El polinucleótido cinasa T4 (PNK T4) Thermo Scientific™ cataliza la transferencia del fosfato gamma del adenosín trifosfato (ATP) al grupo 5'-OH de ARN o ADN monocatenario o bicatenario y a oligonucleótidos o nucleósidos 3'-monofosfatos (reacción de avance). La reacción es reversible. En presencia de adenosina-difosfato (ADP), el polinucleótido cinasa T4 exhibe actividad 5'-fosfatasa y cataliza el intercambio de los grupos fosfatos entre 5'-P-oligo-polinucleótidos y ATP (reacción de intercambio). La enzima también es 3'-fosfatasa.
Características destacadas• Activo en tampones de enzimas de restricción, transcripción inversa (RT) y
ligasa de ADN T4 Thermo Scientific
Aplicaciones• Marcado del extremo 5' de los ácidos nucleicos que pueden usarse como:
--Sondas para hibridación
--Sondas para mapeo de transcripciones
--Marcadores para electroforesis en gel
--Cebadores para la secuenciación del ADN
-- Cebadores para PCR
• Fosforilación del extremo 5' de oligonucleótidos, productos de PCR u otros ADN o ARN antes de la ligación
• Fosforilación de cebadores de PCR
• Detección de modificaciones del ADN mediante postmarcaja con
32P• Eliminación de grupos fosfato en el extremo 3'
Notas• El extremo 5' de ácidos nucleicos puede etiquetarse mediante reacción directa o de intercambio.
• El polietilenglicol (PEG) y la espermidina mejoran la velocidad y la eficacia de la reacción de fosforilación. El PEG se utiliza en la mezcla para la reacción de intercambio.
• Como los iones de amonio inhiben el polinucleótido cinasa T4, utilice acetato sódico para precipitar el ADN antes de la fosforilación.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.