La proteinasa K Thermo Scientific es una proteasa endolítica de amplia gama que se utiliza para la digestión de proteínas en preparaciones de ácidos nucleicos. Degrada las proteínas incluso en presencia de detergentes. La proteinasa K disocia los enlaces peptídicos de los extremos carboxílicos de los aminoácidos hidrofóbicos, aromáticos o alifáticos. La proteinasa K se clasifica como una serín proteasa. El péptido más pequeño que puede hidrolizar esta enzima es un tetrapéptido.

Características destacadas

• Solución lista para su uso
• Activa en una amplia selección de condiciones de reacción

Aplicaciones

• Aislamiento de ADN genómico de cola de ratón
• Aislamiento de ADN genómico de cultivo celular
• Eliminación de las desoxirribonucleasas (ADNasa) y ribonucleasas (ARNasa) durante el aislamiento del ADN y del ARN de líneas de células o tejidos
• Determinación de la localización de enzimas
• Mejora la eficiencia de la clonación de los productos de reacción en cadena de la polimerasa (PCR)

Nota

• La concentración de trabajo recomendada de proteinasa K es de 0,05 a 1 mg/ml. La actividad de la enzima se estimula por la presencia de dodecilsulfato sódico (SDS) en concentraciones entre 0,2 y 1 % (SDS) o de urea en concentraciones entre 1 y 4 M
• El Ca2+ protege a la proteinasa K de la autolisis, aumenta la estabilidad térmica y ofrece una función reguladora en el punto de unión al sustrato de la proteinasa K
• Estable en un amplio rango de pH: de 4,0 a 12,5, pH óptimo de 7,5 a 8,0
• Actividad óptima a entre 50 y 55 °C
• La rápida desnaturalización de la enzima se produce a temperaturas superiores a los 65 °C.