El kit FP (filtro y precipitador) para plásmidos Maxiprep PureLink™ HiPure aísla el ADN plasmídico, desde el sedimento celular hasta el ADN ultrapuro, en menos de una hora. Con las columnas de filtro HiPure y los precipitadores HiPure suministrados en el kit, puede purificar el ADN plasmídico sin los pasos de centrifugación requeridos en los protocolos de aislamiento tradicionales. La calidad del ADN plasmídico purificado es equivalente a la obtenida con dos pases a través de gradientes de cloruro de cesio (el método más exigente para la purificación del ADN), de manera que es adecuado para la transfección y otras aplicaciones que requieren ADN plasmídico de alta pureza. El kit FP para plásmidos Maxiprep PureLink™ HiPure (tabla 1) proporciona:
• Protocolos simples: aclaración de lisados bacterianos y precipitación de isopropanol sin centrifugación
• Resultados rápidos: desde el sedimento de células E. coli hasta el ADN plasmídico de alta pureza para transfección en unos 60 minutos
• Gran producción: hasta 850 µg de plásmidos de alto número de copias

Funcionamiento
El kit FP de plásmidos Maxiprep PureLink™ HiPure emplea un método de lisis alcalina para preparar y eliminar rápidamente lisados bacterianos sin necesidad de centrifugación (figura 1). La exclusiva columna de filtración HiPure incluye un cartucho de filtrado de lisados integrado en la columna de intercambio de aniones para la clarificación de lisados en un solo paso y la unión de ADN plasmídico. Las impurezas como el ARN, las proteínas y otros contaminantes se eliminan con un solo lavado, y el ADN plasmídico ultrapuro se eluye con un tampón de alto contenido de sal. Para precipitar y desalar el ADN, se añade isopropanol al ADN eluido y la mezcla se aplica al precipitador HiPure con una jeringa grande. Después de un paso posterior de lavado y secado, el ADN plasmídico se eluye fácilmente desde el precipitador HiPure con tampón TE o agua. El uso del precipitador elimina la necesidad de centrifugación, reduciendo el riesgo de perder el sedimento de ADN durante la extracción del sobrenadante y ahorrando tiempo. El ADN resultante está listo para su uso en las aplicaciones más exigentes. Todo el protocolo, desde el sedimento de células E. coli hasta el ADN plasmídico de alta pureza para transfección se puede completar en aproximadamente una hora.

Gran producción y concentraciones listas para usar
El precipitador HiPure se ha optimizado para permitir volúmenes de elución más bajos (hasta 500 µl) para producir ADN altamente concentrado sin una disminución significativa de la producción. De hecho, la producción a concentraciones más altas es consistentemente más alta que los kits de la competencia (figura 2). La producción y la concentración se pueden ajustar para satisfacer las necesidades de su aplicación posterior.