ProcartaPlex™ Human Coronavirus Ig Total Panel, 11plex

El panel ProcartaPlex de coronavirus humano Ig Total 11-Plex permite la detección de cuatro anticuerpos anti-SARS-CoV-2 (Spike trimer, subunidad S1, RBD (dominio de unión de receptores) y nucleocápsido), seis cepas anti-coronavirus (SARS-CoV-1, MERS, CoV-NL63, CoV-KHU1, CoV-229E, COV-OC43 ), y un control negativo en un solo pocillo mediante la tecnología Luminex xMAP. La detección simultánea de anticuerpos anti-SARS-CoV-2 y anticuerpos de coronavirus relacionados en un ensayo puede ahorrar tiempo para proporcionar un conjunto completo de datos holísticos de muestras de suero.

A diferencia de la mayoría de los kits ProcartaPlex que utilizan pares de anticuerpos coincidentes para detectar proteínas de interés, este ensayo serológico se ha diseñado con proteínas específicas de SARS-CoV-2 conjugadas con el gránulo. El anticuerpo del detector es un anticuerpo total de inmunoglobulina (Ig) conjugado directamente con la ficoeritrina (PE) que reacciona de forma cruzada con todos los Ig (IgG, IgM e IgA) en suero. La IgG es la más abundante de las inmunoglobulinas.

El panel se suministra en un formato listo para su uso y el tiempo de incubación total es de dos horas y media. El kit viene con dos viales para cada uno de los controles altos, medios y bajos que se van a ejecutar como controles o el control alto se puede diluir en serie para generar una curva estándar. Se recomienda diluir muestras de suero y plasma a 1:1000. No se puede combinar con otros paneles o ensayos simples.

Los paneles preconfigurados ProcartaPlex se han probado exhaustivamente para determinar la capacidad combinatoria, la interferencia y la reactividad cruzada de los analitos con el fin de proporcionar el mayor nivel de validación y precisión. Todos los paneles ProcartaPlex se suministran con los reactivos necesarios para realizar el ensayo.

Lista de objetivos [región de gránulos]: SARS-CoV-2 Spike (trimer) [14], proteína S1 SARS-CoV-2 [15], SARS-CoV-2 RBD (IAP) [75], nucleocápsido SARS-CoV-2 [13], SARS S1 [67], CoV-NL63 [39], CoV-HKU1 [30], COV-229E [26], MERS S1 [46], CoV-OC43 [37], Control negativo [52]

Acerca de los ensayos ProcartaPlex para la plataforma Luminex
Los inmunoensayos ProcartaPlex se basan en los principios de un ELISA tipo sándwich, utilizando dos anticuerpos altamente específicos que se enlazan a diferentes epítopos de una proteína para cuantificar todas las proteínas objetivo simultáneamente con un instrumento Luminex. Para los ensayos ProcartaPlex multiplex se requieren tan solo 25 μl de plasma o suero, o 50 μl de sobrenadante del cultivo celular, y solo se necesitan cuatro horas para obtener los resultados analizados.

• Resultados reproducibles y fiables: validados como panel según el estándar más alto del sector que incluyen pruebas de combinación de objetivos de proteínas y reactividad cruzada
• Más resultados por muestra: miden múltiples objetivos de proteínas simultáneamente en una única muestra de 25–50 μl
• Tecnología Luminex bien establecida: la plataforma de multiplexación de mayor referencia para la detección y cuantificación de proteínas

Los ensayos de ProcartaPlex utilizan la tecnología Luminex Xmap (perfil multianalito) para la detección y cuantificación simultáneas de hasta 80 objetivos proteicos en una sola muestra de plasma, suero, sobrenadantes de cultivo celular y otros fluidos corporales de 25 a 50 μl.

Los gránulos de mircroesferas superparamagnéticas Luminex MagPlex del ensayo de ProcartaPlex se tiñen internamente con proporciones precisas de fluoróforos rojos e infrarrojos para crear 100 firmas específicas que pueden ser identificadas por los sistemas de detección Luminex Xmap (por ejemplo, sistemas Luminex 200, FLEXMAP 3D y MAGPIX). El ensayo ProcartaPlex, similar a un ELISA tipo sándwich, utiliza pares de anticuerpos emparejados para identificar la proteína de interés. En un ensayo multiplex, cada gránulo espectralmente único se etiqueta con anticuerpos específicos para una sola proteína diana, y las proteínas vinculadas se identifican con anticuerpos biotinilados y estreptavidina–R-ficoeritrina (RPE). La conjugación de anticuerpos específicos de proteínas en un gránulo distinto permite el análisis de varios elementos diana en un solo pocillo.

La diferencia más significativa entre un ensayo ProcartaPlex y uno de tipo ELISA es que el anticuerpo de captura del ensayo ProcartaPlex se conjuga con un gránulo magnético y no se absorbe en el pocillo de la microplaca, por lo que los reactivos del ensayo ProcartaPlex flotan en la solución. Para la detección, el instrumento Luminex 200, por ejemplo, contiene dos láseres, uno para distinguir la firma espectral de cada partícula y el segundo para cuantificar la cantidad de fluorescencia RPE, que es proporcional a la cantidad de proteína presente en la muestra. Los ensayos multiplex ProcartaPlex pueden determinar el perfil de más proteínas diana con mucha menos muestra en el mismo tiempo que se tarda en realizar un ELISA tipo sándwich tradicional.

Los paneles multiplex ProcartaPlex están disponibles en múltiples formatos en seis especies (humano, ratón, rata, primate no humano, porcino y canino). Visite thermofisher.com/procartaplex para obtener más información y consultar los productos disponibles.