TA Cloning™ Kit, with pCR™2.1 Vector and One Shot™ TOP10F' Chemically Competent E. coli
TA Cloning&trade; Kit, with pCR&trade;2.1 Vector and One Shot&trade; TOP10F' Chemically Competent <i>E. coli</i>
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TA Cloning™ Kit, with pCR™2.1 Vector and One Shot™ TOP10F' Chemically Competent E. coli

El kit TA Cloning™ con vector pCR™2.1 proporciona una estrategia de clonación rápida y de un paso para insertar directamenteMás información
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Número de catálogoN.º de reacciones
K20300120 reacciones
K20304040 reacciones
Número de catálogo K203001
Precio (EUR)
654,00
Each
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N.º de reacciones:
20 reacciones
Precio (EUR)
654,00
Each
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El kit TA Cloning™ con vector pCR™2.1 proporciona una estrategia de clonación rápida y de un paso para insertar directamente un producto de PCR amplificada con Taq en un vector plasmídico. El kit TA Cloning™ usa el vector de clonación pCR™2.1 y ligasa de ADN T4 ExpressLink™ para generar un producto de ligadura en un paso de ligadura de quince minutos a temperatura ambiente. Las reacciones suelen producir > 80 % de recombinantes que contienen insertos.

Características del kit TA Cloning™ con vector 2.1 pCR™:
Rápido y cómodo: ligación de 15 minutos a temperatura ambiente
Eficaz: detección azul/blanco y > 80 % de los clones con inserto adecuado
Flexible: elección de resistencia a kanamicina o ampicilina para la selección flexible de antibióticos
Sin complicaciones: elimina cualquier modificación enzimática del producto de PCR
Optimizado: no requiere el uso de primers de PCR que contengan sitios de restricción

El vector pCR™2.1 proporciona:
• Salientes 3'-T para la ligación directa de productos de PCR amplificados con Taq
• Promotor T7 para transcripción y secuenciación de ARN in vitro
• Un poliligador versátil con sitios EcoR I flanqueados para facilitar la escisión de insertos
• Sitios de primer directo e inverso M13 para secuenciación

Cómo funciona TA Cloning™
La polimerasa Taq tiene una actividad independiente de plantilla que añade una sola desoxiadenosina (A) a los extremos 3' de los productos PCR. El vector linealizado suministrado en este kit tiene residuos de una sola desoxiadenosina 3' (T). Esto permite a los insertos de PCR ligar eficazmente con el vector.

Configuraciones del kit
El kit TA Cloning™ se ofrece en una variedad de configuraciones: sin células competentes (K2020-20 y K2020-40), con E. coli competente químicamente One Shot™ INVF' (K2000-01 y K2000-40), con E. coli competente químicamente One Shot™ TOP10F' (K2030-01 y K2030-40) y con E. coli competente químicamente One Shot™ TOP10 (K2040-01 y K2040-40) en tamaños de kit de 20 y 40 reacciones.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones
Cepa bacteriana o de levaduraTOP10F ́
Tipo de célulaE. coli químicamente competente
Método de clonaciónTA Cloning
Para utilizar con (aplicación)Clonación PCR
N.º de reacciones20 reacciones
Línea de productosOne Shot
Tipo de productoKit de clonación
PromotorT7
Cantidad20 reactions
VectorpCR2.1
FormatoKit
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Los kits TA Cloning™ contienen el vector pCR™2.1 linealizado, la ligasa de ADN T4 ExpressLink™, el tampón de ligación de ADN T4 5X ExpressLink™, dNTPs, el tampón de PCR 10X, agua esterilizada y controles. Los kits de células competentes contienen E. coli químicamente competente One Shot™, medio SOC y un plásmido de control superenrollado.

Almacene el E. coli de One Shot™ a - 80 °C. Almacene todos los demás componentes a - 20 °C. Se garantiza la estabilidad de todos los reactivos durante 6 meses si se almacenan correctamente.

Preguntas frecuentes

Can I use TOP10F' competent cells for transformation of my TOPO vector that contains the ccdB gene?

Strains that contain an F plasmid, such as TOP10F', are not recommended for transformation and selection of recombinant clones in any TOPO vector containing the ccdB gene. While the F plasmid does encode the CcdA protein, which acts as an inhibitor of the CcdB gyrase-toxin protein, the half-life of the CcdA protein is shorter than that of the CcdB protein. Overexpression of the CcdB protein causes cell death when its action is not prevented by sufficient CcdA.

Citations & References (4)

Citations & References
Abstract
Xath5 participates in a network of bHLH genes in the developing Xenopus retina [published erratum appears in Neuron 1998 Nov;21(5):following 1221]
Authors:Kanekar S, Perron M, Dorsky R, Harris WA, Jan LY, Jan YN, Vetter ML
Journal:Neuron
PubMed ID:9390513
'We examined the function of basic-helix-loop-helix (bHLH) transcription factors during retinal neurogenesis. We identified Xath5, a Xenopus bHLH gene related to Drosophila atonal, which is expressed in the developing Xenopus retina. Targeted expression of Xath5 in retinal progenitor cells biased the differentiation of these cells toward a ganglion cell fate, ... More
T cell receptor recognition of MHC class II-bound peptide flanking residues enhances immunogenicity and results in altered TCR V region usage.
Authors:Carson RT, Vignali KM, Woodland DL, Vignali DA
Journal:Immunity
PubMed ID:9324359
'Naturally processed MHC class II-bound peptides possess ragged NH2 and COOH termini. It is not known whether these peptide flanking residues (PFRs), which lie outside the MHC anchor residues, are recognized by the TCR or influence immunogenicity. Here we analyzed T cell responses to the COOH-terminal PFR of the H-2A(k) ... More
High-performance subtractive hybridization of cDNAs by covalent bonding between specific complementary nucleotides [In Process Citation]
Authors:Ying SY, Lin S
Journal:Biotechniques
PubMed ID:10337490
We have developed an improved subtractive hybridization method that provides a fast, simple and reliable isolation of desired different sequences from two compared DNA libraries, one of which contains all unwanted homologues (subtracter) and another contains certain desired heterologues (tester). The DNA library can be made from either mRNA or ... More
Immunogene therapy of tumors with vaccine based on Xenopus homologous vascular endothelial growth factor as a model antigen.
Authors: Wei Y Q; Huang M J; Yang L; Zhao X; Tian L; Lu Y; Shu J M; Lu C J; Niu T; Kang B; Mao Y Q; Liu F; Wen Y J; Lei S; Luo F; Zhou L Q; Peng F; Jiang Y; Liu J Y; Zhou H; Wang Q R; He Q M; Xiao F; Lou Y Y; Xie X J; Li Q; Wu Y; Ding Z Y; Hu B; Hu M; Zhang W;
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:11553767
Overcoming immune tolerance of the growth factors associated with tumor growth should be a useful approach to cancer therapy by active immunity. We used vascular endothelial growth factor (VEGF) as a model antigen to explore the feasibility of the immunogene tumor therapy with a vaccine based on a single xenogeneic ... More