La línea celular LanthaScreen®IkB alfa GripTite® contiene una proteína de fusión compuesta por la codificación de ADNc para GFP e IkB (GFP se fusiona al extremo N de IkB-alfa) bajo control del promotor de CMV transfectado de forma estable en células GripTite®. GripTite® es una línea celular HEK293 modificada. Se trata de una línea celular de riñón humano que muestra la activación inducible de la vía de señalización de NFkB mediante varios ligandos diferentes, como el TNF y la IL-1. La activación de la vía de NFkB implica la activación de IKK, lo que da lugar a la fosforilación de su proteína diana IkB-alfa. Esta línea celular LanthaScreen permite, por lo tanto, el análisis de la actividad de IKK utilizando la fosforilación de GFP-IkB-alfa como lectura. La construcción GFP-IkB-alfa se transfectó en células GripTite® con Lipofectamine™2 000 y, a continuación, se realizó la selección con blasticidina. Esta línea celular es una población clónica aislada por citometría de flujo utilizando la fluorescencia de GFP como marcador de clasificación. Esta línea celular se ha validado para EC50 y Z' en condiciones optimizadas usando el TNF como ligando para la fosforilación o la ubicuitinación de GFP-IkB-alfa mediada por IKK. Esta línea celular también se ha probado para determinar el rendimiento del ensayo en condiciones experimentales variables, incluidos la densidad de las placas celulares, el tiempo de estimulación, la tolerancia a DMSO y el tiempo de desarrollo del ensayo. También se dispone de información adicional con estímulos alternativos. Si es cliente del sector académico y sin ánimo de lucro, consulte nuestros precios especiales.