróxido de hidrógeno generado por la oxidación de la galactosa oxidasa de la galactosa desializada, el resultado final de la acción de la neuraminidasa. Luego, el peróxido de hidrógeno, en presencia de peroxidasa de rábano (HRP), reacciona en una proporción estequiométrica de 1:1 con el reactivo Amplex™ Red para generar el producto de oxidación rojo fluorescente, la resorufina.

Como la resorufina tiene unos valores máximos de absorción y emisión de fluorescencia de aproximadamente 571 nm y 585 nm respectivamente, hay poca interferencia de autofluorescencia en la mayoría de las muestras biológicas.

Utilice ensayos Amplex™ Red para una amplia gama de investigaciones
Hay disponible una amplia variedad de ensayos Amplex™ Red para el estudio de la señalización de células y lípidos, la neurobiología, el funcionamiento de procesos inflamatorios e inmunitarios, y el metabolismo. También ofrecemos el reactivo Amplex™ UltraRed (n.º de cat. A36006), un reactivo de segunda generación que proporciona una mayor sensibilidad y fluorescencia más brillante, y el reactivo de parada Amplex™ Red/UltraRed (n.º cat. A33855). El reactivo de parada Amplex™ Red/UltraRed ofrece comodidad y control, ya que permite terminar la reacción de generación de la señal de fluorescencia en un momento determinado por el usuario. Después de añadir el reactivo de parada, la señal de fluorescencia permanece estable durante al menos tres horas. También hay disponibles diseños de ensayos y envases personalizados.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteOtras etiquetas o colorantes
FormatoTubos, placa de 96 pocillos
Cantidad400 ensayos
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Para utilizar con (aplicación)Ensayo de neuraminidasa (sialidasa)
Para utilizar con (equipo)Lector de microplacas, Espectrofotómetro, Fluorímetro
Línea de productosAmplex
Tipo de productoKit de ensayo de neuraminidasa (sialidasa) Red
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar en el congelador de -5 °C a -30 °C y proteger de la luz.

Preguntas frecuentes

I'm using an Amplex Red kit, the reagent changes color to pink almost immediately in my own Krebs-Ringer buffer but not in HBSS. Why is this?

The components of Krebs-Ringer buffer (salts) should not cause oxidation of the Amplex reagent (which, in the presence of peroxidase and H2O2 oxidizes to resorufin, which is pink in color and fluorescent). Try water alone (the water used to make the Krebs-Ringer buffer). Since Hank's Buffered Saline Solution is typically purchased rather than made in the lab, it likely would not have the same contaminant. Another option is to degas the buffer prior to use to removed dissolved oxygen radicals.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can Amplex Red Assays be performed using cell lysates?

This is not recommended. The presence of endogenous proteases can complicate the assay by degrading the horseradish peroxidase (HRP). Endogenous peroxidases and antioxidants can modify the H2O2 required for the reaction, competing with HRP (and catalase) for the substrate.

The Amplex Red Assays are best performed with either purified enzymes or extracted H2O2 in a defined buffer system, extracellular solutions or body fluids (media, serum, etc.) that do not exhibit high levels of endogenous protease or oxidase activity and do not contain antioxidants.

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How does the Amplex Red Neuraminidase (Sialidase) Assay kit detect neuramimidase activity?

The assay utilizes Amplex Red to detect H2O2 generated by galactose oxidase oxidation of desialiated galactose, the result of neuraminidase activity. In the presence of HRP, H2O2 reacts with a 1:1 stiochiometry with Amplex Red reagent to generate the red-fluorescent oxidation product, resorufin.

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Citations & References (10)

Citations & References
Abstract
Filifactor alocis has virulence attributes that can enhance its persistence under oxidative stress conditions and mediate invasion of epithelial cells by porphyromonas gingivalis.
Authors:Aruni AW, Roy F, Fletcher HM,
Journal:Infect Immun
PubMed ID:21825062
'Filifactor alocis, a Gram-positive anaerobic rod, is one of the most abundant bacteria identified in the periodontal pockets of periodontitis patients. There is a gap in our understanding of its pathogenicity and ability to interact with other periodontal pathogens. To evaluate the virulence potential of F. alocis and its ability ... More
VimA-dependent modulation of acetyl coenzyme A levels and lipid A biosynthesis can alter virulence in Porphyromonas gingivalis.
Authors:Aruni AW, Lee J, Osbourne D, Dou Y, Roy F, Muthiah A, Boskovic DS, Fletcher HM,
Journal:Infect Immun
PubMed ID:22144476
'The Porphyromonas gingivalis VimA protein has multifunctional properties that can modulate several of its major virulence factors. To further characterize VimA, P. gingivalis FLL406 carrying an additional vimA gene and a vimA-defective mutant in a different P. gingivalis genetic background were evaluated. The vimA-defective mutant (FLL451) in the P. gingivalis ... More
Preterm human milk contains a large pool of latent TGF-ß, which can be activated by exogenous neuraminidase.
Authors:Namachivayam K, Blanco CL, Frost BL, Reeves AA, Jagadeeswaran R, MohanKumar K, Safarulla A, Mandal P, Garzon SA, Raj JU, Maheshwari A,
Journal:Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol
PubMed ID:23558011
'Human milk contains substantial amounts of transforming growth factor (TGF)-ß, particularly the isoform TGF-ß2. We previously showed in preclinical models that enterally administered TGF-ß2 can protect against necrotizing enterocolitis (NEC), an inflammatory bowel necrosis of premature infants. In this study we hypothesized that premature infants remain at higher risk of ... More
Resistance of influenza viruses to neuraminidase inhibitors--a review.
Authors:McKimm-Breschkin JL
Journal:Antiviral Res
PubMed ID:10930642
Neuraminidase inhibition and viral chemotherapy.
Authors:Haskell TH, Peterson FE, Watson D, Plessas NR, Culbertson T
Journal:J Med Chem
PubMed ID:4318072