Kit de sistema de expresión Expi293™ Inducible
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Kit de sistema de expresión Expi293™ Inducible

El kit del sistema de expresión inducible Expi293 forma parte de la plataforma Expi293 para la expresión rápida y transitoriaMás información
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Número de catálogoCantidad
A392511 Kit
Número de catálogo A39251
Precio (EUR)
3.310,00
Each
Cantidad:
1 Kit
Precio (EUR)
3.310,00
Each
El kit del sistema de expresión inducible Expi293 forma parte de la plataforma Expi293 para la expresión rápida y transitoria de proteínas de alto rendimiento de células de mamíferos 293. El kit del sistema se centra en las células Expi293F diseñadas que expresan de forma estable la proteína represora de tetraciclina (TetrR), lo que permite la expresión de proteínas reguladas por tetraciclina. La línea celular inducible Expi293F establecida por la integración estable del plásmido regulador pcDNA6/TR, que codifica el gen TetR bajo el control del promotor del CMV humano. Esta línea celular es una poderosa herramienta para la expresión de alto rendimiento inducible por tetraciclina de proteínas recombinantes.

Las características del kit del sistema Expression inducible Expi293 incluyen:
• Expresión de proteínas inducibles por tetraciclina con niveles de expresión basal extremadamente bajos
• Rendimientos de proteínas equivalentes a la célula parental Expi293F (hasta 1 g/l)
• Vector pcDNA5/TO para la expresión regulada por tetraciclina del gen de interés
• Cultivo de alta densidad en suspensión de células inducibles Expi293F en el medio de expresión Expi293
• Transfección transitoria de alta eficiencia con reactivo ExpiFectamine 293 en combinación con potenciadores de transfección especializados

Los componentes incluidos en el kit del sistema de expresión inducible Expi293 son: Un vial de células inducibles de Expi293F congeladas, 1 l de medio de expresión Expi293, un kit de transfección de ExpiFectamina 293 suficiente para transfeccionar 1 l de cultivo, 100 ml de tampón de complexación Opti-Plex, un kit de vector de expresión de mamíferos pcDNA5/TO, 500 mg de clorhidrato de tetraciclina y el vector positivo de control de pRABBIT IgG IRES-EmGFP. Los componentes del sistema de expresión inducible Expi293 también están disponibles para su compra por separado.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Línea de célulasExpi293F™
Tipo de entregaTransfección
Para utilizar con (aplicación)Expresión de proteínas
Línea de productosExpi293
Cantidad1 Kit
Condiciones de envíoAprobado para su envío a temperatura ambiente o en hielo húmedo o seco
Material de partidaADN
PromotorCMV⁄TO
TipoKit de sistema de expresión inducible
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
• Células inducibles Expi293F (1x107 células/vial), almacenar en fase de vapor nitrógeno líquido
• 1 l de medio de expresión Expi293, almacenar entre 2–8 °C (proteger de la luz)
• Kit de transfección ExpiFectamine 293 1 l de cultivo, almacenar entre 2–8 °C
• 100 ml de tampón de complexación Opti-Plex, almacenar entre 2–8 °C (proteger de la luz)
• 20 µg de vector de expresión de mamíferos pcDNA5/TO, almacenar entre 2–8 °C o almacenamiento a largo plazo a -20 °C.
• Vector de control positivo pRABBIT IgG IRES-EmGFP, almacenar a 2–8 °C o almacenamiento a largo plazo a -20 °C.
• 500 mg de clorhidrato de tetraciclina, almacenar a -20 °C.

Preguntas frecuentes

Can I leave my Expi293F culture expressing for more than 7 days?

The growth and expression characteristics of Expi293F cells are such that, by 7 days post-transfection, the culture medium should be close to being spent and maximal protein expression should have already been achieved. Continued incubation will result in a large decrease in cell culture viability.

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What is the difference between the Expi293F Inducible Cell Line and the T-REx -293 Cell Line?

The Expi293F Inducible Cell Line was created using the same technology as the T-REx -293 Cell Line. Both cell lines have been created by stable transfection with the pcDNA 6/TR vector; thus, they ubiquitously express the tetracycline repressor (TetR) protein. The parental cell line of Expi293F Inducible cells is Expi293F Cells (Cat. No. A14527). The key differences between these 2 cell lines are:
- Expi293F Inducible cells are grown in suspension and are adapted to high-density culture (> 15x10E6 cells/mL).
- Expi293F Inducible cells grow in Expi293 Expression System and perform equivalently to parental Expi293F cells, thus making them ideal for high-yield, inducible protein expression.

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What method do you recommend for quantifying rabbit IgG expression from pRABBIT IgG IRES-EmGFP Positive Control Vector, Cat. No. A39243?

The formation of intact IgG molecules may be quantified using a sandwich ELISA designed to capture and detect rabbit IgG. Besides the rabbit IgG positive control vector, reagents, and consumables that are included in the kit, you will also need purified rabbit IgG to be used as a standard, F(ab')2-Goat anti-Rabbit IgG (H+L) Cross-Adsorbed Secondary Antibody, HRP (Cat. No. A10547), Protein A Coated Plates, Clear, 96-Well (Cat. No. 15130), TMB Substrate Kit (Cat. No. 34021), SuperBlock (TBS) Blocking Buffer (Cat. No. 37535), and PBS or TBS buffer for washes. There is an example procedure in our Protein A Coated Plates manual (https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/MAN0011310_Thermo Scientific_ProteinA_G_AG_Coat_96Well_UG.pdf). Please note that our R&D scientists determine titer values from crude cell culture supernatants using a Pall Life Sciences FortéBio Octet instrument equipped with a Protein A biosensor.

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Do you offer a GFP-expressing mammalian expression vector that I can use as a control to monitor my transfection and expression with the Expi systems?

We offer pRABBIT IgG IRES-EmGFP Positive Control Vector, Cat. No. A39243, which you can use to monitor your transfection and expression.

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Can I use doxycycline instead of tetracycline as an inducer in the Expi293 Inducible Expression System?

Doxycycline may be used as an alternative inducing agent in the Expi293 Inducible System. It is similar to tetracycline in its mechanism of action. Doxycycline has been shown to have a longer half-life than tetracycline (48 hr vs. 24 hr, respectively). If the use of doxycycline is desired with the Expi293 Inducible System, we recommend performing a dose-response curve to determine the optimal concentration for induction.

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