Las proteínas morfogenéticas óseas (BMP), miembros de la superfamilia del factor beta de transformación del crecimiento (TGF-β), desempeñan un papel importante en el desarrollo del corazón, el sistema nervioso central y el cartílago. La interrupción de la señalización de BMP afecta al plan corporal del embrión en desarrollo. Las BMP propagan su señal activando la cinasa de tipo receptor de activina (ALK), que a su vez media la fosforilación de los R-Smad. El R-Smad fosforilado se asocia con Smad4 y, a continuación, se transloca al núcleo, que regula la expresión génica. Las células A375 son células de melanoma maligno humano que contienen la vía de señalización endógena Smad. La línea celular SBE-bla A375 se ha diseñado para expresar la betalactamasa bajo el control del elemento de unión Smad. Esta línea celular ha sido validada para Z' y EC50 en condiciones optimizadas usando BMP-4. Esta línea celular también ha respondido al nodal y se ha probado para determinar el rendimiento del ensayo en condiciones variables, incluidos la concentración de DMSO, el número de células, el tiempo de estimulación y el tiempo de carga del sustrato. También se proporciona información adicional utilizando varios inhibidores de moléculas pequeñas y ARNip StealthTM.