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Citas y referencias (12)
Invitrogen™
EnzChek™ Caspase-3 Activity Assay Kits
Detecte apoptosis en extractos celulares y preparaciones enzimáticas purificadas con kits de ensayo de actividad de la caspasa-3 EnzChek con sustrato Z-DEVD-AMC o sustratos Z-DEVD-R110.
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| Número de catálogo | Etiqueta o tinte |
|---|---|
| E13184 | Rodamina 110 |
| E13183 | AMC (7-amino-4-metilcumarina) |
Número de catálogo E13184
Precio (EUR)
978,00
Each
Etiqueta o tinte:
Rodamina 110
Precio (EUR)
978,00
Each
Logre la detección sencilla y fiable de la apoptosis mediada por la actividad de la caspasa-3 con el kit de ensayo de actividad de la caspasa-3 EnzChek, que aprovecha los sustratos especialmente diseñados que se vuelven fluorescentes al momento de la escisión mediante la enzima caspasa-3. El kit de ensayo de actividad de la caspasa-3 EnzChek está disponible con el sustrato Z-DEVD-AMC o Z-DEVD-R110, que da un producto fluorescente brillante al momento de la escisión proteolítica por caspasa 3/7.
El kit de ensayo de actividad de caspasa-3 EnzChek permite la detección de apoptosis al proporcionar un método sencillo y fiable para analizar la actividad de la caspasa-3/7. El kit se puede utilizar para medir continuamente la actividad de la caspasa-3/7 en extractos celulares y preparaciones enzimáticas purificadas mediante un fluorímetro o un lector de microplacas de fluorescencia.
Las características clave del kit de ensayo de actividad de caspasa-3 EnzChek incluyen:
• Ensayo fluorescente con ajustes estándar de excitación/emisión de fluoresceína (FITC)
• Su formato permite la medición continua de la actividad de la caspasa-3/7 en extractos celulares
• Controles fluorescentes y enzimáticos incluidos
El sustrato derivado de la aminometilcumarina (AMC) (Z-ácido aspártico-ácido glutámico-ácido valina-aspártico (DEVD)-AMC) que se incluye en el kit de ensayo de actividad de la caspasa-3 EnzChek es poco fluorescente en el intervalo de UV (excitación/emisión máxima de ˜ 330/390 nm), pero produce un producto azul fluorescente brillante (excitación/emisión máxima de ˜ 342/441 nm) tras la escisión proteolítica. El kit se puede utilizar para medir continuamente la actividad de la caspasa-3 y las proteasas estrechamente relacionadas en extractos celulares y preparaciones enzimáticas purificadas mediante un fluorímetro o un lector de microplacas de fluorescencia.
El sustrato derivado de rodamina 110 (Z-DEVD-R110) utilizado en el kit de ensayo de actividad de la caspasa-3 EnzChek es un compuesto de bisamida no fluorescente que, tras la escisión enzimática, se convierte en un proceso de dos pasos en la monoamida fluorescente y, luego, en el producto R110 aún más fluorescente. Ambos productos de hidrólisis presentan propiedades espectrales similares a las de la fluoresceína, con longitudes de onda de excitación y emisión máximas de 496 nm y 520 nm, respectivamente.
Además de los sustratos, el kit de ensayo de actividad de la caspasa EnzChek contiene el inhibidor de aldehído reversible Ac-DEVD-CHO, así como una AMC o R110 estándar de referencia. El inhibidor Ac-DEVD-CHO confirma que las señales de fluorescencia tanto en las poblaciones celulares inducidas como en las de control se deben a la actividad de la proteasa caspasa-3/7. El estándar de referencia permite cuantificar la cantidad de AMC o R110 liberada en la reacción.
Las características clave del kit de ensayo de actividad de caspasa-3 EnzChek incluyen:
• Ensayo fluorescente con ajustes estándar de excitación/emisión de fluoresceína (FITC)
• Su formato permite la medición continua de la actividad de la caspasa-3/7 en extractos celulares
• Controles fluorescentes y enzimáticos incluidos
El sustrato derivado de la aminometilcumarina (AMC) (Z-ácido aspártico-ácido glutámico-ácido valina-aspártico (DEVD)-AMC) que se incluye en el kit de ensayo de actividad de la caspasa-3 EnzChek es poco fluorescente en el intervalo de UV (excitación/emisión máxima de ˜ 330/390 nm), pero produce un producto azul fluorescente brillante (excitación/emisión máxima de ˜ 342/441 nm) tras la escisión proteolítica. El kit se puede utilizar para medir continuamente la actividad de la caspasa-3 y las proteasas estrechamente relacionadas en extractos celulares y preparaciones enzimáticas purificadas mediante un fluorímetro o un lector de microplacas de fluorescencia.
El sustrato derivado de rodamina 110 (Z-DEVD-R110) utilizado en el kit de ensayo de actividad de la caspasa-3 EnzChek es un compuesto de bisamida no fluorescente que, tras la escisión enzimática, se convierte en un proceso de dos pasos en la monoamida fluorescente y, luego, en el producto R110 aún más fluorescente. Ambos productos de hidrólisis presentan propiedades espectrales similares a las de la fluoresceína, con longitudes de onda de excitación y emisión máximas de 496 nm y 520 nm, respectivamente.
Además de los sustratos, el kit de ensayo de actividad de la caspasa EnzChek contiene el inhibidor de aldehído reversible Ac-DEVD-CHO, así como una AMC o R110 estándar de referencia. El inhibidor Ac-DEVD-CHO confirma que las señales de fluorescencia tanto en las poblaciones celulares inducidas como en las de control se deben a la actividad de la proteasa caspasa-3/7. El estándar de referencia permite cuantificar la cantidad de AMC o R110 liberada en la reacción.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Especificaciones
DescripciónKit de ensayo de caspasa-3 EnzChek n.º 2, sustrato Z-DEVD-R110
Excitación/emisión496/520 (sustrato escindido)
Para utilizar con (aplicación)Apoptosis and Autophagy
Para utilizar con (equipo)Fluorometer, Microplate Reader
Tipo de etiquetaOtras etiquetas o colorantes
Etiqueta o tinteRodamina 110
N.º de reacciones500 ensayos (volumen de reacción de 100 μl por ensayo)
Línea de productosEnzChek
Tipo de productoKit de ensayo de caspasa
Cantidad500 Assays
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Método de detecciónFluorescencia
Intervalo de longitud de onda de emisión520 nm
Excitation Wavelength Range496 nm
FormatoCuvettes, 96-well Plate
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar en el congelador (de - 5 a - 30 °C) y proteger de la luz.
Preguntas frecuentes
Is the Z-DEVD-R110 substrate in the EnzChek Caspase-3 Assay Kit #2 cell permeable?
Citations & References (12)
Citations & References
Abstract
Novel small molecule inhibitors of caspase-3 block cellular and biochemical features of apoptosis.
Journal:J Pharmacol Exp Ther
PubMed ID:12490620
'Caspase-3 is an intracellular cysteine protease, activated as part of the apoptotic response to cell injury. Its interest as a therapeutic target has led many to pursue the development of inhibitors. To date, only one series of nonpeptidic inhibitors have been described, and these have limited selectivity within the caspase
Role of the sphingosine rheostat in the regulation of cnidarian-dinoflagellate symbioses.
Journal:Biol Bull
PubMed ID:22186914
'The symbiosis between host cnidarians, such as corals and anemones, and their dinoflagellate symbionts is regulated by largely undescribed mechanisms that stabilize the symbiosis during normal conditions but lead to symbiosis breakdown, or cnidarian bleaching, during stress. Previous transcriptomic studies identified the sphingosine rheostat as a putative symbiosis regulatory pathway.
Fluorescent molecular probes V: a sensitive caspase-3 substrate for fluorometric assays.
Journal:Bioorg Med Chem Lett
PubMed ID:10576694
(Z-Asp-Glu-Val-Asp)-Rhodamine 110 [(Z-DEVD)2-Rh 110] was prepared and characterized as a sensitive fluorogenic substrate for the determination of caspase-3 activity.
Photodynamic therapy and cell death pathways.
Journal:Methods Mol Biol
PubMed ID:20552338
Photodynamic therapy (PDT) is the term used to describe the irradiation of photosensitized cells or tissue with phototoxic consequences. This process can result in the rapid initiation of not only apoptosis, an irreversible death pathway, but also autophagy. The procedures described here are designed to characterize the correlation between the
Rhodamine 110-linked amino acids and peptides as substrates to measure caspase activity upon apoptosis induction in intact cells.
Journal:Biochemistry
PubMed ID:10529236
Caspases (cysteine aspartate-specific proteases) are a structurally related group of cysteine proteases that cleave peptide bonds following specific recognition sequences. They play a central role in activating apoptosis of vertebrate cells. To measure apoptosis induced by various stimuli and at an early apoptotic stage, caspases are an ideal target. This